150632. lajstromszámú szabadalom • Eljárás egy új antibiotikum előállítására
6 150.632 F: a „Manual of methods for pure culture study of bacteria" {Society of American Bacteriologists, II50—18) szerinti módon elkészített „sima 'zselatin"; G: a Waksmam szerinti „Czapek-féle szaccharóz-lé" (18) táptalaj, azzal az eltéréssel, hogy 3% glükózt tartalmaz a szaccharóz helyett; H: a "Manual of methods for pure culture study of bacteria" (Society of American Bacteriologists, II50—18) előírása szerint; I: Grundy és mteai, Antibiotics and Chemotherapy, 1, 309 (1951); J: Gayelord Häuser márkájú sovány tejporból készítve a gyártó előírása szerint. A különféle szénhidrátok felhasználása (Pridbam és Gottlieb, J. Bact. 56, 167 [1948] módszere szerint). A kultúrákat ferde ágár-lemezen neveltük, az mkubáltatás 26 C° hőméréskleten történt. Gyors növekedést tapasztaltunk, teljes kifejlődéssel, levegő-micélium és spórák képződésévé], 10 nap A 9671 R. P. antibiotikum előállítási eljárása lényegében abból áll, hogy a Streptomyces 40 037 törzset vagy ennek mutánsait megfelelő táptalajon, eme alkalmas körülmények között tenyésztjük, majd a fermentáció során képződött antibiotikumot elkülönítjük a közegből. A Streptomyces 40 037 törzs kultúráját bármely aerob fermentációs módszerrel tenyészthetjük, felületi vagy alámerülő kultúrában; alámerülő kultúra előnyösebb kényelmi okokból. A fermentációhoz a jelenlegi fermentációs iparban használatos különféle típusú berendezéseket hasz nálhatjük. A törzs tenyésztésének művaleti sorrendje a következő lehet: alatt, többek között az alábbi szénhidrátokat tartalmazó tápközegekben: glükóz, maltóz, laktóz, szaccharóz, keményítő, dextrin, xilóz, raffinóz, inulin, fruktóz, mannóiz, arabinóz, ramnóz, galaktóz, továbbá mamiit, inozit, mezoinozit, glicerin, nátriumacetát, nátriumcitrat és borostyánkősav. A szorbóz, szorbit, erítrit adinit és dulcit vagy egyáltalán nem, vagy csak rendkívül korlátozott mértékben teszi lehetővé a kultúra fejlődését. így ez utóbbi tápanyagok e célra alkalmatlanoknak minősíthetők. A Streptomyces actuosus összehasonlítása a "Bergey's Manual of Determinative Bacteriology" c. műben leírt két Streptomyces-törzzsel. A Streptoimyces fasciculus {eredetileg Krassilnikov által leírva) és Streptomyces camosus (Millard et Burr) az. a két Streptomyees-törzs, amelyek leg jobban megközelítik tulajdonságaik szempontjából a 9671 R, P. antibiotikumot termelő Streptomyces actuosus törzset. A kultúrák jellemző vonásaiban és. biokémiai sajátságaiban mutatkozó különbségeket az alábbi V. táblázatban foglaltuk össze. Streptomyces 40 037 — törzs-tenyészet i Kultúra agáron l Kultúra rázott palackban i Fermentációs inokulum-kúltúra l Termelő kultúra fermentorban. A fermentációs közegnek lényegileg egy asszimilálható szénforrást és egy asszimilálható nitrogénforrást, továbbá ásványi anyagokat és esetleg növekedési faktorokat kell tartalmaznia; mindezeket az anyagokat vagy jóldefiniált termékek V. táblázat S. fasciculus Spórahozdozó fonalak A spórák alakja Szaccharózos szintetikus ágár-táptalaj (1) Glükózos szinté ti kus ágár-táptalaj (C) Agáros tápközeg (5) Zselatin (F) Tej (J) Keményítő (19) Nitrát (H) egyenes hosszúkás S. carnosus S. actuosus levegőmicélium kevéssé fejlett, szürke közepes elfolyósodás gyors koagulálás és pep ton izál ó d ás gyors hidolízis gyenge redukció niritté — hajlott hengeres ovális a vegetatív micélium halvány a vegetatív micélium füstszürke, az egész felületen színtelen, izzadmény színtelen izzadinány-cseppecskék nincs a vegetatív micélium halvány a vegetatív micélium olívszürke színtelen — levegőmicélium nincs gyors elfolyósodás koagulálás az elfolyósodáseal kapcsolatban hidrolízis redukció lassú, de teljes elfolyósodás nincs koagulálás, lassú peptonizálódás lassú, nem teljes hidrolízis (dextrinnél megáll) erős redukció