150736. lajstromszámú szabadalom • Eljárás védett dodekapeptid előállítására
6 150.736 rázzuk át (4X20 ml). Az egyesített etilacetát oldatokat nátriumszulfáton szárítjuk. A fenti azid és az előbbi észter-bázis oldatait egyesítjük és kb. 40 ml-re töményítjük be vákuumban. Szobahőmérsékleten hagyjuk állni 48 órán át. A kivált fehér anyagot kiszűrjük, hideg etilacetáttal, éterrel mossuk, szárítjuk. A védett pentapeptidészter 9,2 g (60%). Op: 154—1560. [cc] n ° = —31° (c = 2, metanolban). Rí'i : 0,94 és Rf •, : 0,97. C47H64O12N7S2CI (1018,63) Számított: C 55,5 H 6,3 N 9,6 S 6,3 Cl 3,5 Talált: C 55,5 H 6,3 N 9,8 S 6,3 Cl 3,5 A fenti anyagból 2 g-t feloldunk 44 ml metanolban és 17.5 ml víz hozzáadása után az oldatot 6—6.5-es pH-értékre állítjuk be 1—2 csepp 2 n sósavval. Szobahőmérsékleten hagyjuk állni 5—7 napon keresztül. A kivált kristályokat kiszűrjük, vizes metanollal mossuk, szárítjuk. Kapunk 1.5 g (75%) anyagot, mely 156—158°-on olvad meg. 8. példa: L-prolil-L-valil-glicil- £ -tozil-L-lizil- £ -tozil-L-lizin-metilészter-brómhidrát (XIV) Rázogatás közben 20 ml brómhidrogénes jégecettel (kb. 2'5%-os) dekarbobenzoxilezünk 7,5 g védett pentapeptidésztert (XIII'). A reakcióidő két óra. Az oldatot betöményitjük és éterrel eldörzsöljük. A még olajos anyagról az étert dekantáljuk és 40 ml forró acetonban feloldjuk. Azonnal kristályosodik. Egy éjszakán át jégszekrényben hagyjuk állni, majd szűrjük, hideg acetonnal, éterrel mossuk, szárítjuk. A szazad pentapeptidészter-brómhidrát 4,5 g (68%). Op: 100°-tói bomlik. [rt]c° =•--- —22° (e — 2, metanolban). Rf'i : 0,89. C3oH6oOioN7S 2 Br (951,00). Számított: N 10,30 S 6,75 Br 8,4 Talált: N 10,39 S 6,90 Br 8,2 9. példa: Benzoiloxikarbonil-glicil- £ -tozil-L-lizil-L-prolil-L-valil-glicil- £ -tozil-L-lizil- £ -tozil-L-lizin-hidrazid (XVI) a) Benziloxi karbonil-glicil- £ tozil-L-lizil-L-prolil-L-valil-glicil- £ -tozil - L-lizil- £ -tozil-L-lizin-metilészter (XV): szobahőmérsékleten feloldunk 8,8 ml jégecetben 2,22 g védett dipeptidhidrazidot (IV) és 1,0 ml 5 n sósavat adunk hozzá, majd lehűtjük —10° körüli hőmérsékletre. Egy részletben hozzáadunk 1,0 ml 5 mólos nátriumnitrit-oldatot. Keverjük 15 percen keresztül. Ez alatt az idő alatt teljesen homogén lesz a reakcióelegy, melyhez 10 ml hideg 1'5%-os konyhasó-oldatot adunk. A sárga olaj formájában elkülönülő azidot (V) etilacetátban oldjuk fel (3X10 ml), majd az egyesített etilacetátos oldatokat hideg 10%-os nátriumkarbonát-oldattal savmentesre mossuk és nátriumszulfáton hűtés közben megszárítjuk. Feloldunk 3,81 g szabad pentapeptidészter - brómhidrátot (XIV) 10 ml dimetilformamidban és 0,62 ml trietilamint adunk hozzá. (A szabad észter-bázis mellől a trietilamin-brómhidrát kikristályosodik.) Ehhez szűrjük a fenti azid-oldatot, majd az etilacetátot vákuumban 30°-os fürdőről ledesztilláljuk. A dimetilformamidos reakcióelegyet 48 órán keresztül hagyjuk állni szobahőmérsékleten, majd a dimetilformamidot is ledesztilláljuk vákuumban. A visszamaradt sárga olajat 60 ml kloroformban oldjuk fel és mossuk 1 n sósavval, vízzel, 10%-os nátriumkarbonát-oldattal, vízzel. Szárítás után be•pároljuk. A párlási maradékként kapott fehér hab a védett heptapeptidészter (XV). b) A fenti észtert 10 ml metanolban feloldjuk és 1,4 ml 80%-os hidrazinhidráttal visszafolyós hűtő alatt négy órán keresztül forraljuk, majd bepároljuk. A maradékot vákuumban szárítjuk kénsav mellett. A fehér habot éterrel eldörzsölve fehér porhoz jutunk. A védett heptapeptidhidrazid 4,5 g (85%). Op: 100°-on lágyul és 105°-tól bomlik. |>]D ° = —32° (c = 1, metanolban). Ríi : 0,91, Rfo : 0,94. CoiHsnOisN^S.-j (1323,59) Számított: C 56,4 H 6,6 N 12,7 S 7,25 Talált: C 54,9 H 6,7 N 12,6 S 7,5 10. példa: Benziloxikarbonil-L-prolil-L-valil- £ -tozil-L-lizin-metilészter. (XVIII.) Feloldunk 30 ml jégecet és 60 ml 1 n sósav elegyében 3,6 g benziloxikarbonil-L-prolil-L-valinhidrazidot (XI), majd só-jéghűtéssel —10°-re hűtjük. Ezen a hőmérsékleten, keverés közben adunk hozzá 2,4 ml 5 mólos nátriumnitrit-oldatot. Öt perc keverés után 50 ml 0°-os telített konyhasóoldattal az azidot (XII) kicsapjuk és 3X75 etilacetáttal kirázzuk. Az etilacetátos oldatokat egyesítjük, majd hideg 10%-os nátriumbíkarbonátoldattal savmentesre mossuk, magnéziumszulfáton szárítjuk. £ -tozil-L-lizin-metilészter - klórhidrátból (II) 3,5 g-t 10 ml 10%-os nátriumkarbonát-oldattal és 20 ml etilacetáttal rázunk össze. A vizes rész elválasztása után azt még kétszer 20 ml etilacetáttal kivonatoljuk, majd az etilacetátos oldatokat egyesítve megszárítjuk maznéziumszulfáton. Az észterbázis (II) és az azid (XII) oldatait összeszűrjük, majd vákuumban kb. 20 ml-re bepároljuk. Két napig 0°-on hagyjuk állni. A reakció végén a szokásos módon kimossuk és szárítás után vákuumban bepároljuk szárazra. A maradék hab petroléterrel fehér porrá esik szét. Kapunk 4,7 g (70%) védett tripeptidésztert. Op: 152—154°. Rfi :0,96 és Rf2 :0,97. [o.]g° = —55° (c = 1, metanolban). C32H44Q8N4S (644,76) Számított: N 8,7 S 5,0 OMe 4,8 Talált: N 8,8 S 5,1 OMe 4,6 11. példap-Klór-benziloxikarbonil-L-prolil-L-valil- £ -tozil-L-lizin-metilészter. (XVIII') Feloldunk 19,84 g p-klór - behziloxikarbonil-L-prolil-L-valin-hidrazidot (XI') 150 ml jégecetben és 3O0 ml 1 n sósavat adunk hozzá. Lehűtjük
