151519. lajstromszámú szabadalom • Eljárás tetraciklin típusú antibiotikumok vizes oldatból való kinyerésére

1515ÍÖ pH-érték 7,5—8 értékre való beállításával az antibiotikumból és I képletű vegyületből keletkezett vegyületet kicsapni. A kivált csapadékot elkülönítjük és kívánt esetben megszárítjuk. A csapadék elbontását azonban szárítás nélkül is el lehet végezni. A szárítást vacuum szárítószekrényben 40—65 C°-on végezzük el. Az elkülönített csapadékból a szabad antibiotikumot előnyösen a szárított és porított csapadékból kiindulva szabadítjuk fel. Az elbontás első lépéseként a vegyületet előnyösen absz. metanollal 40—60 C°-on extraháljuk az anyagmennyiségtől függően 72—2 órán át. Előnyös mintegy 8—13-szoros mennyiségű absz. metanol alkalmazása. Ezután a szilárd részeket eltávolítjuk (szűrés, centrifugázás), majd ismert módon sósavas metanol, ül. piridin adagolásával kicsapjuk az OTC, ill. TC HCl-t. Hasonlóképpen megfelelő változtatásokkal az OTC más sóit, ill. dihidrátját is előállíthatjuk. TC kinyerése esetén a TC-oldatból, koncentrátumból, vagy szűrt fermentléből indulhatunk ki, előnyösen az oldat pH = 2,5 értékre való beállítás után. Hasonlóképpen járunk el, mint OTC esetében; a kicsapást pH = 8 értékben végezzük el. A csapadék elkülönítése után a szárított vagy nedves csapadékot vízben szuszpendáljuk és a szuszpenzió pH értékét savval mintegy 1,5—2,5-re állítjuk. Ezután a kalcium ionokat eltávolítjuk (pl. kalciumoxalát alakjában), majd kálium ferrocianid hozzáadásával csapjuk le a I képletű vegyületet. A csapadék eltávolítása után a szűrletből szokott módszerekkel nyerhetjük a TC-t hidroklorid, vagy más só alakjában. Tekintettel arra, hogy a I képletű vegyületeket tartalmazó termékek nem toxikusak, a szűrt fermentléből lecsapással nyert termék szárítása és kívánt esetben adalékanyagokkal, pl. kalcium karbonáttal történő elkeverése után állatgyógyászati készítményként közvetlenül felhasználható, így előnyösen állítható elő állatgyógyászati készítmény OTC vagy TC és dodecilacetát-piridiniumkloridból. Eljárásunk további részletei a példákban találhatók. Példák: 1. 10,000 ml Streptomyces rhimosus-al való fermentálással nyert fermentlé pH értékét oxálsavval pH = 2-re állítjuk és Seitz papíron a mycéliumot kiszűrjük. A szűrt fermetlé pH értékét tömény ammónium hidroxid oldattal pH = 5-re állítjuk. 34,5 dodecilacetát-piridiumkloridból 10%-os vizes oldatot készítünk és azt állandó keverés közben a rendszerbe adagoljuk. A reakcióelegyet 30 percig intenzíven keverjük, majd ammónium-hidroxid oldattal a pH érté^ ket 7,7-re állítjuk. A kivált amorf csapadékot Seitz papíron szűrjük és 35 C°-on vákuum szárítószekrényben megszárítjuk, majd elporítjuk. Az így nyert vegyület állatgyógyászati célokra (per os) felhasználható. A fent nyert 78,5 g terméket tízszer~s menynyíségű abs, metanollal extraháljuk 50 C°-os 30 percig, majd szűrjük. A metanolos oldatot 1/10 térfogatára bepároljuk, majd 5 g pirídint és végül 50 ml 30% sósavat tartalmazó meta-5 nolt adagolunk a reakcióelegyebe. A termék 54 g OTC.HCl, amely további átcsapással tisztítható. A kitermelés mintegy 10%-kal magasabb mint a cetilpiridinium-bromiddal történő kicsapás alkalmazásakor. 10 2. 10,000 ml Streptomyces aureofaciens-al való fermentálással nyert fermentlé pH értékét oxálsavval 2-re állítjuk. A fermentléről a mycéliumot Seitz papíron leszűrjük, majd a szűrt fermentlé pH értékét tömény ammónium hid-15 roxid oldattal pH=3-ra állítjuk be. 40 g delecilacetát-piridinium-klorid 10%-os vizes, oldatát adagoljuk a rendszerbe, állandó keverés közben, majd a reakcióelegy pH-értékét tömény ammoníum-hidroxiddal 7,5-re állítjuk be. A ki-20 vált amorf csapadékot Seitz papíron szűrjük, majd a nyert csapadék térfogatára számított kétszeres mennyiségű vízben szuszpendáljuk. A szuszpenzió pH értékét tömény sósavval pH = 2-re állítjuk. Ezután a rendszerbe annyi 25 tömény oxál-savat adagolunk, hogy a jelenlevő szabad kalcium ionokat kalciumoxalát formájában teljes mértékig lecsapjuk. Ezután 5 g kálium-ferrocianid 10%-os vizes oldatát adagoljuk a rendszerbe. A képződött csapadékot 30 szűrjük, és pH = 2-re állított sósavas vízzel mossuk. A csapadék 44 g dodecilacetát-piridiniumklorid. A szüredékhez 15% nátriumkloridot és a szüredékre számított azonos térfogatú vízmentes 35 normál butanolt adunk, majd a rendszert 30 percig intenzíven keverjük. A vizes fázist elválasztása után szenezzük, szűrjük és több részletben ismételten extraháljuk háromszoros mennyiségű n/100 HCl-val. Ismételt szenezés 40 után 20%-os nátrium-hidroxid oldattal vagy megfelelő pufferral a pH-értéket 4,5-re állítjuk. A termék 42,5 g tetraciklin, HCl, amely a gyógyszerkönyvi követelményeknek megfelel. 3. 2 liter Streptomyces aureofaciens fermen-45 tálasával nyert fermentlé pH-értékét oxálsavval 2-re állítjuk és a mycéliumot kiszűrjük. A szűrt fermentlé pH-értékét ammóniumhidroxid oldattal 3-ra állítjuk és 40 g dodecilacetát-piridimumklorid 10%-os vizes oldatát 50 adagoljuk a rendszerbe állandó keverés mellett, amíg a pH-érték 7,5-re emelkedik. A képződött nyers amorf csapadékot Seitz papíron kiszűrjük és azonos térfogatú normál butanolban vesszük fel. Szűrés után a butanolos oldatokat 55 10% oxálsavat tartalmazó 200 ml n butanolba öntjük. Az oldat pH-értéke kb. 2-re áll be és csapadék válik ki, amelyet 10 perc után szűrünk. A szüredékből kívánt esetben extrakciós tisztítás után pH 4,7-re 5,2-re való lúgosítással 60 (10%-os nátriumhidroxid oldattal) kristályos TC hidrátot csapunk ki, melyet kb. egy óra állás után szűrünk, átmosunk és 55 C°-on vákuum szárítóban szárítunk. A termék a gyógyszerkönyvi követelményeknek megfelel. 65 Kitermelés: 70—75% a fermentiere számítva. 2