152683. lajstromszámú szabadalom • Eljárás ergobazin előállítására
5 152683 6 désű rázógépen 23 C° hőmérsékleten inkubáltatjuk. Más kultúrákat hasonló módon, egy 170 liter tápközeget tartalmazó, rozsdamentes acélból készült fermentorban tenyésztünk. Ezeket percenként 70, később percenként 180 fordulattal keverve. A habzás leküzdésére szilikon-emulziót alkalmazunk. Ily módon számos egyforma micélium-részecskéből álló kultúrákat kapunk. E micélium-részecskék átmérője kb. 5 mm; az egyes részecskék egy pszeudo-parenohimás szövetből álló, kb. 1 mm átmérőjű gömbölyű tömör magot tartartalmaznak. Ez a mag csillagszerűen elrendezett,' kb. 2 mm hosszú, párhuzamosan elrendezett hyphákból álló nyúlványokat hordoz. A kb. 12 napos tenyésztési idő végén a mioélium sötétbarna színű, a szüredék pedig elérik vörösesbarna színeződést mutat, a pH-érték csupán lényegtelen mértékben változik. Az így kapott kultúra-szüreáéket pl. az alábbi módon dolgozhatjuk fel: A 20 liter térfogatú kultúra-szüredék egy részét kb. 1,2 kg szódával 9,75 pH-értékre állítjuk és 20—20 liter etilénkloriddal háromszor extraháljuk. A szerves fázist minden alkalommal 5 liter vízzel egyszer mossuk, imajd egyesítve vákuumban 4 liter össz-térfogatra bepároljuk. Ezt a szüredéket 1—1 liter 5%-os borkősavoldattal háromszor extraháljuk, a borkősavaö kivonatot szódával 9,0 pH-értékre állítjuk és 2—2 liter etilénkloriddal háromszor extraháljuk. A szerves oldószeres kivonatot kevés vízzel mossuk, majd nátriumszulfáton szárítjuk; az így kapott etilénkloridos oldat 8 g összalkaloidot tartalmaz. A kapott alkaioidelegyet papírkromatográfiás módszerrel elemeztük és a színfoltok azonossága alapján az egyes alkotórészek alábbi százalékarányát állapítottuk meg: 10 15 20 25 30 ergobazin 65% ergobazinin 13% lizergsavamid 9% izolizergsavamid 5% kanoki avin 4% elimoklavin 1% penniklavin 2% ismeretlen 1% Az ergobazint a kultúra-szüredék beszárított szerves oldószeres kivonatából kromatografálás, átkristályosítás, vagy pl. a szerves savakkal történő sőképző-képesség hasznosítása alapján különíthetjük el tiszta állapotban. Ily módon a kapott 8 g összalkaloidból 5,39 g ergobazinhidrogénmaleinátot nyerhetünk ki tiszta kristályos alakban. .Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás ergobazin előállítására, azzal jellemezve, hogy a Claviceps paspali Stevens et Hall NRRL 3081 és 3082 jelű új törzseinek valamelyikét alámerülő kultúrában egy szénforrásként egy polialkoholból, nitrogénforrásként egy szerves sav ammóniumsójából és szervetlen sókból álló tápközegben szaprofita módon tenyésztjük, és a képződött ergobazint a kultúra szüredékéböl szerves oldószerrel extraháljük és végül önmagában ismert módon elkülönítjük. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a gomba tenyésztésére annak konidiumait használjuk fel. A kiadásért felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó Igazgatója 6606090. Zrínyi (T) Nyomda, Budapest V., Balassi Bálint utca 21—23. I