151046. lajstromszámú szabadalom • Eljárás antibiotikus hatású ciklopenteno-polihidro-fenantrén származékok előállítására
151046 8 Bár a legtöbb jól ismert táptalaj felhasználható a fuzidsav előállítására, előnyösen olyan táptalajt használunk, mely nitrogénforrásként kukoricalekvárt, szójabab lisztet, kazeint vagy más tejterméket, valamint hús-és csontlisztet tartalmaz. A táptalajban levő felhasználható nitrogén mennyisége előnyösen 0,01% és 1,5% között van, legelőnyösebb, ha a táptalaj kb. '0,15%. A javasolt szénhidrát szaccharóz és glukóz lehet. Előnyös továbbá a szénhidrátok egy részét és az energiaforrást zsírokkal vagy zsírsavakkal helyettesíteni, mivel úgy tűnik, hogy előnyösen fokozzák a fuzidsav-termelést, ha a táptalaj kb. 0,1%—5,0%-át alkotják. A fenti célra a találmány szerinti eljárásban mind a zsírsavgliceridek mind az azokban levő szabad zsírsavak vagy az utóbbiak szintetikus észterei alkalmazhatók. Különösen 12—20 szénatomot tartalmazó szénláncú zsírsavak vagy azok származékai alkalmazhatók mint fuzidsav-termelést fokozok. A fuzidsavnak a táptalajból történő kinyerése számos eljárással történhet. Az első lépés előnyösen az anyag kinyerése oly módon, hogy a micéliumot a tápfolyadéktői elkülönítjük, pl. szűréssel. A következő lépésben, szilárd adszorbenssel — mint pl. aktívszénnel vagy ioncserélő gyantával — adszorpciót végzünk, majd az adszorbens! eluáljuk, miáltal töményebb és tisztább fuzidsav-oldatot nyerünk; vagy megfelelő pH-értéknél alkalmas oldószerrel — előnyösen vízzel nem elegyedő oldószerrel, mint pl. metil-izo-butil-ketonnal, amilacetáttal, butüaceíáttal vagy hasonlóval — kivonást végzünk, mely oldószerből a jobban tisztított terméket oly módon különítjük el, hogy a szerves oldószeres részt kis térfogatra töményítjük, és az antibiotikumot vagy hűtéssel vagy olyan vegyület hozzáadásával, mely az antibiotikus hatású anyag oldékonyságát csökkenti, kinyerjük. Ez utóbbi esetben benzol alkalmazása igen előnyös, mivel a benzol a fuzidsavval könynyen kristályosodó szolvátképzésre alkalmas. A fuzidsav a szerves oldószerből az oldószer betöményítése nélkül is elkülöníthető, mivel az anyag savas sajátosságai következtében a szerves fázist vizes alkalikus oldattal vagy valamely alkalikus vegyület vizes szuszpenzió jávai kivonjuk, miáltal a fuzidsav sóinak tömény vizes oldatait nyerjük. Az oldatok megsavanyításával a sav kicsapódik, vagy — amennyiben kívánatos — a fuzidsav sóját az alkalikus oldatból elkülöníthetjük. A fuzidsav tisztításával kapcsolatban annak bizonyos oldószerekkel való szolvátképző képessége igen jelentős. A találmány sajátos kiviteli módjában példaaí a nyers terméket oly módon tisztítjuk, hogy kis mennyiségű' forró metanolban oldjuk, amelyből annak metanolszolvátja hűtésre meglepően tiszta formában kikristályosodik, s ezért ez az eljárás különösen alkalmas gyógyászati minőségű fuzid-10 15 20 25 30 35 40 45 sav előállítására. A fent említett metanol-szolvát op.-ja: 179°—179,5°. Amennyiben a fuzidsav valamely sója kívánatos, az a sav egyszerű semlegesítésével is előállítható vagy oly módon, hogy a szolvátot a szóban forgó bázissal reagáltatjuk, megfelelő reakció közegben, amely a reakció lefolyását megkönnyíti és amelyből a képződött só kiválik, vagy — amennyiben szükséges — a kívánt só oldékonyságát csökkentő megfelelő anyag hozzáadásával kicsapható, vagy a só a reakcióelegy bepárolásával elkülöníthető. Eljárhatunk oly módon is, hogy a fuzidsav korábban előállított sóját a megfelelő bázissal reagáltatjuk, vagy a fuzidsav kívánt sóját úgy állítjuk elő, hogy a fent említett sav korábban előállított sóját és egy másik, a kívánt fémiont vagy bázist tartalmazó sót cserebomlásnak vetjük alá. A közelmúltban végzett kiterjedt klinikai vizsgálatok bizonyítják, hogy a fuzidsav és bizonyos sói megfelelnek a gyógyszerként elfogadott antibiotikumokkal szemben állított követelményeknek, és értékes gyógyszer a fertőzéses megbetegedések kezelésében, ahogy az pl. „The Lancet" (1962) I. köt., 928—937. oldalán le van írva. A találmány szerinti eljárás az alábbi példákkal szemléltethető, melyekből a kivitelezés részletei nyilvánvalóak. 1. példa: A fuzidsav előállítása 3 liter táptalajt, melynek összetétele g/l-ben kifejezve a következő: glicerin glukóz szójababliszt kukoricalekvár nátriumklorid primer káliumfoszfát FeS04 • H2 0 MgS04 • 7H2 0 CuS04 -5H 2 0 7,5 lOyO 3,0 2.5 4,0 0,6 0,005 0,5 0,004 és amelynek pH-értékét sterilezés előtt 6,8-ra 50 állítottuk be, l'20°-on, fermentorban másfél órán át sterilezünk, majd hűtjük, és a Cephalosporin! lamellaecola F. E. Smith—F. E. Smith törzs (melyet a Centralalbureau voor Schimmelcultures, Baarn, Hollandia állított 55 elő, s mely a Cephalosporium nemzetiséghez tartozik) íerde-agarról nyert spóráival beoltjuk, és a kultúrát 40 órán át 27° hőmérsékleten aerob körülmények között rázógépben inkubáljuk. Az így nyert anyagot 700 literes 60 tartályba visszük, mely olyan összetételű táptalajt tartalmaz, mint a kereskedelmi méretű fermentorok, és 48 órán át 26°-on inkubáljuk abból a célból, hogy a gomba vegetatív növekedése kifejlődjék még a fő fermentorba tör-65 ténő beoltás előtt. 4
