151374. lajstromszámú szabadalom • Eljárás delta1-dehidro-szteroidok előállítására
151374 8 30 óra: 22.2 mg/100 ml tenyészet, 48 óra: 21,7 mg/100 ml tenyészet-A Reichstein 8-vegyüiot helyett a Reichstem S-vegyület acetátját adagolva, a ,1!-dohidro Reichstem S-vegyülot éviékek a következőképpen alakultak: 24 óra: 10.8 mg/100 mi i m.'-./ci 36 óra: 14.8 mg/100 ml te i>i v i 48 óra: 18.2 mg/100 ml * i,\(",i A 30 és 48 órás tenyészel.ékben Reichstein S-acetát már nem volt kimutatható. 5. példa: Az 1. példában leírt módon tenyésztettük a mikroorganizmust, de 5A5—G jelű táptalaj helyett 5 liter PA jelű táptalajt alkalmaztunk. 20 16 órás tenyésztés után 1 g Reichstein-féle S-vegyületet adagoltunk a tenyészethez 100 ml metilalkoholban feloldva. A keletkezett /1l-dehidro-Reichstein S-vegyület mennyiségét, a tioszemikarbazonos módszer segítségével állapi- 25 tottuk meg. Az eredmények a következők voltak: 0 óra 85 mg /P-dehidro Reichstein-S/5 liter fermentátum, 30 3 óra 380 mg /P-dehidro Reichstein-S/5 liter fermentátum, 6 óra 465 mg /l'-dehidro Reichstein-S/5 liter fermentátum, 9 óra 735 mg /P-dehidro Reichstein-S/5 liter 35 fermentátum. A 9. órában állítottuk le az átalakítást és a fermentátumot előszőj- 1 liter, majd 2X800 ml diklóretánnal extraháltuk. Az extraklumot csökkentett nyomáson bepároltuk, a bepárlási maradék súlya 4,22 g volt. A bepárlási maradékot hexánnal kioldottuk, így 850 mg, hexánban nem oldódó' kristályos termékhez jutottunk. Ezt aeetonbol átkristályosítva 490 mg z^-dehidro-Reichstein S-vegyületet nyer-D tünk (o. p. 234—242, [a] 2íP = +74 (c = 1, acetonban). Az anyag papírkromatogramban autentikus A '-dehi dro-Re ichstein S-vegyülettel együtt futott, idegen szteroid nem volt kimutatható. 6. példa: Az 1. példában leírt módon tenyésztettük a mikroorganizmust, de SA5—G jelű táptalaj helyett 5 liter PA jelű táptalajt alkalmaztunk. 16 órás tenyésztés után 1 g metilteszfoszteront adagoltunk a tenyészethez 100 ml acetonban feloldva. A. fermentáció során keletkezett Al -dehidronietiltesztoszteron mennyiségét a tioszemikarbazonos módszer segítségével állapítot-5 tuk meg. Az eredmények a következők voltak: 0 éra 65 mg /l'-deliidi'ometillesztoszferon/a liier,. 6 óra 445 mg /T'-dehidrometiitesztoszteron/r) 10 liter, 12 óra 540 mg /j'-dchklrometiHeszioszteron/S liier, 18 óra 720 mg /l'-dehidrooieíiltesztoszteron/ö liter, 15 24 óra 830 mg -!l~ckludromeUltesztoszLeroo/T) liter, 28 óra 650 mg í'-dehidrometillesztoszteron/S liter, A 28. órában a Cermantlevet 2X1/6 lérfogatnyi széntetrakloriddal extraháltuk. Az egyesített extraklumot csökkentett nyomáson bepároluk. A bepárlási maradék súlya 2,7 g volt és éter hozzáadása után ebből kikristályosodott az anyag. A kapott kristályos nyersterméket kiszűrtük és széntetrakloridból átkristáiyosítottuk. 430 mg /^-dehídrometiltesztoszferont nyertünk, o. p. 161—164 C°, D [a] 2() c— 0 (c — 2, kloroi'ormban). Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás /l'-dehidro-szteroidok előállítására mikrobiológiai átalakítással, melyre jellemző, hogy az átalakítást Alealigenes íaecalis K9—2 jelű mikroorganizmussal végezzük és a keletkezett /I1 -dehidro-szteroidot önmagukban ismert módszerekkel elkülönítjük. 40 2. Az 1. igénypont alatti eljárás kiviteli módja, melyre jellemző, hogy a mikrobiológiai átalakítási peptont hűskivonatot és sörélesztőkivonatot tartalmazó táptalajon végezzük. 3. Az 1. igénypont alatti eljárás kiviteli mód-45 ja, melyre jellemző, hogy a mikrobiológiai átalakítást peptont és aszparagint tartalmazó táptalaj on végezzük. 4. Az 1—3. igénypontok bármelyike alatti eljárás kiviteli módja, melyre jellemző, hogy 50 az átalakítást előnyösen 28 C° körüli hőmérsékleten végezzük. 5. Az 1—4. igénypontok bármelyike alatti eljárás kiviteli módja, melyre jellemző, hogy átalakítandó szubsztrátumként 17-metilteszto-55 szteront alkalmazunk. 6. Az 1—4. igénypontok bármelyike alatti eljárás kiviteli módja, melyre jellemző, hogy átalakítandó szubsztrátumként Reichstein-féle S-vegyületet alkalmazunk. Figyelembe vett nyomtatvány: Chem. Ab«. 1920—1960. A kiadásért í'elel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója, 642778, Zrínyi (T) Nyomda, Budapest v., Balassi Bálint utca 21—23.
