153084. lajstromszámú szabadalom • Eljárás egy új polipeptid előállítására
7 153Ö84 8 22 g H-Val-(KTB)Liz-Val-Tir-Pro-Val-NH2-t kapunk. [a]21D= —26° dimetilförmamidban. 3. példa: L-valil^glicil-s-N-karbo-terc.-butöXi-L-lizil-N-karbo-terc.-ibutoxi-L-lizil-s-N-Jkarbo-terc.-bütoxi-L4izil-£-N-karbo^terc-butoxi-L-lizil-L-prolll-L-valil-«-N-karbo-tere.-butöxi-L-lizil-L-valil-L-tirozil-L-prolil-L-valinamid (H-Val-Gli-(KTB)Liz-(feTB)Liz-(KTB)Liz-(KTB)Liz-Pro-Val-(KTB)Liz-Val-Tir-Pro-Val-NH2 ) (B. ábra) 470 g KBO-(KTB)Lia-OH-t és 182 ml trietilamint feloldunk 5000 ml ecetéterben, hozzácsepegtetünk —5°-on 125 ml klórhangyasavetilésztert, —5°-on 30 percig keverjük, hozzáadunk 190 g H-Pro-OMe-4, 4 óra hosszat 20°-on állni hagyjuk, híg kénsavval és ammóniával mossuk, mégszárítjuk, és bepároljuk. 550 g olajos dipeptidet kapunk, ezt feloldjuk 3000 ml dioxánban, lehűtjük 0°-ra, 3000 ml n nátronlúgot adunk hozzá, 1 óra hosszat 20°-on rázatjuk, 3000 ml-re koncentráljuk, 3000 ml vizet adunk hozzá, dietilétérrel mossuk, 0°-^ra hűtjük, 10%-os foszforsavval 2 pH-ra megsavanyítjuk, a kivált olajat eoetéterrel extraháljuk, megszárítjuk, bepároljuk, a maradványt petroléterrel imossuk és megszárítjuk. 470 g KBO(KTB)Liz-Pro-OH-t faapunk ([«]20 D = —43° dimetilförmamidban), ezt 3000 ml metanolban és 300 ml vízben oldjuk, és 30 g 10%-os palládiumszén jelenlétében hidrogénezzük. Leszűrjük, bepároljuk, és a maradványt dietiléterrel mossuk. 323 g H-(KTB)Liz-Pro-OH-t kapunk. Olvadáspontja 114°. [a]«2 D = = —52° dimetilformamiddal. A fentiek szerint kapott dipeptidet feloldjuk 1000 ml dimetilförmamidban, hozzáadunk 480 g KBO-(KTB)Liz-OCF~et, 12 óra hosszat 20°-on állni hagyjuk, bepároljuk, a maradványt 1000 ml nátriumhidrogénkarbonát oldatban oldjuk, dietiléterrel mossuk, a vizes fázist 10%-os citronisavoldattal megsavanyítjuk, ecetéterrel extraháljuk, megszárítjuk, bepároljuk, és a maradványt petroléterrel feldolgozzuk. 308 g KBO-(KTB)Liz-Pro-OH-t kapunk (op. 125°), ezt feloldjuk 3000 ml metanolban és 300 ml vízben, 45 g palládiumszén jelenlétében hidrogénezzük, leszűrjük, bepároljuk, és a maradványt dioxán-dietiléterből átkristályosítjuk. 205 g H-(KTB)Liz-(KTB)Liz-Pro-OH-t kapunk. Olvadáspontja 160". [a;]2oD = _24 0 dimetilförmamidban. 380 g KBO^(KTB)Liz-OH-t és 260 g H-(KTB)Liz-OMe-t feloldunk 1500 ml acetonitril és 300 ml dimetilformamid elegyében, —20°-ra hűtjük, 206 g diciklohexií-karbodiimidet adunk hozzá, —5°-on 12 óra hosszat rázatjuk, leszűrjük, bepároljuk, a maradványt ecetéterben oldjuk, híg kénsavval és ammóniaoldattal mossuk, megszárítjuk, bepároljuk, és a maradványt dietiléter-petroléterből átkristályosítjufc. 