149771. lajstromszámú szabadalom • Eljárás C-cephalosporin kinyerésére

149.771 3 cserélő gyanta telítődik klorid-ionnal és , így az anicn.cserélő gyantára felvitt cldatban jelenlevő C-cephalosporin teljes mennyisége valóban keresztülhalad a gyantán, nem lépnek tehát fel hatóanyagveszteségek az eljárás e szakaszában. Ily módon való dolgozás esetén az anionoserelő gyanta egymást követő szakaszairól kapott perkolált C-eephalosporin oldat nem. tartalmaz kimutatható mennyiségű klorid-, szulfát- ill foszfátiont, viszont tartalmazza az anioncserélő gyantára eredetileg felvitt megsavanyított fermentációs' lében jelenlevő C-cephalosporin teljes mennyiségét. \ ' ,J ko n

bbi n

+3

tiuk azok c i it 1 >->

i t J

^ níseic"

1

) -n intakat cl b i'lli I 1 ti F1|"I ^b1 ">

?nl-(1 I 1 c lW ll /i ( (IS \ < rsJ

iL i i\ it ik D1\ •s^ie-i-)' nersek ti -. i omni okit niirt j/Uj-fonat vag1*, íos *ii-i ( (

t i* hí ?n

a

v

ti aniL \PK > í f It-t ri-t. " ] ie>-" icU/uib Í'II1

'

s'nnr'o mj

imi

p\

i ph > Jim* i/ i c u i knhiid/hat l-il -> ri^o a van tik példáiként i ^íiu IV IR ' ! DJ\ iö \ " 1 " 1 p le1

"> f

r

^ L/f ut fniciiombc ' e-/ meke'~ f rí jl 2 A klni f-i 1 o^ H -> ] 1 ,ki 1K mi/ Í. 1 1 e ÍJ he ] v 7

f '* de íbol a1 ! 1 1 i 1 1 1 ere s n ,oi h ek)i i w ei k 1 j ^t

ni'

> \ -> i i"]ir -,< e u \ 1 1 1-. j. iák iLi in In l-io 1 1 ]

ni -i nie & IC lf 1

1- 1^° l t P 1 \t- l \ í -b it V -4 SM 1, x 1 n t [T keie>kod"hi lmv( ^ on b o^oit teimtk e iiii h lo

1 3 ' ( t 1 1 K ,1' i -zasia ' r 1 T , ngc ampu^o

i

1

>

!

' le \ u 4\ek dLe

L

it alakban 3 lotul 1 |T-i r>l< c* ^s°leben 11 gt kapacitást rau* r1

»nh spr i in 1 szemben emeleti 1 ' «- 1 0

JIIOI J1

púid 1 i i -J " b ]

poimt l^e ff <

"> L 1 T£,J

u< c eielo 1 i- i el e\ 7es te n kek ilkal due F ' mi/hu v ibai > e 1 ^eh-t nos -mioncserelő £f antak m ' r 0 C D1 il 1 e n c

ct

H si"nlrl

r tt il i'ii » '11 g\a tak ul az Ambe 11 t TR J) T) m > 1 D jM, ex 2 es , Deat in T

'~

t "skedeln 1 <Jit\t t su teimekek. 4. A tisztított C-cephalosporin nátriumsóvá történő átalakítására bármely nátrium alakban levő erős kationcserélő gyanta megfelel; az e célra alkalmazható kationcserélő gyanták jellegzetes példájaként a ..Dowex 50 X 3:' kereskedelmi elnevezésű termék említhető. A találmány szerinti eljárás gyakorlati kiviteli módját közelebbről az alábbi példa szemlélteti. A kultúra pH-értékét jégecet hozzáadása útján, keverés közben 5,5-re állítjuk be. A szuszpenziót megfelelő szűrőkészüléken vezetjük át. víztiszta szüredék nyerése céljából. Célszerű a szűrendő szuszpenzióhoz (bizonyos fajtájú szűrőkészülékek használata esetén) valamilyen nagyfelületű kovasavas szűrési segédanyagot (pl. Celite, Hy-flo, Super-Cel) adni. A víztiszta szüredéket Amberlite IR—120 ioncserélő gyanta hidrogén alakban történő hozzáadása útján, keverés közben 2,8—3,0 pH-értékre állítjuk be. A kívánt pH-érték elérése után a szuszpenziót leszűrjük, 37 Ca

