150018. lajstromszámú szabadalom • Eljárás Streptomyces noursei törzs nystatin termelésének fenntartására és fokozására

150.018 tünk szulfátsó alakjában, a törzs termelőképességének elvesztése az átoltások folyamán elkerülhető volt (lásd 1. táblázat). A táblázatokiban megadott termelési értékek az aintibiotikumtermelésben használatos kísérleti eszközökkel lefolyt kísérletekben a következő táptalajokon lettek megállapítva: Fermentációs táptalaj: kukoricalekvár 1 %(50%-os) szójaliszt -1 % ammóniumnitrát 0,5% keményítő 5 % kálciunikarbonát 1 % nátriumklorid 0,3% pálmaolaj 0,4% Rázott táptalaj: kukoricalekvár 1 o/o (500/o-os) szóialiszt 1 % ammóniumiiitrát 0,5% glükóz 4 % kálciumkarbonát 1 % nátriumklorid 0,2% A fermentációs kísérletek 100 literes vagy 1000. literes hasznos térfogatú férmfermentorban folytak 28 C°-on, 180-as keverés mellett, a táptalaj' térfogatával megegyező térfogatú levegővel 1 perc alatt történő átfuttatással. Rázott kísérletek 500 ml-es Erlenmeyer lombikban 100 ml táptalajjal folytak 28 C°-on. A rázőgép minden pontja 300 fordulattal 2 cm átmérőjű kört írt le. 2, példa: Streptomyces noursei STU—32-es variáns termelőképessége 2,500 E/ml volt rázóasztal tenyésztési körülmények között. A burgonyafőzet agáron termelt spóraszuszpenzió besugárzás nélkül, ill. 5 perces ultraibolya besugárzás után (15 W-os Germicid-lámpával) burgonyafőzet-glükóz agárra szélesztettük, a kinőtt izolált telepekről 50—50 variánst izoláltunk és ezeknek termelőképességét összehasonlítottuk.' A kísérlet eredményeit a 2. táblázatban foglaltuk össze. Szabadalmi igénypont: Eljárás magasabb egységszámú nystatint ter-" meló Streptomyces noursei törzs szelektálására vagy feinmentáliására, azzal jellemezve, hogy a törzset jó spórásodást biztosító táptalajon, előnyösen burgonyafőzet-glükóz agáron streptomycin, dihidrostreptomycin vagy más bázikus karakterű anti'ba'kteriális antibiotikum jelenlétében tesszük ki mutagen hatásnak, vagy a korábban nyert törzset ugyanilyen körülmények között tartjuk fenn és az egyes egyedeket izolálás után használjuk a nystatin termelésére. 1. TÁBLÁZAT Fenntartás Kísérleti Termelt nystatin E/ml szubkultúrák száma: körülményei körülmények 1 2 3 4 5 6 Streptomycinmentes agáron Fermentorban 10,100 7,300 — — 3,500 — Rázótenyészetben 2,940 2,550 2,040 1,290 960 960 10 ug/tnl streptomycia a Fermentorban 10,100 9,600 9,900 — —, 10,200 tartalmú agáron Rázó tenyészetben 2,940 3,150 3.000 3,150 2,940 3,300 10 ug/ml dihidroFe rmemt orban 10,100 — — — — 9,700 streptomycin tartalmú agáron Rázótenyészetben 2,940 2,900 3,100 — 3,000 2,900 2. TÁBLÁZAT 3,100 Szélesztés körülményei Izolált variánsok termelőképessége rázótenyészetben 2,200—2,600 E 2,600—3,000 E „„„„„., között között 3,000 Efölött variánsok száma Besugárzás nélkül streptamycinmentes agáron Besugárzás nélkül 10 tig/ml streptoirnycintartalmú agáron Besugárzás streptomycinmentes agáron Besugárzással 10 /xg/ml streptomycintartalmú agáron 22 19 15 9 28 30 34 36 0 1 • 1 5 A kiadásért felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója 624235. Terv Nyomda, Budapest V., Balassi Bálint utca 21-23.