410 g KBO-(KTB)Liz-(KTB)Liz-OMe-t kapunk. Olvadáspontja 105°. [a]2oD =_10° metanolban. A fentiek szerint előállított dipeptidésztert 3000 ml metanolban oldjuk, 50 g palládiumkatalizátor jelenlétében hidrogénezzük, és szűrés után bepároljuk. A maradványt 1000 ml di-5 metuformamidban oldjuk, 310 g KBO-Val-Gli-OCF-et adunk hozzá, 12 óra hosszat 20°-oil állni hagyjuk, bepároljuk, etiléterrel feldolgozzuk, vizes metanolból (1 :1) átkristályosítjuk és megszárítjuk. 448 g KBO-Val-Gli-(KTB)Lizr-10 -(KTB)Liz-OMe-t kapunk. Olvadáspontja 191° M20 D = — 16° metanolban. Az így kapott tetrapeptidésztert 600 ml metanolban oldjuk, 200 ml hidrazinhidrátot adunk hozzá, 16 óra hosszat 20°-on állni hagyjuk, 2000 15 ml vízbe öntjük, leszűrjük, vízzel mossuk, kénsav fölött megszárítjuk, metanolban oldjuk, éterbe öntjük, leszűrjük, és megszárítjuk. 366 g KBO-Val-Gli-(KTB)Liz-(KTB)Liz-NHNH2 -t kapunk. Olvadáspontja 204—206°. [a]20D =_n° 20 dimetilförmamidban. 48,2 g KBO-Val-Gli-(KTB)Liz-(KTB)Liz-NHNH2 -t feloldunk 400 ml dimetilformamid, 100 ml izopropanol és 60 ml 4n sósav —10°-ra hűtött elegyében, erőteljes keverés közben hoz-25 zácsepegtetünk 14 ml 5n nátriumnitrit oldatot, még 5 percig —5°-on keverjük, hozzáadunk 35 ml trietilamint, majd 1000 ml jeges vizet, alaposan leszívatjuk, a csapadékot 200 ml dimetilförmamidban oldjuk, 28,5 g N-(KTB)Liz-(KTB)-30 Lizr-Pro-OH-t és 7 ml trietilamint adunk 'hozzá, nagyvákuumban 180 ml-re bepároljuk, 16 óra hosszat 0°~on állni hagyjuk, 1500 ml ecetétert adunk hozzá, híg ecetsavval mossuk, az ecetétert elpárologtatjuk, a maradványt 2000 ml 35 vízbe öntjük, leszűrjük, és nátriumhidroxid fölött megszárítjuk. 42 g KBO-Val-Gli-(KTB)Liz-(KTB)Liz-(KTB)Liz-(KTB)Liz-Pro-OH-t kapunk. Olvadáspontja bomlás közben 156°. [«]20D =—5° dimetilförmamidban. 40 Az így kapott heptapeptidet 160 ml abszolút piridinben oldjuk, bepároljuk, a maradványt 160 ml abszolút piridinben oldjuk, 22 g tri-(2,4,5-triklórfenil)-foszfitot adunk hozzá, 16 óra hosszat 20°-on keverjük, bepároljuk, a marad-45 ványt écetéterben oldjuk, híg kénsawal, majd n nátriumhidrogénkarbonátoldattal mossuk, nátriumszulfát fölött megszárítjuk, bepároljuk, és a maradványt eoetéter-petroléterből kikristályosítjuk. 44 g KBO-Val-Gli-(KTB)Liz-<KTB)Liz-50 -(KTB)Liz-(KTB)Liz-Pro-OCF-t kapunk, amelyet azonnal 150 ml dimetilförmamidban oldunk, 38 g H-Val-(KTB)Liz-Val-Tir-Pro-Val-NH2 -t adunk hozzá, 2 napig 20°-on állni hagyjuk, dietiléterrel kicsapjuk, szűrjük, és megszárítjuk. A kapott 55 terméket vizes metanolban (2 : 8) oldjuk, savas ioncserélővel kezeljük, bepároljuk, és a maradványt vizes etanolból (2 :8) kikristályosítjuk. 45,5 g KBO-Val-Gli-(KTB)Liz-(KTB)Liz-(KTB)Liz-(KTB)Liz-Pro~Val-(KTB)Liz-Val-Tir-Pro-60 -Val-NH2 -t kapunk. Olvadáspontja bomlás közrben 198°. [a]w D = -f-5° dimetilförmamidban. A kapott tridekapeptidet 500 ml metanolban oldjuk, 5 g palládiumszén jelenlétében hidrogénez^ zük, szűrjük, bepároljuk, és a maradványt diss etiléterrel feldolgozzuk. 26,3 g H-Val-Gli-(KTB)-4
