150824. lajstromszámú szabadalom • Eljárás elnyújtott B12-vitamin hatású készítmények előállítására
150.824 3 szűrőn keresztül a palackba. Ezután a szűrőt 2X10 ml steril 1%-os vizes nátriumklorid-oldattal mossuk. A palack tartalmát 30 percig hűtőszekrényben tartjuk, majd a képződött csapadékot szűréssel elkülönítjük és vákuumban, foszforpentoxid felett megszárítjuk. Az így kapott por spektrometriai meghatározás szerint 0,40 mg Bi2'-vitamint tartalmaz mg-onként. 500 mg fenti módon kapott port és 100 mg ciszteint steril mozsárban összedolgozunk 400 ml szezámolajban készített 2%-os alumínium-monosztearát géllel. Az így kapott szuszpenzió 10 mikronnál kisebb méretű részecskéket tartalmaz. 2. példa: B12vitamin-cink-tannát szuszpenzió. 300 mg Bj2-vitamint steril palackban, aszeptikus körülmények között feloldunk 40 ml steril vízben. Az oldatot steril üvegszűrőn keresztül leszívatjuk egy másik steril palackba, majd a szűrőt 10 ml steril vízzel utánamossuk. Ugyanezen a szűrőn keresztül 1200 mg tannin és 600 mg cisztein 15 ml steril vízzel készített oldatát is beleszívatjuk a palaokba. A szűrőt 11 ml steril vízzel utánamossuk, majd 1200 mg cinkacetát 15 ml steril vízzel készített oldatát adjuk az elegyhez ugyanezen a szűrőn keresztül, azután a szűrőt ismét 10 ml steril vízzel mossuk. A palackot 5 C° hőmérsékleten 45 percig állni hagyjuk, majd a képződött csapadékot centrifugálással elkülönítjük, és vákuumban, foszforpentoxid felett megszárítjuk. A kapott termék B121-vitamin tartalma a spektrofotometriai meghatározás szerint 0,15 mg/mg. 500 mg fenti módon előállított komplexvegyületet és 100 mg ciszteint steril mozsárban összedolgozunk 150 ml szezámolajos 2%-os alumíniummonosztearát oldattal. így olyan szuszpenziót kapunk, amely 0,5 mcg/ml Bi2-vitamint tartalmaz, mimellett a szuszpendált részecskék mérete 10 mikron alatt van. 3. példa: B12-vitamin-bizmut-tannát szuszpenzió. 30 mg Bi2-vitamin 5 ml vízzel készített oldatát, 80 mg tannin és 6'0 mg cisztein 5 ml vízzel készített oldatát és 10 mg bizmut-nátriumtartarát 5 ml vízzel készített oldatát ebben a sorrendben, a 2. példában leírthoz hasonló módon üvegszűrőn keresztül bevisszük egy szívópalackba; mindegyik oldat bevitele után után 5 ml vízzel mossuk a szűrőt. A kapott csapadékot centrifugálással elválasztjuk. A spektrofotometriai meghatározás eredménye azt mutatja, hogy a kicentrifugált folyadék 0,08 mg/ml Bi2-vitamint tartalmaz, tehát a kezdeti Bi2-vitamin mennyiség mindössze 8%-át. A kapott terméket vákuumban, foszforpentoxid felett megszárítjuk, ebből és 10 mg ciszteinből 55 ml szezámolajos 2%-os alumínium-monosztearát oldattal való összedolgozás útján kapjuk a végső szuszpenziót. 4. példa: Bi2^vitamin-tannát szuszpenzió fémmel vagy fémnélkül a komplexvegyületben. 1 g alumínium-monosztearátot 50 ml benzollal vízfürdőn 50 C° hőmérsékleten melegítünk mindaddig, míg víztiszta gélt nem kapunk. A kapott gélbe belekeverünk 250 mg Bi2 -viíamin komplexvegyületet (amelyet az 1—3. példák valamelyike szerint állítottunk elő), 50 mg ciszteinnel együtt* e két anyagot előzőleg mozsárban finom porrá dörzsöljük el. A benzolt azután elpárologtatjuk és a visszamaradó port beleőröljük 200 ml steril szezámolajba. Az egész műveletsort aszeptikus körülmények között végezzük; ily módon sterilszuszpenziót kapunk, amely leülepedés esetén könnyen felrázható. A depot-hatás meghatározása céljából összehasonlító kísérleteket végeztünk az alább felsorolt, Co60 -izotóppal megjelölt Bi2-vitamin készítményekkel. A különböző készítményeket intramuszkuláris injekció útján adtuk be 2,7—3,0 kg testsúlyú hím nyulak lábizmába, narkózis alatt, majd az injekció helyén a radioaktivitást szcintillációs detektorral figyeltük. Az alábbi készítményeket alkalmaztuk e kísérletek során: A. Bi2-vitamin vizes 0,9%-os nátriumkloridoldatban, 500 mcg/ml Bi2-vitamin tartalommal, 0,18 mikrocurie/ml B12-C060 aktivitással. B. Bi2"VÍtamin-cink-tannát vizes szuszpenzióban; B;2-vitamin tartalom és Co60 -tartalom mint A. alatt. C. Bí2-vitamm-cink-tannát szezámolajos 2%-os alumínium-monosztearát oldatban szuszpendálva; 500 mcg/ml Bi2 -vitamin és 0,5 mikrocurie/ml B12-C060 . D. Bi2 -vitamin-tannát ugyanolyan közegben szuszpendálva, mint C. alatt, ugyanolyan Bi2-vitamin és Bi2-Co60 -tartalommal. E) Bi2-vitamin-tannát-szezámolajban szuszpendálva, alumínium-monosztearát nélkül; B-vitamin és Co60 -tartalom mint C. alatt. Az A. és B. készítményekből 0,30 ml, a C, D. és E. készítményekből pedig 0,25 ml mennyiséget használtunk fel egy-egy injekcióhoz. Az alábbi I. táblázatban adtuk meg az injekció helyén különböző időtartamok elteltével megmaradt Bi2-vitamin mennyiséget, az eredetileg beadott mennyiség százalékában. A II. táblázatban megadtuk a Bi2-vitaminnak az injekció utáni első, második és harmadik napon a vizelettel kiválasztott mennyiségét, a beadott mennyiség százalékában kifejezve.
