152576. lajstromszámú szabadalom • Eljárás tetraciklin gazdaságos előállítására
152576 3 4 tési körülmények között több mint 6—7000 E/ml tetraciklin állítható elő. A kiindulási törzsnek megfelelően az új törzs egyáltalán nem termel klórtetraciklint, még kloridtartalmú táptalajon sem, tehát a kiindulási törzshöz hasonlóan nélkülözi a klórozási mechanizmust. A fermentáció során • ennek megfelelően a táptalaj kloridtartalmának bármilyen formában való csökkentése vagy a klórozás inhibitor útján való megakadályozása szükségtelen. A fermentációhoz alkalmazott új törzs az alábbiakkal j ellemezhető: nyítő 10,0 g, prolin 0,25 g, vitamin B1; B 8 , kalciumpantotenát 25—25 mg, dikáliumhidrofoszfát 0,25 g, ferroszulfát 0,01 g, agar 20,0 g, desztillált víz 1000 ml, pH: 7,2). Mérsékelt növekedés. A vegetatív micélium barna, igen gyengén termel oldódó barnás pigmentet. Légmicéliumot nem képez. Spóraképzés nincs. Zselatin: (összetétel: zselatin 200 g, csapvíz 1000 ml, pH: 7,4). A zselatint folyósítja. Barna növekedési gyűrű a zselatin felületén, amely sötétbarna oldódó pigmentet is termel. Glukóz-élesztőkivonat-húskivonat-pepton agar: (összetétel: glukóz 10,0 g, élesztőkivonat 10,0 g, húskivonat 4,0 g, pepton 4,0 g, nátriumklorid 2,5 g, desztillált víz 1000 ml). Intenzív növekedés. Vörösbarna színű vegetatív micélium, amely hasonló színű oldódó pigmentet termel. Gyenge légmicélium képzés, közepes erősségű spórázás. A spóraréteg a tenyésztés folyamán enyhén megszürkül. Burgonyakivonat-pepton-glicerin agar: (összetétel: burgonyakivonat 100 g burgonyából, pepton 2,0 g, glicerin 5,0 g magnéziumszulfát 0,5 g, dikáliumhidroszulfát 0,5 g, nátriumklorid 0,5 g, ferroszulfát 0,01 g, agar 20,0 g, csapvíz 1000 ml). Intenzív növekedés. A vegetatív micélium sötétbarna színű, majdnem fekete és intenzíven termel sötétbarna színű oldódó pigmentet. Légmicélium nincs. Spóraképződés nincs. Kukoricalekváros agar: (összetétel: szacharóz 10,0 g, kukoricalekvár (50%-os) 6,5 g, káliumdihidrofoszfát 4,0 g, ammóniumfoszfát 2,0 g, magnéziumszulfát 5,0 g, pH: 6,6). Intenzív növekedés. A vegetatív micélium barna színű és hasonló színű oldódó pigmentet termel. A légmicélium fehér. Erős spóraképződés. A spóra rétege fiatalon rózsaszínes-világos szürke, később galambszürke lesz. Celluláz aktivitás nem mérhető. Lipáz aktivitás igen erős. A fentiekben jellemzett A—802.934 törzs, vagy ismert módon előállított utódainak fermentációjához használt táptalaj szénforrásként szacharózt, keményítőt, kukoricalisztet, mogyorólisztet, zsírokat vagy olajokat, például pálmaolajat, szerves nitrogén forrásként pedig kukoricalekvárt, extrahált, napraforgódarát, mogyorólisztet, élesztőkivonatot, kukoricalisztet tartalmaz. Fentieken kívül ammóniumsókat, előnyösen szulfátot, kloridot, vagy nitrátot, valamint káliumsókat, kálciumsókat, magnéziumsókat, mangánsókat, előnyösen káliumdihidrogénfoszfátot, magnéziumszulfátot, kálciumkarbonátot és mangánszulfátot is adunk a táptalajhoz. A táptalaj pH-ja 6,3—7,0, előnyösen 6,5, beoltás előtt. A fermentációt 25—35 C°-on, előnyösen 28 C°-on végezzük, de eljárhatunk oly módon is, hogy kezdetben 27—28 C°-on fermentálunk, majd a fermentáció végén 30—32 C°-ra emeljük a hőmérsékletet. A fermentáció időtartama 70—90 óra, általában 80 óra. A találmányunk értelmében alkalmazott törzs Morfológia: A sporophor monopodiálisan elágazó, hullámos, végén görbülő. A spórák ^ gömbölyűek vagy enyhén oválisak. Szacharóz-nitrát agar: (összetétel: szacharóz 30,0 g, nátriumnitrát 2,0 g dikáliumhidrofoszfát 1,0 g, magnéziumszulfát 7.HaO 0,5 g, káliumklorid 0,5 g, ferroszulfát 0,01 g, agar 20,0 g, 2C desztillált víz 1000 ml, pH: 7,0—7,3). Gyenge növekedés. Csak vegetatív micéliumot fejleszt, amely gyengén barnás-drappos színű. A légmicélium hiányzik, spórát nem képez, Szacharóz-ammónium agar: (összetétel: mint a 25 szacharóz-nitrát agar, de a nátriumnitrát helyett ammóniumkloridot tartalmaz). Közepes növekedési intenzitás. A vegetatív micélium világos barna színű, oldódó pigmentet nem termel. Hosszú tenyésztés után gyengén fej- 30 leszt légmicéliumot és gyengén spórázik. Glukóz-aszparagin agar: (összetétel: glukóz 10,0 g, aszparagin 0,5 g, dikáliumhidrofoszfát 0,5 g, agar 20,0 g, desztillált víz 1000 ml pH: 6,8). A növekedés megegyezik a szacharóz-nitrát 35 agar alatt leírtakkal. Glicerin-aszparagin agar: (összetétel: glicerin 10,0 g, aszparagin 1,0 g, dikáliumhidrofoszfát 1,0 agar 20,0 g, desztillált víz 1000 ml, pH: 7,0 NaOH-val). A növekedés megegyezik a 40 szacharóz-ammónium agar alatt leírtakkal. Glicerin-kalcium-maleát agar: (összetétel: glicerin 10,0 g, kalcium-maleát 10,0 g, ammóniumklorid 0,5 g, dikáliumhidrofoszfát 0,5 g, agar 20,0 g, desztillált víz 1000 ml). Nem 45 növekszik. Glukózrpepton agar: (összetétel: glukóz 40,0 g, pepton 10,0 g, agar 20,0 g, desztillált víz 1000 ml, pH: 5,6). Jó növekedés. Barna vegetatív micélium, gyengén barna oldódó pigmentet is 50 termel. Gyenge légmicélium képződés, spórázás nincs. Táp-agar: (összetétel: pepton 5,0 g, húskivonat 5,0 g, nátriumklorid 5,0 g, agar 20,0 g desztillált víz 1000 ml, pH: 7,2—7,4). Gyenge nö- 55 vekedés, A vegetatív micélium világos barna, inkább sárgás, légmicélium nincs, spóraképzés nincs. Keményítő agar: (összetétel: oldható keményítő: 10,0 g nátríumnitrát 1,0 g, dikáliumhidro- 60 foszfát 0,3 g, nátriumklorid 0,5 g, magnéziumkarbonát 1,0 g, agar 20,0 g, desztillált víz 1000 ml). Növekedés nincs. Glicerin-keményítő-glutamát agar: (összetétel: glicerin 10,0 g, nátriuim-giutamát 1,0 g, kémé- C5 10 15 2C 25 30 35 40 45 50 55 60 2
