150781. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 6-aminopenicillánsav extrakciós úton történő elkülönítésére

150.781 3 nye, hogy igen híg kiindulási oldat esetén sem igényel bepárlást, mert a 6—APS töménysége az extrakciós lépések megismétlésével a kívánt mértékig növelhető. Ha a 6—APS-t penicillin enzimatikus bontása útján állítjuk elő és a bontás után a változatlan kiindulási termék mennyisége csekély, úgy utóbbi, és az oldat szennyezéseinek jelentős része pH — 2 értéken aktív szénnel történő kezeléssel szelektíven eltávolíthatók. Amennyiben az enzimatikus bontás után az oldatban a penicillin mennyisége olyan jelentős, hogy annak visszanyerése szükségessé válhat, a következő eljárást alkalmazhatjuk, mely egy lépésben oldja meg a penicillinvisszanyerését és savas pH-n az oldatból kiváló szennyezések eltávolítását. Az enzimes bontásnál nyert penicillin és 6—APS tartalmú oldatot, valamely szerves oldószer előnyösen butil-, vagy amilacetát jelenlétében erőteljes keverés közben 2—2,5 pH-ig megsavanyítjuk, majd az igen gyorsan elkülönülő vizes fázist, mely penicillint gyakorlatilag nem, de a 6—APS teljes mennyiségét tartalmazza," további feldolgozás céljára elkülönítjük, a. csapadékos szerves oldószeres fázisból pedig a penicillin kinyerését a szokásos módszerekkel elvégezzük. Az eljárás szemléltetésére az alábbi példákat közöljük: 1. példa: 10 liter enzimes bontás útján nyert folyadékot, mely 3500 gamma 6—APS-t és 350 gamma G-penicillint tartalmaz ml-ként, lehűtünk és 50 g Norit—A. hozzáadása után 2l

Q%-os sósavval pH = 2-re állítjuk, majd leszűrjük. A szűrletet, mely 3420 gamma 6—APS-t és 50 gammánál kevesebb G-penicillint tartalmaz ml-ként, összesen 6 liter, 360 g „Szulfaril—40" tartalmú butanollal 3 lépésben extraháljuk. A harmadik extrakció után a vizes fázis 32!

0 gamma/ml 6—APS-t tartalmaz. Az egyesített butanolos extraktokat erőteljes keverés közben, 5 n nátriumhidroxid oldattal pH = 6,5-re állítjuk és 6O0 ml vízzel több lépésben extraháljuk. A vizes fázisokat egyesítjük (42 000 gamma/ml 6—APS) és 20%-os sósavsegítségével pH = 4,3-ra állítva lehűtés után kikristályosítjuk a 6—APS-t. 24 óra állás után leszűrjük és kevés jéghideg vízzel, majd acetonnal mossuk és szobahőfokon megszárítjuk. A 6—APS súlya 21,3 g. O. p. 207—209 C° (bomlás közben). A kitermelés az enzimes bontás után az oldatban analizált 6—APS-re vonatkoztatva 61%. 2. példa: 5 liter enzimes bontás útján nyert folyadékot, mely a jodometriás meghatározás alapján 16 000 gamma/ml 6—APS-t és 15 200 gamma/ml G-penicillint tartalmaz, 2500 ml butilacetáttal elegyítünk és erőteljes keverés közben az oldat pH-ját sósavval 2,3-ra állítjuk be. A keverés befejezése titán az elegyet 20 percig állni hagyjuk, majd a gyorsan elkülönülő vizes fázist a csapadékos szerves fázistól elkülönítjük. A szerves fázisból a penicillint szűrés után 1200 ml 7,8 pH-jú foszfát pufferral vonjuk ki, majd a 72 0OO gamma/ml G-penicillint tartalmazó pufferes extraktot hígítás után újabb enzimatikus bontásnak vetjük alá. A 4880 ml térfogatú savanyú vizes fázist (15 200 gamma 6—APS/ml) ellenáramban 3 lépésben extraháljuk azonos térfogatú 400 g „Szulfaril—40r

' tartalmú butanollal. Az extrakció után a vizes fázis 6—APS tartalma 550 gamma/ml. A butilalkoholos fázist pH 6,5-nél ellenáramban 1500 rríl vízzel vonjuk ki, majd a 42 000 gamma/ml 6—APS tartalmú vizes oldatból 4,3 pH-n a 6—APS-t kikristályosítjuk. A nyert 6—APS súlya 56,2 g, tisztasága 1'00%-os. A kitermelés, a penicillin eltávolítása után nyert 6—APS tartalmú oldatra számolva 76,0%. 3. példa: 50 liter 2000 gamma/ml 6—APS tartalmú vizes oldatot 2,5 pH-értéken ellenáramban extrahálunk — 3 lépésben — 30 liter, vízmentes n butanol és 2100 ml „Hungekal BXA" elegyével. Az extrakció után a vizes fázis 6—APS tartalma 280 gamma/ml. A butanolos fázist pH = 7,0 értéken 2500 ml vízzel ellenáramban kivonjuk és a 32 500 gamma/ml 6—APS tartalmú oldatból a pH-nak 4,3-ra történő állítása után 58,2 g kristályos 6—APS-t nyerünk. A kitermelés 58,2%. 4. példa: 10 1 35O0 gamma/ml 6—APS tartalmú vizes oldatot pH = 7 értéken extrahálunk 2X2 liter 2% ,,Sterogenol" (eetilpíridiniumbromid) tartalmú butanollal (az extrakciós maradék 280 gamma/ml 6—APS-t tartalmaz), majd a szerves fázist pH 2-n, azonos térfogtú vízzel 2 lépésben kivonjuk. A vizes fázist (6150 gamma/ml 6—APS) pH — 7,0-re állítva 2X500 ml 2,5% „Sterogenol" tartalmú butanollal újra kivonjuk és a szerves fázisból a 6—APS-t 2 pH-n újra — összesen — 800 ml térfogatú — vízbe visszük át. A vizes fázis koncentrációja 22 000 gamma/ml, melyből a 6—APS a szokásos módszerekkel kristályos állapotban kinyerhető. A kitermelés 42%. A példában szereplő „Sterogenol-butanolos" extraktból (1000 ml, 23 500 gamma 6—APS/ml) alkoholos sósav segítségével pH = 4,3-on, 3 órás rázás után a 6—APS közvetlenül kikristályosíthatő. Súlya 9,1 g. 5. példa: 50 liter 25 500 gamma/ml 6—APS tartalmú vizes oldatot 1250 ml „Tekagollal" (meta-nitrobenzolszulfonsavas nátrium 25%-os vizes oldata) elegyítünk, majd 1,8 pH-értéken extraháljuk ellenáramban — 3 lépésben — 50 liter n butanol és 4000 ml „Tekagol" elegyével. Az extrakció után a vizes fázis 6—APS tartalma 1070 gamma' /ml. A 6—APS tartalmú butanolos fázist ugyancsak ellenáramban extraháljuk, 7,5 pH-értéken. 20 liter vízzel, majd a tiszta vizes fázist, melynek 6—APS tartalma 51 300 gamma/ml, 20%-os sósav segítségével 4,3-as pH-ra állítjuk és a kikristályosodott 6—APS-t kiszűrjük. Súlya 912 g. Olvadáspontja 205—206. Az anyalúg 6—-APS tártai-