152802. lajstromszámú szabadalom • Eljárás egy eddig ismeretlen polipeptid előállítására

1528Ö2 13 arányú elegyében oldjuk, majd a trifluoreoetsav végső nyomainak eltávolítása céljából egy bázisos ioncserélő-oszlopon vezetjük át az oldatot. A kapott szüredéket vákuumlban bepároljuk. Ily módon 62 g CBO-His-Phe-(Tos)Arg- s -Try-Gly-(For)iLys^Pro-OH nyerhető. A kapott terméket 15 000 ml metanolban oldjuk és palládium-fcaitalizáitor jelenlétében, légköri nyomás alatt, a CBO-csoport teljes lehasításáig hidrogénezzük. Ezután a reakcióele- 10 gyet leszűrjük, a katalizátort 100 ml dimetilformamiddal utánamossuk, az egyesített szüredéket bepároljuk és a heptapeptidiet éter 'hozzáadásával lecsapjuk. Szárítás után 40 g H-His-, ' -Phe-(Tos)Arg-Try-Gly-(For)Lys-Pro-OH nyer- 15 hető, op. 220^-225°; [«]D

21

= —34° dimetilformaimidibian. A kapott terméket 300 ml dimetilf or mamidban oldjuk, majd 28,5 g CBO-Glu(OTB)-OCP hozzáadása után 3 napig hagyjuk 20°-on állni, 20 azután bepároljúk és 1000 ml étert adunk hozzá. Szűrés után a kapott csapadékot etilaicetáttal mossuk, dioxán és víz 4:1 arányú elegyében oldjuk, savas ioncserélő-oszlopon át leszűrjük és bepároljúk, A maradékot kevés dimetil- 25 formamidban oldjuk, és etilaoetáttal ismét kicsapjuk. Szűrés és nagy'vákuumiban történő szárítás után 39 g CBO-Glu(OTB)-KisHRhe-(Tos)Arg-']jry-jGly-(For}L:ys-Pro-OH nyerhető, op. 175—180°; [«]D21

=—31° dimetilformamidban. 30 A terméket 60 ml piridinben oldjuk és az oldathoz 30 g tri-/2,4,5-triik]órfenil-foszfi:tot adunk. Ez utóbbit az alábbi módon állítjuk elő. 88 g nátrium-,2,4,5-triklóirfenolátoit 500 ml benzolban szuszpendálunk és a szuszpenzióhoz 35 0° hőmérsékleten 1:2 ml foiszfortrikloridot adunk. 3 óra hosszat 80° hőmérsékleten tartjuk az elegyet, majd a natriumkloridot kiszűrjük és az oldatot bepároljuk. A maradékot etil- . acetátlból átkristályosítva 52 g tri-(2,4,5-triklór- 40 fenil)-foszfitot kapunk, amely 122°-on olvad. A fent említett elegyet 16 óra 'hosszat hagyjuk 20° (hőmérsékleten állni, majd étert adunk hozzá, leszűrjük, forró etilaoetáttal mossuk és 45 megszárítjuk. Ily módon 42 g OBO-Glu(OTB)-His-jPhe-(Tos)A1

ng-Tlry-Gly-(For)lLysnRriO"OCP nyerhető; [a

]o

21

= —2:8,1° dimetilfonmamidban. 19 g CBO-Glu(OTB)-His-Phe-(Tos)Arg-Try-Gly-(For)Lys-Rro-OCP és 20 g H-Val-Gly(For)- 50 Lys-ÍFo^Lys-CTosjArg-ÍTosJAirg-Pro-Val-íFor)Lys-Val-Tyr-J?ro-Val-NH2 40 mii dimetilformamid és 2 im! tri etilamin eleigyével készített oldatát 18 óira hosszat melegítjük 50° hőmérsékleten. Ezután 1000 ml forrásban levő •acetont 55 adunk hozzá, majd a levált terméket acetonnal gondosan mossuk és vákuumlban megszárítjuk. Az így kapott teiriméket dioxán és víz 4 :1 arányú elegyében oldjuk, az oldatát savas ioncserélő-oszlopon át szűrjük, majd szárazra párol- 60 juk be. A maradékot 'etilaoetáttal mossuk és vákuumban megszárítjuk. Ily módon 27 g CBO-Glu(ÖTB)-His-Bhe-(Tös)Airg-Try-Gly-(For)Lys-Pro-Val-Gly-(For)!LyS-(For)lLys-(Tos)Arg-(Tos)A:rg-Pro-Val-(For>Lys-Val-Tyr^Pro-Va^NiH2

