153083. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új antibiotikumok előállítására
3 153083 4 tal éter-származékokká, diazometánnal pedig dimetilétérré alakíthatjuk át a Rhi 12—-648 antibiotikumot. Az S 1440, S 1476 és S 1484 gombatörzsek a szokásos tápanyagokat tartalmaz» különféle táp- 5 talajokon szaporíthatok. Így e törzsek a szén-heterotrof organizmusok számára szokásos módon alkalmazott tápanyagokat, mint glükózt, keményítőt, dextrint, liaktózt, szacharózt, stb. hasznosíthatnák szénforrásként, szerves vagy 10 szervetlen nitrogéntartalmú vegyületeket, mint peptont, élesztőt, húskivonatokat, - ammóniumszulfátot, ammóniunmitrátot, aminosavakat stb. nitrogénforrásként, emellett a szokásos ásványi sókat és nyomelemeket is igénylik. 15 Az ilyen összetételű táptalajokat az S 1440, S 1476, ill. S 1484 törzsek valamelyikének kultúrájával beoltjuk, majd a tenyészetet 2—25 napig szobahőmérsékleten inkubáltatjuk. Amint a Rhi 12—648 antibiotikum maximális mennyi- 20 sége képződött, a kultúrát leszűrjük és a, keletkezett új antibiotikus hatású anyagot a tápközegből önmagukban ismert extrakciós vagy adszorpciós módszerekkel kinyerjük. A termelt hatóanyag kinyerésének egyik igen 25 előnyösnek bizonyult módszere az etilacetáttal történő extrahálás, alkalmazhatunk azonban erre a célra más szerves oldószereket, mint pl. benzint, benzolt, butilíaeetátot, kloroformot vagy -butanolt is. A kivonatot azután mentesítjük az 30 oldószertől és a maradékot a kívánt .antibiotikum elkülönítése céljából kromatográfiai úton, adszorbens anyagok, mint aktivált timföld, szilikagél, magnéziumszilikát vagy hasonlók segítségével, vagy pedig ellenáramú megoszjlásos 35 módszerrel tisztítjuk. Az új Rhi 12—648 antibiotikum jellemző adatai az lalábbiak: Olvadáspont (fűthető mikroszkóp alatt meghatározva) 197—199 C° (korrigálatlan érték); 40 [«]22D = 4-2 07 o (c = i ( 57 kloroformban). Ibolyántúli színkép (lásd 1. ábra): maximum 265 millimikronnál; log e = 4,17 metanolban. Infravörös színkép (lásd 2. ábra): sávok 3100, 2980, 1655, 1572, 1430, 1352, 1310, 1245, 1110, 1045, 45 983, 925 és 845 cm-1 értéknél (káliumbromidban). Mágneses magrezonancia-spektrum: többek között dublett s = 1,52 ppm (3 proton) és szinglett 8 = 6,68 ppm (1 proton) értéknél. (Me4 Si: s = 0,00 ppm értéknél). 50 Elemzés céljából az anyagot 12 óra hosszat szárítottuk 0,01 mm Hg-oszlop nyomás alatt, 25 C° hőmérsékleten. Tapasztalati képlet CmH^OßCl; M = 364,8, számított értékek: C 59,3%, H 4,7%, O 26,3%, 55 ; Cl 9,7%; talált értékek: C 59,1%, H 4,6%, O 25,1%, Cl 10,0%; C 59,4%, H 4,6%, O 25,6%, Cl 9,9%. 60 A termoelektromos módszerrel végzett molekulasúly-meghatározás során kapott értékek: 368, ill. 382 + 2%. Színreakciók: a Rhi 12—648 metaripldS oldata 65 \ . vizes FeCl3 -oldat hozzáadására erősen ibolyaszínűre színeződik. 2 n nátriumihidroxidoldat hatására sárgásvörös, tömény kénsav hatására bamásibolya színeződést kapunk. Az új Rhi 12—648 antibiotikum dimetilétere az alábbi jellemző adatokat mutatja: Olvadáspont 187—-189 C°. Ibolyántúli színkép (lásd 3. ábra): maximum 277 millimikronnál (log £ = 4,21) metanolban. Infravörös szín„kép (lásd 4. ábra): sávok 2950, 1720, 1650, 1595, 1470, 1340, 1270, 1215, 1085, 920 és 870 cm"1 értékeknél (káliumbromidhan). Mágneses magrezonancia-színkép: többek között dublett s = 1,53 ppm (3 proton) szinglett s = 3,85 ppm (3 proton) szinglett S = 3,92 ppm (3 proton) szinglett s = 6,52 ppm (1 proton) értékeknél. Elemzés céljaira az .anyagot nagyvákuumban 12 óra hosszat szárítottuk 25 C° hőmérsékleten. Tapasztalati képlet C20 H 2 iO 6 Cl, M = 392,8 számított értékek: C 61,2%, H 5,3%, O 24,4%, Cl 9,1%; talált értékek: C 59,8%, H 5,2%, O 24,2%, Cl 9,4%, (= 98,6%). Az új Rhi 12—648 antibiotikum dimetilétere FeCl3 oldattal nem ad színeződést. Az új Rhi 12—648 antibiotikum diaoetátja az alábbi jellemző adatokat mutatja: Olvadáspont 190—192 C°. Ibolyántúli színkép (lásd 5. .ábra): maximum 277 millimikronnál (log £ = 4,15) metanolban. Infravörös színkép (lásd 6. ábra): sávok 2950, 1775, 1735, 1667, 1600, 1370, 12(65, 1195, 1108, 1062, 1002, 930, 897 és 8601 cm -1 értékeknél (káliumbromidban). Máneses magrezonancia-színképp ^ többek között dublett s = 1,55 ppm, (3 proton) szinglett s — 2,27 ppm (3 proton) szinglett s = 2,33 ppm (3 proton) szinglett 5 = 7,10 ppm (1 proton) értékeknél. Elemzés céljaira az anyagot 12 óra hosszat szárítottuk nagyvákuumban 25 C° hőmérsékleten. Tapasztalati képlet: C22 H 2 i0 8 Cl, M = 448,9 számított érték: C 58,8%, H 4,7%, O 28,5%, Cl 8,0%; talált értékek: C 58,5%, H 4,6%, O 28,2%, Cl 8,1%. A termoelektromos módszerrel végzett molekulasúlymeghatárqzás 440 + 2%. Az új Rhi 12—648 antibiotikum diacetátja FeCl3 oldattal nem ad színreakciót. Az új Rhi 12—648 antibiotikum „in vitro" határozott gátló hatást mutat élesztőkkel és gombákkal szemben; e hatásra vonatkozólag az alábbi táblázat tartalmaz tájékoztató adatokat: következő táblázat tartalmaz tájékoztató adatokat:
