153084. lajstromszámú szabadalom • Eljárás egy új polipeptid előállítására

153084 » 18 13. példa: Tiitil-O-terc-butil-L-glutamil-Im-tirtil-L-hisztidil-L-fenilalanil-L-arginil-L-triptofanil-glicil-N-«-karbo-terc.-amiloxi-L-lizil-L-prolin- 5 -2,4,5-triklórfenilészter [Trit-Glu-(OTB)-(Trit)Hisz-Fe-Arg-Tri-Gli-(KAT)Liz-Pro-OCF] (C ábra) 100 g KBO-(N02

)Arg-Tri-Gli-OMe-t 1500 ml 10 vizes dioxánban (2:8) oldunk, 250 ml n-nátronlúgot adunk hozzá, 1 óra hosszat 20°~on állni hagyjuk, 5000 ml 0,05 n-kénsavba öntjük, a csapadékot leszívatjuk, vízzel, alkohollal, dietilétérrel és petroléterrel mossuk, és megszárít- 15 juk. 95 g KBO-(N02

)Arg-Tri-Gli-OH-t kapunk. Olvadáspontja 225°. M20

D

= —14° dimetilformamidban. A terméket 1100 ml piridinben oldjuk, 85 g tri(2,4,5-trikólrfenil)-foszfitot adunk hozzá, 16 óra hosszat 20p

-on keverjük, bepárol- 20 juk, ecetéterben oldjuk, híg kénsawal mossuk, megszárítjuk és tbepároljuk. A maradványt ecetéter-dietiléterből kikristályosítjuk és így 125 g KBO-(N02

)Arg-Tri-Gli-OCF-et kapunk. Olvadáspontja 124°. [«]20

D

= —9° dimetilformamid- 2

5 ban. Az így kapott tripeptidésztert 240 ml dimetilformamidban oldjuk, 750 g H-(KAT)Liz-Pro-OH-t (12. példa) adunk hozzá, 16 óra hoszszat 20°-on keverjük, dietilétérrel kicsapjuk, szűrjük, a csapadékot vizes ecetéterben oldjuk, 30 n-citromsawal mossuk, megszárítjuk és bepároljuk. A maradványt kétszer ecetéterből átkristályosítjuk. 125 g KBO-(N02)Arg-Tri-Gli-(KAT)Liz-Pro-OH-t ' kapunk, olvadáspontja 140°. [a]20

D = —20° dimetilformamidban.

35 85 g KBO-(N02

)Arg-Tri-Gli-(KAT)Liz-Pro-OH-t 450 ml jégeoetben oldunk, 50 ml vizet és 50 g 10%-os palládiumszenet adunk hozzá, hidrogénezzük, leszűrjük, bepároljuk, vízben oldjuk, liofilizáljuk és nátronlúg fölött megszáríts 40 juk. 46 g H-Arg-Tri-Gli-(KTB)Liz-Pro-OH-t kapunk. [«]20

D=—9°

95%-os ecetsavban. 61,5 g Trit-Glu(OTB)-(Trít)Hisz-Fe-NHNH2

-t (4. példa) 150 ml dimetilformamidban és 150 ml izopropanolban oldunk, —10°-ra hűtjük, és 45 60 ml 4n sósavat adunk hozzá, majd 13,5 ml 5n nátriumnitrit-oldatot keverünk bele. 5 perc elteltével 42 ml trietilamint és 1500 ml jeges vizet adunk hozzá, leszívatjuk, a csapadékot ecetéterben oldjuk, telített konyhasó oldattal 50 mossuk, megszárítjuk, 0°-on bepároljuk, a maradványt 150 ml dimetilformamidban oldjuk, 40,0 g H-Arg-Tri-Gli-(KAT)Liz-Pro-OH.3 AcOH-t és 6,0 ml trietilamint adunk hozzá, 16 óra hosszat 0°-on állni hagyjuk, 1500 ml ecetétert 55 adunk hozzá, 0,5 n-ecetsawal, vízzel és 0,5 n-piridinnel mossuk, bepároljuk, a maradványt 150 ml ecetéterben oldjuk és dietilétérrel kicsapjuk. 70 g Trit-Glu(OTB)-(Trit)Hisz~-Fe-Arg-Tri-Gli-(KAT)Liz-Pro-OH-t kapunk. Olvadás- 60 pontja 150°. [a]20

