150738. lajstromszámú szabadalom • Eljárás heptapeptid előállítására
ö Í50.73Ö oldjuk és az oldat pH-ját trietilaminnal 8-ra állítjuk. Ezután 0,2 g p-klórbenziloxikarboníl - valil-tirozint és 0,1 g diciklohexil-karbodiimidet adunk az oldathoz. Másnapig szobahőmérsékleten állni hagyjuk, a kivált karbamidszármazékot leszűrjük és a szüredéket vákuumban szárazra pároljuk. A további feldolgozás megegyezik az a) pontban leírttal. 0,23 g (53,2%) védett heptapeptidészter nyerhető, melynek tulajdonságai mindenben megegyeznek az a) pontban leírttal. 13. példa: L-valil-L-tirozil-L-prolil-L-a-aszparagil-glicil-L-alanil-L-glutaminsavtrietilészter (II—7) A 12. példában leírt védett heptapeptidészterből 0,5 g-t oldunk 5 ml absz. etanolban, néhány csepp tömény sósavat adunk hozzá, majd 0,5 csontszenes palládium 5 ml etanolban előhidrogénezett szuszpenziójához adjuk. Intenzív hidrogénáramot buborék oltatunk keresztül rajta, majd amikor a C(>2-próba már negatív, a katalizátort kiszűrjük és az oldatot vákuumban bepároliuk. A maradékot absz. éterrel eldolgozzuk és leszívatjuk. Termelés 0,32 g (73,8%) szabad heptapeptid-észterklórhidrát, mely alkohol-éter elegyből finom tűkben kristályosodik, op. 178—83°. A kristályos anyag papírkromatográfiasan több rendszerben futtatva, valamint elektroforetikusan és ellenáramú megoszlással egységesnek mutatkozik. Teljes hidrolízis két dimenziós kromatogramban mind a hét azonosított aminosav jelenlétét mutatja. e3 9H6oO, 3 N 7 Cl (870,38), R/ 2 = 0,84; Er5 = 0,87; Számított: N 11,2; Cl 4,1; OC2 H 5 15,5 Talált: 10,7 4,1 15,5 Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás az alábbi általános képletű új heptapeptid-származékok előállítására X—V al—Tyr—Pro—Asp(£—OR)— Gly—Ala—Glu{OR)2 — ahol X hidrogénatomot, benzoiloxikarbonilvagy p-klóibenziloxikarbonil-csoportot, R pedig hidrogénatomot, alkil- vagy aralkil-csoportot jelenthet, mimellett az egyes R helyettesítők egymástól különbözők is lehetnek: az egyes L-aminosav-maradékok kémiai nevük első három betűjével vannak jelölve — azzal jellemezve, hogy a H—Gly—-Ala—Glu(OR)2, Zx — Pro—Asp(,«—OR) és Zx —-Val—Tyr—NHNH 2 vagy Z x —Val—Tyr—OH peptid-származékokat — ahol R jelentése megegyezik a fentebbi meghatározás szerintivel, Z benziloxikarbonil-csoportot, Zx pedig benziloxikarbonil- vagy p-klór-benziloxikarbonil-csoportot képvisel — alkalmazzuk kiinduló anyagokként és ezek közül a két előbbit egymással a megfelelő védett pentapeptidészterré kapcsoljuk, majd a kapott termékből felszabadított pentapeptidésztert az utóbbi Val—-Tyr-származékkal kondenzáltatjuk és adott esetben az N-terminális - védőcsoportot önmagában ismert módon eltávolítjuk. 2. Az I. igénypont szerinti eljárás kiviteli módja, azzal jellemezve, hogy a kiinduló anyagként felhasználásra kerülő H—Gly—Ala—Glu{OR)2 tripeptidésztert a H—Ala—Glu(OR)2 dipeptidészter benziloxikarbonil-glicinnel való kondenzációja útján, kristályos hidroklorid alakjában állítjuk elő. 3. Az 1. igénypont szerinti eljárás kiviteli módja, azzal jellemezve, hogy az X—Pro—Asp(ß-OR)— dipeptid-származékot N-védett prolin valamely L-asparaginsav-/?-monoészterrel való kondenzáltatása útján, kristályos alakban állítjuk elő. 4. Az 1. igénypont szerinti eljárás kiviteli módja, azzal jellemezve, hogy az X—Pro—Asp(/?-OR)— —Gly—Ala—Glu(OR)2 pentapeptidésztert a kristályos alakban előállított N-védett Zx—Pro— Asp (ß—OR) dipeptid-monoészternek a H—Gly—Ala— —Glu(OR)2 tripeptidészterrel való kondenzáltatása útján, kristályos alakban állítjuk elő. A kiadásért felel a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója 634363, Terv Nyomda, Budapest V., Balassi Bálint utca 21-25.
