152818. lajstromszámú szabadalom • Eljárás fehérje tartalmú termékek előállítására mikroorganizmusok tenyésztése útján
152818 % 10 nyerési eljárásának tökéletesítésére alkalmazhatunk, az alább felsorolt bejelentéseink ismertetnek; e műveletek bármelyikének az itt leírt eljárással kapcsolatban történő alkalmazása szintén a találmány körébe tartozik. A mikroorganizmus tenyésztése és a termékek kinyerése során alkalmazható előnyös módszereket a 914 567 sz. brit szabadalom és az 1 320 058, 1 340 225, 1 361 910, 1 384 251, 1 384 252, 1 384 253, 1 385 717, 1 385 718, 1 385 719, 1,385 720, í 385 721 és 1 385 722 sz. francia szabadalmak leírása ismerteti. A találmány szerinti eljárás gyakorlati kiviteli módját az alábbi példákon mutatjuk be, megjegyezve azonban, hogy a találmány nem korlátozódik ezekre a példákra. A példákban a sejtsűrűségeket a kultúra 1 literére számított élesztő-szárazsúlyban adtuk meg. 1. példa. /" 40 liter alábbi, összetételű ásványi tápközeget bevittünk egy rozsdamentes acélból készült 60 liter űrtartalmú fermentorba. A hőmérsékletnek állandóan 30 C°-on tartása céljából a kettősfalú hengeralakú f er mentor köpenyében vizet keringtettünk. A vizes tápközeg az alábbi összetételű volt: diammóniumfoszfát 2 g káliumklorid 1,15 g magnéziums£ulfát—7H2 0 0,65 g cinkszulfát 0,17 g mangánszulfát—1H2 0 0,045 g vas(II)szulfát—7H2 0 0,068 g élesztőkivonat 0,025 g vízvezetéki víz 200 g desztillált vízzel feltöltve 1000 ml-re. Ezután a Candida lipolytica vegyes C9—Ci 6 n-paraffin-szénhidrogéneken nevelj 24 órás kultúrájából származó 20 liter inokulumot vittünk be a fermentorba és ily módon kb. 1 g/liter sejtsűrűséget kaptunk. 1,03 liter nehéz gázolajat (a fermentor 1 literjére számítva 15 g mennyiséget) adagoltunk be a fermentorba; ez a mennyiség elegendő volt ahhoz, hogy a sejtsűrűséget 2 g/liter szintre emeljük. A kultúra hőmérsékletét 30 ±1 C°-ra szabályoztuk, a pH-értéket 4-re, a keverés és szellőzés olyan mértékű volt, hogy a kultúra percenként és literenként 3 millimól oxigént kapjon. A pH érték szabályozása 10 n ammóniumhidroxidoldat önműködő hozzáadagolása útján történt. Amikor az ammónia-hozzáadagolás a 20 ml mennyiséget már elérte, megkezdtük a gázolaj szakaszos hozzáadását, a kultúra elméleti szükséglete alapján meghatározott ütemben, 100 x termelt száraz élesztő gázolaj szükséglet 10% 10 15 20 25 Su 35 40 45 50 55 60 65 0,876 120 C° +20 C° +18 e° 10 súly% 221 C° 228 C°-ig 363 C°-ig 402 C°-ig 405 C° felett 1 tfo/0 0 tf% hozamot és 3 órás sejtosztódási időt feltételezve. A • hozzáadagolás óránkint történt, mindaddig, míg összesen 250 g/liter, tehát egészben véve 17 liter gázolajat nem adtunk a kultúrához. 2 g/liter kezdeti sejtsűrűség mellett 25 óra elteltével (az exponenciális fejlődési szakasz végén) 18 g/liter sejtsűrűséget értünk el. A felhasznált nehéz gázolaj jellemző adatai: sűrűség 15 C°/4 C° lobbanáspont (Afnor) zavarosodási pont dermedéspont n-jparaffinok Saybolt-desztilláció: kezdeti forráspont 5 % átmegy 50% átmegy 95% .átmegy végső forráspont maradék veszteség 25 óra elteltével a kultúra egy részét levezettük a fermentorból, és ebből a részből 300 ml anyagcsere útján fel nem használt gázolajat nyertünk ki +5 C° hőmérsékleten lefolytatott centrifugálás útján. Ez a megmaradt gázolaj az •alábbi jellemző tulajdonságokat mutatta: sűrűség 15 C°/4 C° lobbanáspont (Afnor) zavarosodási pont dermedéspont n-^paraffinok Saybolt-desztilláció: kezdeti forráspont 5 %. átmegy 50% átmegy 70% átmegy 90% átmegy 95% átmegy végső forráspont maradék veszteség A kinyert gázolajat vízzel mostuk, és foszforpentoxid segítségével szárítottuk. Azután a gázolajat 100 mt szokásos minőségű Co/Mo hidrogénező katalizátor felett vezettük át 400 ml/óra sebességgel, 390 C° hőmérsékleten, 70 kg/cm2 nyomás alatt, 100 ml/óra hidrogénáram jelenlétében, ' E kezelés után a gázolaj zavarosodási pontja —10 C° volt. 2. példa. Folytonos fermentációt folytattunk le egy 3 liter kultúrát tartalmazó 5 literes fermentorban, amelybe 300 ml/óra sebességgel tápláltunk be olyan közeget, amely '10 súly% nehéz gázrolajat tartalmazott 90súly% oly ásványi tápko-0,890 120 C° +5 C" -13 Cf 2,1 súly0/0 248 C° 300 C°-ig 368 C°•ig 381 C°•ig 395 C°•ig 402 C°•ig 405 C° felett 1 tf % 0 tf%