152551. lajstromszámú szabadalom • Eljárás egy új polipeptid és e polipeptidet tartalmazó kombinált gyógyszerkészítmények előállítására
152551 10 15 Előállítás: -glicinamidot tartalmazza, 5 liter 0,01 n ecet- Összetétel: sav oldatban oldjuk és 6,5—8,0 pH-értéknél levegő vagy oxigén bevezetése útján 1 óra hosszat oxidáljuk 0° és 40° közötti hőmérsékleten. Ezután az oldatot 4,0—5,0 pH-értékre állítjuk, 50 g nátriumkloridot vagy 0,64 g metánszulfonsavat vagy 0,76 g triiluorecetsavat adunk hozzá, majd szárazra pároljuk be, amikoris jól eltartható száraz port kapunk maradékként. Ezt a terméket tárolhatjuk; felhasználáskor történő feloldása esetén tiszta oldatot kapunk. Eljárhatunk azonban oly módon is, hogy a fenti oldatot közvetlenül felhasználjuk, esetleg vízzel vagy sóoldattal való hígítás után A szervetlen sók eltávolítása céljából a fentiemlített, trifluorecetsav hozzáadása után kapott port ellenáramú megosztásnak vetjük alá 120 :160 :1 arányú butanol/víz/trifluorecetsav rendszerben. 200 átviteli fokozat után a termék a 47—66. csövekben gyűlik össze, maximummal 20 az 56. csőnél (K = 0,39). Bepárlás után jó hozammal kapjuk a hatásos polipeptidet, higroszkópos trifluor acetát ja alakjában, amely kromatográfiai és elektroforézises vizsgálat során egyaránt egységes anyagnak mutatkozik. A papírelektroforézisben pH = 5,8 esetén az anyag migrációja 40 V/cm mellett: 60 perc alatt 49 mm (az összehasonlításul alkalmazott hisztidin 65 mm-t vándorol). 1,9 pH-érték és 40 V/cm esetén a migráció a papír-elektroforézis során: 60 perc alatt 68 mm (az összehasonlításul alkalmazott triptofán 66 mm-t vándorol). Az izoamilalkohol/piridin/víz 35 : 35 : 30 rendszerben végzett papírkromatográfia során az anyag R/értéke 0,25. A 6 n sósavval 110° hőmérsékleten 35 16 óra hosszat folytatott teljes hidrolízis ekvimolekuláris mennyiségekben adja a következő aminosavakat: tisztin, glutaminsav, aszparaginsav, prolin, ornitin, glicin, fenilalanin és izoleucin. Az anyag biológiai hatásossága: a pat- 40 kány vérnyomására 120 NE/mg; a patkány diurézisének gátlására 0,6; patkány-uterusra kb. 1 NE/mg. Phe2 -Orn 8 -oxitotin 0,0005 g 2-dietilamino-2',6'-aceto-xilidid-hidroklorid (lidocain-klorid) 5,0 g triklórizobutilalkohol 5,0 g etilalkohol, 94 súly%-os 5,0 g jégecet 1,0 g nátriumacetát • 3 H2 0 2,0 g deszt. vízzel feltöltve 1000 m ml-re. 25 30 A jégecetet és a nátriumacetátot 900 ml deszt. vízben oldjuk, erélyes keverés közben hozzáadjuk a triklórizobutilalkohol ugyanolyan súlyú 94 súly%-os etilalkohollal készített oldatát, a teljes oldódásig keverjük, majd hozzáadjuk a lidocain-kloridot és ennek oldódása után a Phe2 -Orn 8 -oxitocint, vízzel 1000 ml-re töltjük fel az oldatot, bakteriológiai szűrőn szűrjük és ampullákba töltjük. 5. példa: Oldat készítése vezetéses érzéstelenítés céljaira, összetétel: Phe2 -Orn 8 -oxitocin p-aminobenzoil-dimetilamino-etanol-HCl (novocain--hidroklorid) vízmentes dinátriumfoszfát citromsav • 1 H2 0 deszt. vízzel feltöltve Előállítás: 0,001 g 10,0 g 2,0 g 3,0 g 1000 ml-re. 2. példa: Az 1. példában leírthoz hasonló módon járunk el, az utolsó lépésben azonban az oxidációt 7,5 ml vizes n-hidrogénperoxid oldattal végezzük 4,0—9,0 pH-érték mellett, 0° és 40° közötti hőmérsékleten (levegő vagy oxigén bevezetésével történő oxidáció helyett). 3. példa: Az 1. példában leírt módon járunk el, az utolsó lépésben azonban az oxidációt 0° és 35° közötti hőmérsékleten, 6,7 ml vizes n-káliumhexacianoferrát(III)-oldat hozzáadásával végezzük, 5,5—7,5 pH-érték mellett. 45 50 A citromsavat, dinátriumfoszfátot és a novo^ cainhidrokioridot 900 ml deszt, vízben keverés közben oldjuk, hozzáadjuk a Phe2 -Orn 8 -oxitocint, 1000 ml-re feltöltjük, membrán-^szűrőn leszűrjük, ampullákba töltjük és 120°-ra való felhevítéssel 6 percig sterilizáljuk. 6. példa: Oldat készítése felületi érzéstelenítés céljaira. Összetétel: Phei2 -Orn 8 -oxitocin p^aminobenzoesav-béta-0,002 g eo -dietilamino-béta-izobutil--etilészter-metánszulfonát (leucinocain-metánszulf.) 100 g jégecet .' 20 g nátriumacetát • 3 H2 0 20 g propü-p-oxibenzoát 1,0 g metil-p-oxibenzoát 2,0 g deszt. vízzel feltöltve 1000 ml-re, 4. példa: Oldat előállítása infiltrációs érzéstelenítés céljaira. Előállítás: A propil-p-oxibenzoátot, metil-p-oxibenzoátot, jégecetet és nátriumacetátot 800 ml deszt, víz-4
