151197. lajstromszámú szabadalom • Eljárás pirimicin tisztítására

s rűen víztartalmú alkoholos oldatát 50—80 C° hőmérsékleten, valamely közömbös nagyfelületű lazítóanyaggal kevert aktívszenet tartalmazó oszlopon vezetjük keresztül. Ilyen körülmények között ez az adszorbenskeverék teljesen és szelektíven megköti a primicint szenynyező pigmenseket, míg a hatóanyag számottevő veszteség nélkül az oldatban marad és az oszlopról lefolyó oldatból tiszta állapotban nyerhető ki. Oldószerként ehhez az eljáráshoz vízzel teljesen vagy korlátolt mértékben elegyedő alkoholok vízzel készített elegyei, pl. 80%-os vizes metanol, vízzel telített n-butanol, n-butanollal telített víz stb. használhatók. Az aktívszén lazítőszereként bármely nagyfelületű, a jelenlevő anyagokkal szemben kémiailag közömbös anyag, mint pl. az ismert cellulóztartalmú szűrési segédanyagok (cellulózpor, „Hyflo Supercel" és hasonlók), továbbá laza por alakú szervetlen anyagok, mint precipitált kalciumkarbonát, talkum stb. használhatók. A találmány szerinti eljárás kivitele célszerűen oly módon történik, hogy az aktívszén és a lazítószer keverékét megfelelő oldószerben (erre a célra előnyösen ugyanolyan alkohol-víz elegyet alkalmazunk, mint a tisztítandó primicin oldására) elkeverjük, alul üvegszűrővel elzárt oszlopba töltjük és leszívatjuk. Ily módon pl. 5, 10 vagy 20 cm vastag ülepített adszorbens-réteget hozunk létre az oszlopban, ezt oldószerrel átmossuk, majd adagolóedény (nívóedény) alkalmazásával folyamatosan az oszlopra visszük a tisztítandó primicin-oldatot. A folyamatos műveletet az adszorbens kimerüléséig, vagyis a megkötendő szennyezésekkel való telítődésig folytathatjuk. Az oszlop kapacitása az adszorbens minőségétől, az oldat koncentrációjától és szennyezettség! fokától függ; laboratóriumi méretekben egy 20 cm átmérőjű, 5—6 cm rétegvastagságú adszorbensoszlop 40— 50 liter oldat folyamatos kezelésére mutatkozott alkalmasnak. A találmány szerinti eljárás egyik lehetséges változata értelmében szakaszos művelet során oly módon is eljárhatunk, hogy az aktívszén és lazítószer keverékéből álló adszorbenst belekeverjük a megadott hőmérsékletű és pH-értékű oldatba, abban ülepítjük és azután szívószűrőn a fent már ismertetett módon leszívatjuk. Ez az eljárásmód pl. olyankor lehet előnyös, amikor a nyers primicinoldat fehérjéktől való mentesítésére ólomacetátot alkalmazunk és az ólom szulfát-alakban történő leválasztása után visszamaradt kollcidos ólomszulfátot is el kívánjuk távolítani. Az adszorbensről leszívatott oldatot azután kis térfogatra bepároljuk és a levált mikrokristályos primicint leszűrjük. A primicin a jelen találmány szerinti eljárással teljesen eltávolítható lipofil pigmensek mellett tartalmazhat hidrofil pigmens^szennyezéseket is. Ezek legnagyobb része már a törzsszabadalom szerinti tisztítási eljárás során a primicin vizes oldatokból történő kinyerése ill, 4 szerves oldószerekbe való átvitele alkalmával a vizes anyalúgban ül. vizes fázisban marad. Nagyobb mértékben való jelenlétük esetén célszerű lehet oly módon eljárni, hogy a víz-5 ben nem vagy csak korlátozottan elegyedő oldószerrel, pl. n-butanollal készített nyers primicinoldatot híg, pl. 1%-os vizes ammóniaoldattal ismételten, az alsó, vizes fázis váltogatásával mossuk, majd a hidrofil pigmensek-10 tol ily előzetesen megtisztított nyers primicint vetjük alá a fehérjék eltávolítása után a jelen találmány szerinti módon a l?.pofil pigmensek eltávolítását célzó műveleteknek. A fentebb leírt módon az összes pigmens-15 szennyezésektől mentesített és vákuumban történő bepárlás útján kinyert kristályos primicin idegen anyagként már csak fizikailag kötött oldószert (víz, alkoholok, éter stb.) tartalmazhat. Ilyen oldószereket a levegő-nedves 20 pimicin számottevő, saját súlyarányának kétszeresétől ötszöröséig terjedő mennyiségben képes felületi adszorpció útján megkötni. Ennek a fizikailag kötött oldószernek az eltávolítása végett célszerűen úgy járhatunk el, hogy a 25 szárazra leszívatott primicint vízmentes acetonban szuszpendáljuk és leszívatjuk, majd ezt a műveletet 2—3-szor megismételjük, végül pedig 1—15 mm Hg-oszlop nyomás alatt 50—80 C° hőmérsékleten állandó súlyig szárítjuk (ez 30 kb. 72—96 órát vesz igénybe). A találmány szerinti eljárás gyakorlati kiviteli módjait közelebbről az alábbi példák szemléltetik. 35 1. példa: 100 g fehérjétől mentesített nyers primicint (biológiai értékméré,ssel megállapított hatóanyagtartalma 89%) 10 liter 80%-os vizes me-40 tanolban oldunk és az oldatot 60 C° hőmérsékleten oly 12 cm belső átmérőjű oszlopon vezetjük át, amely 100 g frissen aktivált (150 C°-oií 3 óra hosszat szárított) aktívszén és 100 g „Hyflo Supercel" papírpor szűrőn ugyanezzel az 45 oldószerrel mosott és leszívatott keverékét tartalmazza -adszorbensként. Az oszlopról lefolyó oldat teljesen színtelen; 1/5 térfogatra bepárolva az oldószerelegyből a metanolt elűzzük, a visszamaradó vízből pedig a primicin 50 laza mikrokristályos alakban lerakódik. A levált terméket leszívatjuk, acetonnal elkeverjük, újból leszívatjuk és ezt a műveletet még kétszer megismételjük, majd a leszívatott terméket 1 mm Hg vákuum alatt 80 C° hőmér-55 sékleten 72 óra hosszat szárítjuk. 79,2 g tiszta primicint kapunk, amelynek biológiai értékméréssel meghatározott hatóanyagtartalma 100%, olvadáspontja 190—193 C°. 60 2. példa: ! 50 g fehérjétől mentesített nyers primicint (biológiai értékméréssel megállapított hatóanyagtartalma 91%) n-butanollal telített 15 65 liter vízben 80 C° hőmérsékleten keverés köz-2