150018. lajstromszámú szabadalom • Eljárás Streptomyces noursei törzs nystatin termelésének fenntartására és fokozására

•*SC Megjelenít: ltí'í árcius 31. MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG w -^ SZABADALMI LEÍRÁS ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL 150.018. SZÁM GO—800. ALAPSZÁM Nemzetközi osztály: C 12 k Magyar osztály: 30 h 1—8 SZOLGALATI TALÁLMÁNY Eljárás Streptomyces noursei törzs nystatin termelésének fenntartására és fokozására Gyógyszeripari Kutató Intézet, Budapest Feltalálók: Szentirmai Attila biológus (50%), dr. Horváth István vegyész (40%), Dóczi Bálint vegyészmérnök (10%), budapesti lakosok A bejelentés napja: 1961. május 17. Gazdaságos antibiotikumtermelés magas termelő'képességű variánsokkal érhető el. A törzsek termelőképességének javítására mutációs hatást okozó besugárzást vagy ilyen hatással rendelkező anyagokkal való kezelést szoktak alkalmazni. A mutáció során különböző termelőképességgel rendelkező egyedek keletkeznek, amelyek között jobban és gyengébben termelők egyforma valószínűséggel találhatók. Így igen nagy számú telep izolálása és rázott lombikban való kipróbálása után találhatunk számunkra kedvező tulajdonsággal bírót. Nagy jelentősége van ezért annak, ha a mutáció kivitelezését úgy tudjuk befolyásolni, hogy a számunkra kedvező magas termelőképességgel bíró egyedek száma növekedjen. Több esetben elérhető ez a törzs által termelt antibiotikumnak a táptalajba való oldása révén, mint pl. a streptornycint termelő Streptomyces griseus esetén streptomycintartalmú táptalajjal. Streptomyces noursei termelőképességét nystatintartalmú agáron való tenyésztéssel nem lehetett befolyásolni. A .Streptotnyces noursei esetében javítottuk a törzs nystatin termelőképességét ultraibolya besugárzással. A magas termelőképességű variánsok azonban átoltások során rendkívül gyorsan vesztették el a kedvező tulajdonságukat, már a 2. és 3. szubkultúrák jelentékenyen alacsonyabb termelőképességet mutattak. Azt figyeltük meg, hogy a termelőképesség csökkenésével nőtt az anyagcsere aktivitás és azonos fermentációs körülmények között csökkent a termelt micélium mennyisége. Azt a meglepő megfigyelést tettük, hogy ha a variánsok fenntartása streptomycintartalmú tápagáron történik, abban az esetben a törzs termelőképességének csökkenése az átoltások alkalmával elkerülhető vagy nagy mértékben csökkenthető. Ezt azzal magyarázzuk, hogy a fokozott aktivitású anyagcserével és csökkent antibiotikunitermeléssel bíró egyedek fejlődését az adagolt streptomycin gátolja. Streptomycin helyett eredményesen használtuk a dihidrostreptomycint, de használható más szerkezetileg és hatástanilag a streptornycinhez hasonló antibiotikum is. Ennek alapján azt a további megfigyelést tettük, hogy ha a Streptomyces noursei spőraszuszpenzióját akár mutációs hatásnak való kitétel után, akár anélkül Sitreptornycinitartalmú tápagáron szélesztjük, nagyobb százalékban kapunk jól termelő variánsokat. Ez tehát azt bizonyítjaja, hogy az általunk strepto<mycinnek tulajdonított szelektáló hatás minden esetben fennáll, amikor a törzs variálása bekövetkezik. 1. példa: A Streptomyces noursei STU—5-ös jelzésű variánsnak termelőképessége fermentoros kísérletekben 10,100 E/ml, rázóasztal kísérletekben 3,060 E/ml volt. A törzset burgonyafőzet-glükóztartalmú agáron tartottuk fenn. Ha a fenntartás streptomycinmentes agáron történt, a termelőképesség gyorsan csökkent, ha viszont az agárhoz 10 /'g/ml streptomycint vagy dihidrostreptomycint kever-