152430. lajstromszámú szabadalom • Eljárás Penicillium chrysogenum törzsek penicillin termelő aktivitásának megőrzésére, valamint a penicillin hozam fokozására
152430 8 0 volt. A mikroorganizmus növekedési sebessége, a tenyészlé szárazanyagtartalmát figyelembe véve az alábbi volt: kontroll 24 órás korban 0,14%; fenileoetsavas nátriumsóval előkeielt tenyészet 24 órás korban: 0,26%. A 140. órában vett mintában a G^penicillin koncentrációja az alábbiak szerint alakult '(15 párhuzamos kísérlet átlaga): kontroll: 4250 NE/ml; fenilecetsav Na sóval előkezelt: 4824 NE/ml. 4. példa: Peniciliium chrysogenum DAD—1 törzs spóráit az 1. példában leírt komponensekből álló szilárd táptalajon szélesztettük. A 25 C°-on, 10 napon át történő inkubáció során kinövekedett egyik zöld színű telepet izoláltuk, a telep spóráit desztillált, sterilizált, 0,02% TWEEN 80-at tartalmazó vízzel mostuk le. A spóraszuszpenziót az alábbi táptalajféleségekre oltottuk le: 1—1 ml spóraszuszpenziót 3,0% fenoxiécetsavat tartalmazó, valamint fenoxiécetsavat nem tartalmazó Blake-üvegben sterilizált szilárd táptalajra szélesztettük, mely táptalaj összetételét az 1. példában leírtuk. 6—6 ml spóraszuszpenziót 500 ml-es Erlenmeyerrlombikban sterilizált, 30 g hántolt rizs •tartalra<ű' táptalajokra, melyek közül az egyik fajta ,,0,30 g" fénoxiecetsav nátriumsóját is tartalmazta. A: tenyészetekkel az alábbi vizsgálatókat végeztük el: ' Disszociációs vizsgálat. 25 C°-on, 10 napon át szilárd táptalajon nevelt, egysejt tenyészetből nyert spórák az alábbi megoszlást mutatták: fehér zöld színű telepek száma kontroll (fenoxiécetsavat nem •kapott) 20 74 Fenoxiécetsavat kapott 2 96 Termelőképesség vizsgálat. A rizs szemeken fénoxiecetsav jelenlétében, vagy anélkül az 1. példában leírt módon nevelt oltóspórákból•:' az Ír. példában- részletezettek szerint - rázott' előtenyészeteket, majd ezekkel oltva, kísérleti fermentációkat indítottunk. A kísérlet'során az aktuális fénoxiecetsav koncentrációt 0 órás kortól 1600 ug/ml koncentráció értéken tartottuk. A 24. órás korban vett mintában elemezve a tenyészetek szárazanyagtartalima az alábbiak 5 szerint alakult: kontroll (Fenoxiécetsavat csupán a kísérleti fermentációban kapott) 0,093% 10 fenoxiecetsavval már előzőleg kezelt 0,27 % A 140. órában vett mintában elemezve a V-penicillin koncentráció az alábbiak szerint alakult: 15 20 25 30 35 40 45 50 kontroll 7065 'NE/ml fenoxiecetsavval előzőleg kezelt tenyészet 8662 NE/ml Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás penicillin termelőképességgel rendelkező Peniciliium ohrysogenum törzsek aktivitásának megőrzésére, valamint a penicillin hozam fokozására azzal a jellemezve, hogy Peniciliium chrysogenum törzsek egysejt tenyészetéből, vagy kevert kultúrájából származó spórák felhasználásával, a különben toxikus hatású fenoxiecetsawal vagy fenilecetsawal szem'ben olyan érzékenységű oltóspóráfcat állítunk elő, melyek alámerített, levegőztetett kultúrában 1600 ug/ml fenoxiécetsavat vagy 1000 ug/ml fenilecetsavat károsodás nélkül elviselnek. 2. Az 1. igénypontban meghatározott eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a Peniciliium chrysogenum oltóspóra készítésének valamennyi generatív (spóraképző) fázisában a fenoxiecetsawal szemben érzékeny telepek kinövekedését, 1—3% koncentrációjú fenoxiecetsawal a szaporító tenyészközegbe való adagolásával meggátoljuk. 3. Az 1. igénypontban meghatározott eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a Peniciliium chrysogenum oltóspóra készítésének valamennyi generatív '(spóraképző) fázisában a fenilecetsawal szemben ; érzékeny telepek kinövekedését 0,1—0,3% koncentrációjú fenilecetsavnak a szaporító tenyészközegbe való adagolásával meggátoljuk. ,. - .. • A kiadásért felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója 658959. Zrínyi (T) Nyomda, Budapest V., Balassi Bálint utca 21—23. 4