150246. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 17alfa-metil-17béta-hidroxi-androszta-1, 4-dién-3-on mikrobiológiai dehidrogénezéssel történő előállításának optimális kivitelezésére
Megjelent: 1963. május 31. MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL Nemzetközi osztálv: C—Ö7-C, 150.246 SZÁM GO—833 ALAPSZÁM Magyar osztály: 12—0-25 SZOLGÁLATI TALÁLMÁNY. Eljárás 17 «• --metil-17^ -hidroxi-androszía-l,4-dién-3-on mikrobiológiai dehidrogánezéssel történő előállításának optimális kivitelezésére Gyógyszeripari Kutató Intézet, Budapest Feltalálók: Mixsei Antal gyógyszerész (50%). Szabó Antal oki. vegyészmérnök (50%) A bejelentés napja: 1961. október 30. A 17«-metil-17/?~hidroxi-androszta-l,4-dién-3-on (továbbiakban dehidrometiltesztoszteron) anabolitikus hatású szteroid hormon egyik előállítási módja 17a -meíil-17/S-hMroxi-aíidrcszt-4-én-3-on (továbbiakban meíiltesztoszteron) specifikus 'mikrobiológiai oxidációja, fermentációs közegben. A meíiltesztoszteroin biológiai oxidációs fermentáció útján történő átalakítása teljes mértékben a kívánt termékké, a dehidrometiiíesztoszíeronná — még számos ismeretlen tényező hatásaképpen — különféle ido alatt zajlik le és így a maximális dehidrometiltesztoszteron koncentráció egy előre nem ismert időpontban következik be. Ha teljes átalakulás után a biológiai oxidációt tovább folytatjuk, a már keletkezett dehidrometiltesztoszteron mennyiségében csökkenés következik be s a túloxidáció értéktelen termák keletkezéséhez vezet. Ugyanakkor igen fontos, hogy az oxidáció ne legyen leállítva idő előtt, mivel az esetben nemcsak a dehidrometiltesztoszteron kitermelés csökken, hanem a készterméktől nehezen elválasztható kiindulási termék is szennyezi az árut. Mivel pedig a végtermék anabolitikus hatású, a kiindulási termék pedig nemi hormon, az eltérő indikáció és klinikai hatás folytán miinél tisztább dehidrometiltesztoszteron előállítása kívánatos. Az optimális dehidrometiitesztoszteron termelés megállapítására olyan gyors és specifikus analitikai eljárásra van szükség, amelynek segítségével a dehidrometiltesztoszteron tartalom a mindössze néhány óra alatt lezajló fermentációs oxidációs periódus folyamán sűrű időközökben vett mintákból mennyiségileg meghatározható. Ilyen eljárás sem szabadalom, sem irodalmi közlemény formájában ez ideig nem ismeretes. A különféle 'mikrobiológiai szteroid átalakítások vizsgálatára főként papírkromatográfiás elválasztással egybekötött eljárások ismeretesek. Ezen módszerek azonban — hosszadalmasságuk miatt — a szteroid átalakítás mértékéről csak. a mikro biológiai oxidáció lezajlása után tudnak — nem teljesen pontos — mennyiségi felvilágosítással szolgálni. A szteroidok megkülönböztetésére számos eljárást írtak le, amelyek közül erős tömény savak (azok elegyei, vagy azokhoz adalék anyagokat adva) behatására keletkezett kromogén szolgálhat meghatározás alapjául. (Mint legismeretesebb ilyen eljárás. Zaífaroni, A. [Recent Progr. Hormone Res., 8, 51, Academic Press. Inc. Publishers. New York, 1953J módszere.) Azonkívül, azonban, hogy metiitiesztoszteron-dehidrometiltesztoszteron keverék rendszerre a fenti típusú meghatározási eljárás nem ismeretes, az említett kromogén képzés más szteroidokra, ill. szteroid rendszerekre leírt módszerei gyors elemzésre és fermentációs folyadék esetére nem alkalmazhatók. A találmány eljárás, amellyel a fermentációs oxidáció folyamán képződött dehidrometiltesztoszteron mindenkori mennyiségét 'gyorsan, sűrű időközökben meghatározhatjuk és annak alapján a fermentálást optimális termelési fokon leállíthatjuk. A módszer specif itása igen nagy fokú: azzal a dehidrometilteöztoszteront a szerkezetileg igen közelálló metiltesztoszterora mellett fermen-