hőmérsékleten melegítjük és 3 óra hosszat ezen a hőmérsékleten tartjuk. Ezután amennyire csak lehet, lehűtjük (célszerűen 0 C°-ra). A tisztítási eljárást szervetlen, anionok, mint pl. klorid jelenléte zavarhatja, minthogy ezek is adszorbeálódhatnak a gyantán. Ezért előnyös a tisztítási, eljárás e szakaszában eltávolítani ezeket. Azt tapasztaltuk, hogy ha az oldatot acetát alakban alkalmazott Amberlite IRA—400 ioncserélő gyantával töltött oszlopon, vezetjük keresztül, a gyanta adszorbeálja' mind a C-eephalosporint, mind pedig az erős anionokat, ha azonban a gyanta megterhelését egészen a ' klorid-ionok áttöréséig folytattuk, a C-eephalosporin teljesen eluálódik a gyantáról. Ezért célszerűen oly módon járhatunk el, hogy 30-a.s szitafinomságú,' acetát alakban, levő ]RA—400 ioncserélő gyantával töltött oszlopok sorozatát állítjuk fel és a lehűtött, 3,0 pH-értékű szüredéket az oszlopok egyikén, vezetjük át a klorid-ionok áttöréséig. Amikor ez bekövetkezik, a szüredékáramot azonnal a második oszlopra irányítjuk át és ezt így folytatjuk mindaddig, míg az egész mennyiség kezelésével cl •nem. készülünk. A gyantákról lefolyó oldatot időnként a szokásos módon, ezüstnitráttal és salétromsavval ellenőrizzük klorid-ionokra. Célszerű olyan nagy oszlopot felállítani — a szándékolt művelet arányainak megfelelőéin — amely elegendő nagy ahhoz, hogy a kloriddal való 'telítése a kecelendő szüredék mennyiségének legnagyobb részét igénybe A/egye, csupán egy kis mennyiségű szüredék maradjon vissza, amelynek kezelésére azután kisméretű oszlopok sorozatát alkalmazzuk. Ily módon az oszlopokon adszorbeálva maradó C-cephalosporinból eredő veszteségek minimumra csökkenthetők. Tanasztalataink szerint az oszlopokban alkalmazásra kerülő ioncserélő gyanta teljes térfogatának a kezelendő szüredék-térfogat 0,75%-át kell megközelítőleg elérnie. Az átáramoltatási sebességnek percenként kb. 0,3 gyantaágy-térfogatnak kell megfelelnie; az oszlop-magasság kb. 50 cm legyen. . A szüredék a fenti módon történő kezelés után. a szervetlen anionoktól gyakorlatilag már mentes. . Az antibiotikum ezután könnyen adszorbeáltatható Amberlite IR—4B acetát alakban levő gyantán; eluálása erről a gyantáról piridinacetát tompítóoldattal történik. A gyantát szabványos minőségben, kb. 30.-as szitafinomságban alkalmazzuk, kb. 60 cm-es oszlopban. Az oszlopot kb. 80%-ig telítjük C-cephalosporinnal, oly meden, hogy a fent leírt módon kezelt szüredéket perifeenként kb. 0,1 ágy-térfogatnak megfelelő sebességgel vezetjük át az oszlopon. A kezelendő szüredék térfogatára számítva kb. 2%-íiak megfelelő gyanta-térfogatra van szükség ahhoz, hogy ezt a telítési fokot elérjük. A