D

= —15° dimetilformamidban. Az ily módon kapott peptidet 300 ml piridinben oldjuk, —20°-ra hűtjük, 45 ml dioxános n-sósavoldatot adunk hozzá, 5 percig —20°-on 65 keverjük, 12 ml trietilamint adunk hozzá, a, térfogata felére koncentráljuk, 45 g tri(triMórfenil)-foszfitot adunk hozzá, 16 óra hosszat 20°on állni hagyjuk, bepároljuk, a maradványt dietilétérrel feldolgozzuk, eoetéterben oldjuk, dietilétérrel lecsapjuk, szűrjük és megszárítjuk. 78 g Trit-Glu(OTB)-(Trit)Hisz-Fe-Arg-Tri-Gli-(KAT)Liz-Pro-OCF.HCl-t kapunk. Olvadáspontja 170° bomlás közben. [«]2°D

= — 20° dimetilformamidban. 14. példa: L-Szerü-L-tirozil-L-szeril-L-norleucil-L-glutamil-L^hisztidil-L-fenilalanil-L-arginil-L-triptofanil-glicil-L-lizil-L-prolil-L-valil-glicil-L-lizil-L-lizil-L-lizil-L-lizil-L-prolil-L-valil-L-lizil-L-valil-L-tirozil-L-prolil-L-valinamid (H-Szer-Tir-Szer-Nle-Glu-Hisz-Fe-Arg-Tri-Gli-Liz-Pro-Val-Gli-Liz-Liz-Liz-Liz-Pro-Val-Liz-Val-Tir-Pro-Val-NH2

) (D ábra) 18,5 g Trit-Glu(OTB)-(Trit)Hisz-Fe-Arg-Tri-Gli-(KAT)Liz-Pro-OCF.HCl-t és 18$ g H-Val-Gli-(KAT)LiZs(KAT)iLiz-(KAT)Liz-(KAT)Liz-Pro-Val-<KAT)Liz-Val-Tir-Pro-Val-NH2

-t (12. példa) 60 ml dimetilforimamidban oldunk, 9,0 g imidazolt adunk hozzá, és 3 napig 20°~on állni hagyjuk. Ugyanabból az oktapeptid-hidrokloridból további 1,8 g-ot adunk hozzá, még 16 óra hosszat 20°-on állni hagyjuk, ecetéterrel kicsapjuk, szűrőre visszük, a csapadékot etanolban oldjuk, ecetéterrel kicsapjuk, szűrjük és megszárítjuk. 26,0 g Trit-Glu(OTB)-(Trit)Hisz-Fe-Arg-Tri-Gli-(KAT)Liz-Pro-Val-Gly-(KAT)Liz-l(KAT)Liz-(KAT)Iiz

1

-(KAT)Liz-Pro-Val-(KAT)Liz-Val-Tir-Pro-Val-NH2

-t kapunk (o. p. 190° bomlás közben, [«]20

D

=—27° dimetilformamidban), ezt 200 ml 80%-os ecetsavban oldjuk, 2 óra hosszat 30°-on állni hagyjuk, bepároljuk, eoetéterrel mossuk, szűrjük és megszárítjuk. 22 g H-Glu(OTB)-(Trit)Hisz-Fe-Arg-Tri-Gli--(KAT)Liz-Pro-Val-Gli-(KAT)Liz-(KAT)Liz-(KATJLiz-ÍKATJLiz^Pro-Val-íKATJLiz-Val-Tir-Pro-Val-NH2

.aoetátot kappunk. 2,3 g Trit-Szer-Tir-Szer-Nle-NH-NH2

-t (5. példa) 12 ml dimetilformamidban oldunk, 4 ml vizet adunk hozzá, —10°-ra hűtjük. 2 ml 6n sósavat adunk hozzá, 280 mg nátriumnitritet keverünk bele, 5 percig —5°-on keverjük, 300 ml 0,2 n-káliumhidrogénkarbonát-oldatot adunk hozzá és centrifugáljuk. A kapott Trit-Szer-Tir-Szer-Nle-N3

-at 50 ml dimetilformamidban oldjuk, 10,5 g H-Glu(OTB)-(Trit)Hisz-Fe-Arg-Tri-Gli-(KAT)Liz-Pro-Val-Gli-(KAT)Liz-<KAT)Liz-(KAT)Liz-(KAT)Liz-Prq-Val-(KAT)Liz-Val-Tir-Pro-Val-NH2

.aoetátot adunk hozzá, 12 óra hoszszat 0°-on állni hagyjuk, 2,0 g Trit-Szer-Tir-Szer-Nle-NHNH2

4>ől előállított további tetrapeptidazid adagot adunk hozzá, 6 óra hosszat 0°-on állni hagyjuk, bepároljuk, ecetéterrel feldolgozzuk, forró aeetonnal és ecetéterrel mossuk és vákuumban megszárítjuk. A kapott terméket 100 ml 90%-os trifluorecetsavban oldjuk, 1 óra hosszat 20°-on nitrogénatmoszférá-