152817. lajstromszámú szabadalom • Eljárás az egyenesláncú szénhidrogének teljes vagy részleges eltávolítására szénhidrogénelegyekből
/ 152817 9 kalmazása szintén a jelen találmány körébe tartozik. , A mikroorganizmusok termelésére és a termék kinyerésére alkalmas előnyös módszereketa 914 567 sz. brit szabadalmi leírás, továbbá az 1 316 506, 1 320 058, 1 334 466, 1 340 225, 1 361 910, 1 384 251, 1 384 252, 1 384 253, 1 385 717, 1 385 718, 1385 719, 1385 720, 1385 721 és 1385 722 sz. francia szabadalmi leírások ismertetik. A találmány szerinti eljárás gyakorlati kiviteli módjait közelebbről az alábbi példák szemléltetik; megjegyzendő azonban, hogy a találmány köre nincsen ezekre a példákra korlátozva. A példákban szereplő sejtsűrűségek a kultúra 1 literjére számított élesztő^szárazsúlyban vannak megadva. 1. példa. Egy rozsdamentes acélból készült, 60 liter hasznos térfogatú fermentorba az alábbi összetételű vizes ásványi tápközeg 40 literjét vittük be. A hőmérsékletnek a fermentorban 30 C° állandó szinten tartása esetében vizet keringtettünk a fermentor két koncentrikus henger által képzett köpenyének belsejében levő gyűrűalakú térben; maga a fermentor a belső hengeralakú edény volt. A vizes tápközeg összetétele az alábbi volt: diammóniumfoszfát 2 g káliumklorid 1,15 g magnéziumszulfát—7H2 0 0,65 g cinkszulfát 0,17 ^ mangánszulfát—H2 0 0,045 g vas(II)szulfát—7H2 0 0,068 g élesztőkivonat 0*025 g vízvezetéki víz 200 g desztillált vízzel feltöltve 1000 ml-re A Candida lipoytica vegyes C9—C 16 n-paraffin-szénhidrogénen szaporított 24 órás kultúrájának 20 literjét adtuk azután inokulumként a fermentor tartalmához oly módon, hogy a sejtsűrűség liter enkint kb. lg szárazanyagnak felelt meg. 15 g/liter nehéz gázolajat adagoltunk be ezután" a fermentorba, ami 1,03 liter összes menynyiségnek felel meg; ez elegendő ahhoz, hogy a sejtsűrűséget 2 g/liter szintre emeljük. A hőmérsékletet 30—1 C° szinten tartottuk, a pH-értéket 4-re szabályoztuk, és oly mértékű szellőzést és keverést alkalmaztunk, hogy a közeg 1 literjére számított percenkénti betáplált oxigénmennyiség 3 millimólnak felelt meg. önműködő pH-szabályozóberendezés útján 10 n ammóniumhidroxidoldatot adagoltunk be. Amikor a betáplált ammónia mennyisége elérte a 20 ml-t, megkezdtük a gázolaj beadagolását, oly mennyiségi arányban, amely megfelelt a kultúra elméleti szükségletének, feltételezve, hogy az élesztőhozam 10 100 x termelt élesztő betáplált gázolaj 10% 0,876 120 C° felett +20 C° +18 C° 10 súly% 221 C° 228 C°-ig 363 C°-ig 402 C°-ig 405 C° felett 1 tf% 0 tf% és a sejtosztódási idő 3 óra. Ezt a hozzáadást 5 óránkint végeztük mindaddig, míg a hozzáadott gázolaj teljes mennyisége el nem érte a 250 g./ litert, vagyis összesen 17 litert,x 2 g/liter kezdeti sejtsűrűség mellett 25 óra elteltével (az exponenciális fejlődési szakasz vé-10 gén) 18 g/liter sejtsűrűséget értünk el. A felhasznált nehéz gázolaj jellemző adatai: sűrűség 15 C°/4 C° lobbanáspont (Afnor) 15 zavarosodási pont dermedéspont n-paraffinok Saybolt-desztilláció : kezdeti forráspont 20 5 % átmegy 50% átmegy 95% átmegy végső forráspont maradék 25 veszteség 25 óra elteltével a kultúra egy részét levezettük a fermentorból, és ebből a részből 300 ml anyagcsere útján fel nem használt gázolajat 30 nyertünk ki +50 C° hőmérsékleten történő centrifugálás útján. A maradékként kapott gázolaj az alábbi jellemző tulajdonságokat mutatta: 35 sűrűség 15 C°/4 C° lobbanáspont (Afnor) zavarosodási pont dermedéspont n-paraffínok 40 Saybolt-desztilláció: kezdeti forráspont 5 % átmegy 50% átmegy 95% átmegy 45 végső forráspont maradék veszteség 300 ml anyagcsere útján fel nem használt 50 gázolajat és"300 ml 20 súly% töménységű alkoholos káliumhidroxidöldatot bevittünk egy visz^szafolyató hűtővel felszerelt 1000 ml-es gömblombikba, és az .elegyet 2 óra hosszat forraltuk visszafolyató hűtő alatt. Az így kezelt gázola-55 jat dekantálással elkülönítettük. Zavarosodási pontja 0 C°-ról —16 C°-ra szállt le. /--2. példa. 60 Az 1. példában leírt eljárást egy folytonos fermentációval tenyésztett Candida lipolytioa kultúrából származó gázolajjal is elvégeztük. A folytonos fermentációt 5 literes fermentorban folytattuk le, amely 3 liter kultúrát tartal-85 mázott; ebbe 300 ml/óra sebességgel tápláltunk 0,8939 120 C° felett 0 C° —16 C° 1,8 súly%> 245 C° 296 C°-ig 365 C°-ig 402 C°-ig 405 C° felett 1 tfo/0 0 tf/0 5
