149132. lajstromszámú szabadalom • Eljárás erjesztés útján kapott nystatin tartalmú anyag tisztítására
Megjelent: 1962. március 15. MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG H SZABADALMI LEÍRÁS ÜKSZAGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL 149.132. SZÁM 30. h. 1—8. OSZTÁLY — GO—744. ALAPSZÁM SZOLGÁLATI TALÁLMÁNY Eljárás erjesztés útján kapott nystatin tartalmú anyag tisztítására Gyógyszeripari Kutató Intézet, Budapest Feltalálók: dr. Gyimesi József oki. vegyész (50%), dr. Magyar Károly oki. vegyész (20%), Kasszán Béla oki. vegyészmérnök (20%), Senkariuk Vladimir oki. vegyész (10%), mindannyian Budapest A bejelentés napja: 1960. március 2. A nystatin, régébibi neve fungicidiin, a Squibb cég által előállított, myeostatin) patogen gombákra fungicid, ill. fungiszíatikus hatású antibiotikum, melyet gyógyászati célokra felhasználnak. Fermentálását és előállítását a 714189 sz. brit, a 2 797 183 sz. US szabadalom, valamint G. I. Kleiner és V. Ja. Lazdin cikke (Medicinszkaja Promislenoszty SZSZSZR, 1959. év. 9. sz. 21—3. oldal) ismertetik. A nystatint a fermentáció befejeztével a micélium tartalmazza, úgyhogy a micélium kiszűrése után az erjesztéses oldat elönthető. Az antibiotikum előállításának legegyszerűbb módja a nedves vagy szárított micélium extrakciója vizes vagy vízmentes alkoholokkal. A megszárított micélium extrakciója a célszerűbb, mert lényegesen (kb. 50%-kal) jobb termelést biztosít, mint a nedves micélium feldolgozása. A víz ilyen esetekben a micéliumfoól egyébként azeotróp desztillációs úton is eltávolítható. A nystatin mint konjugált kettőskötéseket tartalmazó polien vegyület levegő hatására bomlik a: New and Nonofficial Remedies- (J. B. Lippiraeott Co., Philadelphia and Montreal, 1957.)-ben foglaltak alapján. G. L. Kleiner és munkatársa ezért az; antibiotikumot tartalmazó micéliumot extrakció előtt 50—60 C°-on vákuumban, szárítják 10—15 mm nyomáson. A 2 832 719 sz. US szabadalomban foglalt eljárás szerint pedig a kész nystatint is vákuumban szárítják 30 C°-on. A 809 10)5 sz. brit szabadalmi leírás értelmében ugyancsak védik a kész nystatint az oxidációtól. Meglepő módon azt tapasztaltuk, hogy a micélium nemcsak vákuumban, hanem levegőn, sőt levegőbefúvásos szárító berendezésekben is jól szárítható magasabb, pl. 50—60 C°-on is, amikor is a vákuumszárításos eljárással kapott eredményekhez hasonló hatóértékű száraz micéliumhoz jutunk. A szárítás ideje 16—24 óra. Ez a felismerés lehetővé teszi, hogy ipari méretekben könynyen előállítható száraz micéliumhoz jussunk és azt jó hozammal dolgozzuk fel nystatinra. Nemcsak a micélium szárításánál, hanem kipreparált víznedves, vagy acetonos nystatin 10— 40 C0-on történő levegőbefúvásos szárításánál is azt tapasztaltuk, hogy a kb. 10 órás szárítási periódus alatt nem lépett fel olyan biológiai aktivitásesökkentés, mely a biológiai értékmérési módszerrel kimutatható volna. Felismerésünk alapján nedves micélium és a nedves nystatin szárításához szükséges időtartain és hőfok mellett nem lép fel oxidáció, ami az antibiotikum biológiai aktivitását csökkentené, illetőleg eredeti ultraibolya elnyelési színképét megváltoztatná. A találmány értelmében a fermentálás befejeztével az erjesztéses oldattól elkülönített micéliumot levegő jelenlétében célszerűen áramló levegővel előnyösen 30—60 C°-on megszárítjuk és a száraz micéliumból a nystatint önmagában ismert módon pl. alkohollal kivonatoljuk. Kleiner és munkatársa a micéliumot szárítás után közvetlenül extrahálják metanollal. Ez a módszer kísérleteink szerint a nálunk használatos fermentációs táptalaj összetétele folytán legtöbbször nem jár kielégítő eredménnyel. A szűrt micélium ugyanis felületén nagyobb mennyiségű növényi olajat tartalmaz, melyet előzőleg a fermentációhoz adagoltak. Ez az olaj a szárított micéliumról a metanolos extrakció folyamán a nystatinnal együtt leoldódik
