152950. lajstromszámú szabadalom • Eljárás fehérjetartalmú termékek előállítására mikroorganizmusok tenyésztése útján

1 152950 V.) 14 a fermentorba; ez a mennyiség elegendő volt ahhoz, hogy a sejtsűrűséget 2 g/liter szintre emeljük. A kultúra hőmérsékletét 30±1 C°-ra szabályoztuk, a pH-értéket 4-re, míg a keverés és szellőzés olyan mértékű volt, hogy a kultúra percenként és literenként' 3 millimól oxigént kapjon. Egy önműködő pH-szabályozó rendszer útján 10 n vizes ammóniaoldatot adagoltunk be a fermentációs rendszerbe. Amikor a betáplált ammóriiaoldat mennyisége elérte a 20 ml-t, megkezdtük a gázolaj beadagolását oly menynyiségi arányban, amely megfelelt a kultúra elméleti ~ szükségletének, feltételezve, hogy az élesztőhozam y 100 X termelt élesztő betáplált gázolaj = 10% 10 20 és a sejtosztódási idő 3. óra. Ezt a hozzáadást óránként végeztük mindaddig, -míg a hozzáadott gázolaj teljes mennyisége el nem érte a 250 g/litert, vagyis összesen 17 litert. A hozzáadást a tizenötödik óráig (bezárólag) 25 folytattuk. 1 g/liter kezdeti sejtsűrűséggel indulva, 15 óra alatt 8 g/liter sejtsűrűséget értünk el. A fermentáció termeikét centrifugáltuk és,* az élesztőpépet elkülönítettük a termékből. 30 8,4 kg ily elkülönített élesztőpép 2 kg szárazanyagot (a visszatartott szénhidrogéneket nem számítva), 1 kg anyagcsere útján fel nem használt szénhidrogént és 1 kg fehérjét tartalmazott; ehhez a péphez 14,5 liter vizet adtunk, 35 amely 180 g nátriumkloridot is tartalmazott feloldva. Az elegyet 10 óra hosszat állandó lassú keverés közben 50 C°-on tartottuk, a pH-érték szabályozása nélkül. Az így kapott termék kb. 40 600 g fehérjét és 1200 g szólubilizált szárazranyagot tartalmazott. Ezt a terméket Sharples-centrifugában 11 000 fordulat/perc fordulatszámmal két fokozatban centrifugáltuk, hogy így két fázist különítsünk 45 el: egy átlátszó folyékony autollzátumot, amely 500 g fehérjét tartalmazott, és a maradékot, amely a sejtfalanyagokat tartalmazta szénhidrogénekkel csekély mértékben, átitatott állapotban. '50 A maradékként kapott sejtfalanyagokat részrleges szárításnak vetettük alá. így 20 súly% vizet tartalmazó termékhez jutottunk, amelyet a jelenlevő olajos anyagok eltávolítása céljából n-hexán és izopropanol azeotropos elegyével 55 extrahálunk 55 C°-on oly módon, hogy a kezelt anyag 1 kg-jára (az anyagban jelenlevő szárazanyagra számítva) 5 liter oldószer jusson. Az így olajtól mentesített terméket állati takarmányként lehet felhasználni. 60 Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás fehérjetartalmú termék előállítására, azzal jellemezve, hogy egy mikroorganiz- 65 must egyenesláncú szénhidrogénekből álló vagy ilyeneket tartalmazó kiindulóianyag jelenlétében tenyésztünk, majd a mikroorganizmus tenyésztése során kapott termék oly frakciójából, amely a termelt mikroorganizmust tartalmazza, önmagukban ismert módszerekkel a mikroorganizmusban jelenlevő vagy abból származó egyvagy többféle nitrogéntartalmú vegyületet, még pedig fehérjéket, polipeptideket és/vagy aminosavakat választunk ki. (Elsőbbsége: 1963. február 08.) 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás kiviteli módja, azzal jellemezve, hogy a mikroorganizmust egyenesláncú szénhidrogénekből álló vagy ilyeneket tartalmazó kiindulóanyag jelenlétében tenyésztjük, a tenyésztés során kapott termékből a termiéit .mikroorganizmust tartalmazó frakciót, a vizes tápközeget tartalmazó frakciót és — ha a termékben számottevő mennyiségű szénhidrogén van jelen — az említett szénhidrogéneket tartalmazó frakciót különítünk el, ezután a mikroorganizmust tartalmazó frakciót felváltva végzett mosási és elválasztási műveletek sorozatának vetjük alá, mimellett az első .mosási műveletben valamely felületaktív szer vizes oldatát, az utolsó mosási műveletben pedig felületaktív szertől mentes vizes közeget alkalmazunk, míg az elválasztási műveletekben a mikroorganizmust elválasztjuk a vizes fázistól, majd az elkülönített mikroorganizmust további kezelési műveletbe visszük, mimellett az említett mosási és elválasztási műveleteket oly 'módon végezzük, hogy az e műveletsorból kinyert mikroorganizmustermék annak száraz súlyára számítva 7%-nál kevesebb szénhidrogént tartalmazzon, azután a mosott mikroorgamizmustermék sejtjeit '• elroncsoljuk és extraháljuk. (Elsőbbsége: 1963. május 24.) 3. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti eljárás kiviteli módja, azzal jellemezve, hogy a mikroorganizmust autolízisnek, plazmolízisnek és/yagy hidrolízisnek vetjük alá, majd nitrogéntartalmú vegyületeket, még pedig fehérjéket és/vagy aminosavakat választunk ki az így kezelt termékből. (Elsőbbsége: 1963. február 08.) 4. Az előző igénypontok bármelyike szerinti eljárás kiviteli módja, azzal jellemezve, hogy a mikroorganizmust egyenesláncú ' szénhidrogé^nekből álló vagy ilyeneket tartalmazó kiindulóanyag jelenlétében tenyésztjük, majd — amenynyiben az" ennek során kapott termékben szénhidrogének vannak még jelen — a mikroorga^ nizmust tartalmazó frakciót célszerűen elkülönítjük az említett szénhidrogénektől, és a mikroorganizmus tartalmú frakcióban jelenlevő, ill. azokból származó fehérjéket, polipeptideket és/vagy aminosavakat elkülönítjük a sejtfalakat alkotó, ill. azokból származó anyagtól, majd ezt a szénhidrogénekkel szennyezett sejtfalanyagot, adott esetben előzetes módosító kezelés után, oldószeres extrakciónak alávetve a szénhidrogéneknek legalább egy részét kinyerjük a sejtfalanyagból. (Elsőbbsége: 1963. május 24.) 5. A 4. igénypont szerinti eljárás kiviteli