150875. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 5'-mononukleotidek előállítására
150.875 5 Oszlop 1 2 3 4 5 6 7 8 Extrahált anyag Az extraktum előkezelése Nukleinsav Példa: Extrahált anyag Fémsó Fajta Melegítés konc. mol Hőmérséklet C° Tartam percben pH-érték nukleinsav hasítás % P2 O ä lehasítás % 17 tisztított árpakorpa csíra NiCi, 0,001 65 20 5 100 15 18 tisztított árpakorpa csíra NiCU 0,00025 65 20 5 100 18 19 tisztított árpakorpa csíra Ni'Cl, 0,001 65 20 6 100 15 20 tisztított árpakorpa csíra NiGl2 0,00025 65 20 fi 100 16 21 tisztított árpakorpa csíra NiCI, 0,001 65 20 7 96 15 22 tisztított árpakorpa csíra NiClo 0,00025 65 20 7 87 8 23 tisztított árpakorpa csíra ZnCi2 0,01 65 20 4 96 10 24 tisztított árpakorpa csíra ZnCl2 0,001 65 20 6 85 2,6 25 tisztított árpakorpa csíra ZnGl, 0,01 65 20 6 85 2,6 26 tisztított árpakorpa csíra ZnCl2 0,0.01 65 20 6 79 2,7 Idő és hőmérséklet függvényében végzett vizsgálatok: 27 tisztított árpakorpa csíra ZnCl2 0,001 55 5 4 92 32 28 tisztított árpakorpa csíra ZnCl, 0,001 55 10 4 97 23 29 tisztított árpakorpa csíra ZnCl2 0,001 55 20 4 97 16 30 tisztított árpakorpa- csíra ZnClo 0,001 55 40 4 69 2 31 tisztított árpakorpa csíra ZnCl2 0,001 65 5 4 85 0,5 32 tisztított árpakorpa csíra ZnCl2 0,001 65 10 4 80 0,5 33 tisztított árpakorpa csíra ZnCl2 OyOOl 65 20 4 75 0,3 34 tisztított árpakorpa csíra ZnCl2 0.001 65 40 4 59 0.1 35. példa: a) 150 g búzaolajcsírát 1000 ml vízben szuszpendálunk és szobahőmérsékleten 7,5 pH-értéken (amit kálilúg hozzáadásával állítottunk be) két óra hosszat keverjük. Ezután az elegyet centrifugáljuk. Az extraktumot sósav hozzáadásával 5 pH-értékre állítjuk be, majd cinkkloridoldatot adunk hozzá úgy, hogy az extraktum molaritása 0,005 mol ZnCl2 legyen. Ezt követően 20 percig 65 C° hőmérsékleten tartjuk, majd lehűtjük és a kapott csírakivonat pH-értékét ismét 5-re állítjuk be. b) 25 ml a) szerint előállított búzacsírakivonatot 25 ml 2%-os, halspermából előállított és főleg dezoxiribonukleinsavat tartalmazó nukleinsavoldattal elegyítünk és a keverék pH-értékét 7,5-re állítjuk be. Ezt a pH-értéket hígított kálilúg folyamatos hozzáadagolásával ezen az értéken tartjuk. A hasítási folyamat végét a pH-érték állandósulása jelzi. A folyamat átlagos időtartama 37 C°-on körülbelül 27 óra. Nukleinsavhasítás 85%-ig, P2 0 5 lehasítás 6%-ig megy végbe. 36. példa: l/a. szerint előállított csíraextraktumot használunk fel. Ehhez 0,001 mol koncentrációban ZnCl2 fémsót adagolunk, majd 65 C° hőmérsékleten és 5 pH-értéken 20 percig kezeljük. 40 ml előbb említett extraktumot 10 ml 2,5%-os semlegesített dezoxiribonukleinsav-oldattal elegyítünk. Az elegyet nátronlúg hozzáadásával 8 pH-értékre állítjuk be. 24 órás időtartam után, miközben hígított nátronlúg folyamatos adagolásával a pH-értéket 8-on, az inkubálóhőmérsékletet pedig 37 C°-on tartottuk, a nukleinsavhasítás 75%-ig, a foszfátlehasítás 9,6%-ig megy végbe.