H>> 14 nyerhető, op. 210—220°; [«]D

21

= —38° dimetilformamidban. 5 g fenti módon kapott védett henekozapeptidet 7,5 liter szárított ammóniában oldunk és az oldathoz élénk keverés köziben fóm-'nátriumdarabökat adunk az oldat megmaradó mélykék színeződéséig. Ezután 2 g amimoiniumkloridot adunk hozzá, az ammóniát elpárologtatjuk, a maradékot nagyvákuumban szárítjuk és 250 ml 0,2 n ecetsavoldatban oldjuk. A só eltávolítása után az oldatot Szárazra pároljuk be, a maradékot metanollal mossuk és vákuumban szárítjuk. Ily módon 4,4 g H-Glu-His-Phe-Arg-Try-Gly-(For)Lys-Pr o-Vál-Gly-(Far)'Lys (For) Lys-Arg-Aírg-Bro-Val-(Foir)ILys-Val-Tyr-Pro-'v'al-NH2 nyerhető. A termék 182°-on olvad bomlás közben. [«]o21 = —47° 95%-os 'ecetsavban. 14. példa: ... N-Tritil-L-szeril-L-tirozilnL-:szeril-L-inorleucil-L-glutamil-L-'hisztid;il-L-ifenilaniil-^L-arginil-L-triptofanil-gU'CÍl-epszilon-iN-fosrmi'1-lizil-L-jprolil-L-valil-g'licil-epszilon-iN-foCTnil-iL-'lizil-epszilon-íN^formil-fL-lizil-L-iarginil-iLHarginil-L-prolil-L-valil-epszilofn-N-foiimdl^L-lizil-tL-valil-L-tirozil-iL-prolil-L-valinamid; ~ (Tri-Ser-TywSerHNle-'GluHHis^RheHAíg-Tiry-Gly-(For)iLys-.Pro-Val-Gly-(Fo!r)ILys-(Far)!Lys-Arg-Arg-iPro-Val- (Far ),Lys-ValnTyr-Pr o-V1al-iNiH2) (vö. F. ábra) 174 g TVinSer^OH és 117 g H-Tyr-OMe 2 liter acetonitól, 1 liter kloroform és 50 ml dimetilforimamid elégyével készített oldatát —10° , hőmérsékletre hűtjük le, 124 g diciklohexilkarbodiimidet adunk hozzá és 5 óra hosszat keverjük az elegyet 20° hőmérsékleten. Ezután, szűrünk, 1,5 liter piridinnel utanaimosunk, az egyesített szüredéket szárazra pároljuk be és a maradékot forró etilacetátból kristályosítjuk. Ily módon 221 g Tri-Ser-Tyr-OMe nyerhető, op. 232°; [«]D21

= —34° dimetilformamidban. A kapott terméket 500 ml dimetiformamidban oldjuk és az oldathoz 100 ml hidrazint adunk. Az elegyet 24 óra hosszat 20° hőmérsékleten állni hagyjuk, majd 5 liter vízbe öntjük, centrifugálunk, az olajszerű maradékot 2 liter etilacetátban, oldjuk és az oldatot vízzel semlegesre mossuk. Vízmentes nátriumszuitfáton történő szárítás után az oldatot szárazra pároljuk be és a maradékot éterrel mossuk. Ily módon 182 g Tri-Ser-Tyr-JNH!NH2

nyerhető, amely 120°-on bomlás közben olvad; [«]D21

=—30® dimetilformamidban. 131 g CBO-Ser-OH és 95 g H-Nle-QMe-ihidroklorid 2 liter kloroform és 70 ml trietilamin elégyével készített oldatát —10° hőmérsékletre hűtjük le, .124 g diciklohexilHkarbodiimidet adunk hozzá, majd 5 óra hosszat keverjük az elegyet 20° hőmérsékleten. Ezután szűrünk, a szüredéket bepároljúk, a maradékot petroléterrel, majd vízzel mossuk és megszárítjuk. Etilaoetát és petroléter elegyéből történő átkossá-