151197. lajstromszámú szabadalom • Eljárás pirimicin tisztítására

MAGTAB NÉPKÖZTÁRSASÁG ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS SZOLGÁLATI TALÁLMÁNY Pótszabadalom a 146 332 sz. törzsszabadalomhoz Bejelentés napja: 1963. IV. 09. (MA—1241) Közzététel napja: 1963. IX. 23. Megjelent: 1965. V. 01. 151197 Szabadalmi osztály: 30 h 1—8 Nemzetközi osztály: A 61 k Decimái osztályozás: Feltalálók: Tulajdonos: Dr. Sfeilágyi Imre vegyész, tudományos munkatárs, Magyar Tudományos Akadémia Dr. Vályi-Nagy Tibor egyetemi tanár, az orvostudományok kandidátusa, Kísérleti Orvostudományi Dr. Uri József egyetemi docens, az orvostudományok kandidátusa Kutatóintézete, Budapest Eljárás primicin tisztítására A 146 332 számú törzsszabadalomban eljárást ismertettünk a primicin fermentációs levekből történő kinyerésére és tisztítására. Ennek értelmében a fermentációs termék (fermentációs lé és/vagy micélium) oldószeres kivonatából bepárlás és/vagy lecsapás útján kapott primicintartalmú nyers termékből a lipoidokat zsíroldószerekkel eltávolítottuk, majd az alkoholokban nem oldódó fehérjék mellől a primicint alkoholokkal kioldottuk, az oldatból az alkoholokban oldódó fehérjéket ólomsókkal kicsaptuk, azután a főbb kísérő szennyezésektől ily módon mentesített, de a hatóanyaghoz igen makacsul kötődő és a szokásos aktívszenes derítéssel el nem távolítható pigmens-szennyezéseket még tartalmazó primicin butanollal telített vizes oldatát vízzel nem elegyedő alkohol és észter (pl. butanol és butilacetát) elegyével forrón többször extraháltuk és így lényegileg tiszta primicint kaptunk. A törzsszabadalom szerinti eljárás fent említett utolsó szakasza, a primicinhez erősen kötődő pigmensek eltávolítása — főként az ipari méretű - kivitelezés szempontjából — nehézkesnek és körülményesnek bizonyult, A primicin butanolal telített vizes oldatának a szerves oldószereleggyel 90—95 C° hőmérsékleten történő többszöri extrakciója nemcsak oldódási veszteségekkel jár, hanem a forrón lefolytatásra kerülő hosszadalmas művelet so-10 15 20 25 30 rán az egyébként eléggé hőálló hatóanyag bomlást is szenvedhet, a termelési hányadot tehát több tényező is számottevő mértékben rontja. Ezeknek a pigmens-szennyezéseknek az ipari méretekben is egyszerűen, szelektíven és jó hatásfokkal történő eltávolítása különösen azóta képezett sürgősen megoldandó problémát, amióta sikerült a primicint termelő Streptomyces primicini gombatörzs nemesítésére folytatott további kutatómunkánk során a törzs olyan variánsát kitenyészteni, amely az eddig elért termelési szint sokszorosának megfelelő, 1100 mcg/ml-t meghaladó mennyiségű primicint képes üzemi fermentorban is termelni. A primicin ezáltal lehetővé tett gazdaságos nagyméretű ipari termelése céljaira a pigmensszennyezések eltávolításának eddig ismert, módszere sem technológiai, sem gazdaságossági szempontból nem volt kielégítő. A törzsszabadálom szerinti eljárás továbbfejlesztése során azt találtuk, hogy a fermentációs termék extrakciója útján kinyert, lipoidoktól, fehérjéktől, valamint szénhidrát-jellegű és egyéb oldható szennyezésektől a törzsszabadalomban leírt módon mentesített primicint kifogástalanul, jó hatásfokkal és igen csekély hatóanyag-veszteség mellett tisztíthatjuk meg a fenti műveletek során a hatóanyaghoz, kötődő lipofil pigmens-szennyezésektől, ha a pigmensekkel szennyezett primicin alkoholos, célsze-151197