147613. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 11 alfa-oxiszteroidok előállítására

4 147.613 7. példa: Az 1. példa szerinti módon dolgozva 100 mg Reichstein-féle S-anyagot Fusarium redolens Wollenweber (2087) kultúrájával kezelünk. Kb. 24 órai fermentáció után csaknem mennyiségi termeléssel 1 l-epi-hidrokortizofn képződik. 8. példa: Az 1. példa szerinti módon hajtjuk végre a kísérletet, de Fusarium culmorum Saccardo (2095) kultúrájával. 24 órai fermentáció után (ebbe az időbe a kultúra inkubációs ideje nincsen beleszámítva) jó termelési hányaddal keletkezik a 11-epi-hidrokortizon. 9. példa: Az 1. példa szerinti módon elkészítjük a 2082 sz. törzs [Fusarium equiseti Saccardo var. bullaturri (Sherbakoff) Wollenweber] rázott kultúráját, majd 24 órai inkubáció után 100 mg 6-dehidro-Reichstein-S-anyag 4 ml metanollal készített oldatát adjuk hozzá. További 24 óra múlva a papírkromatográfiai vizsgálat azt mutatja, hogy a kiinduló anyag mennyiségileg átalakult 6-dehidro-ll-epi-hidrokortizonná. 10. példa: Az 1. példa szerinti módon hajtjuk végre a kísérletet a 2083 sz. törzs [Fusarium equiseti Saccardo var. bulla tum (Sherbakoff) Wollenweber] kultúrájával. 100 mg Reichstein-féle' S-anyag-21--acetátból 48 órai fermentáció után jó termelési hányaddal kapunk 11-epi-hidrokortizont. 11. példa: 1 g 11-epi-prednizolont 5 ml piridinben oldunk, 0,29 g ecetsavanbídridet adunk hozzá, majd az oldatot 20 óra hosszat hagyjuk állni szobahőmérsékleten. Ezután az elegyet vízbe öntjük és kloroformmal háromszor kirázzuk. A kloroformos ol- . datot hígított kénsavval rázzuk, majd nátriumhidrogénkarbonátoldattal és vízzel semlegesre mossuk és vákuumban bepároljuk. A 11-epi-prednizolon 21-acetátját kapjuk, üvegszerű megjelenésű, nem kristályosodó amorf anyag alakjában. Termelés 0,97 g. Annak kimutatása, hogy valóban a kívánt anyagot kaptuk, krómsav és piridin elegyével való oxidáció útján, önmagában ismert módon történhet. Így 70%-os termelési Mnyaddal keletkezik prednizonacetát, amely hiteles anyaggal való összehasonlítás útján azonosítható. 12. példa: 1 g 6-dehidro-ll-epi-kortizolt 250 ml dioxánban oldunk, 0,23 ml piridint, valamint 0,30 ml (kb. 50%-os felesleg) aeetilkloridot adunk hozzá, majd éjszakán át szobahőmérsékleten állni hagyjuk. Az oldószer főtömegét vákuumban lehajtjuk és, a maradékot kloroformmal felvesszük. A kloroformos oldatot hígított kénsavval rázzuk, majd nátriumhidrogénkarbonátoldattal és vízzel semlegesre mossuk. Az oldatot szárítjuk, majd vákuumban bepárpljuk, amifcoris nem kristályosítható maradék alakjában kapjuk a 21-acetátot. Termelés 0,91 g. Piridin és krómsav elegyével való oxidáció útján a 11. példában leírt módhoz hasonlóan itt az ismert 6-dehidrokortizo;nacetátot kapjuk, ami bizonyítja, hogy az amorf acetilezési termék azonos a kívánt 6-dehidro-ll-epi-kortizol-21-acetáttal. 13. példa: 6-dehidro-l 1-epi-prednizolont a 11. példával analog módon megacetilezünk a 21-helyzetben. Ez az acetát is nem kristályosodó termék alakjában nyerhető ki. A termék az ismert 6-dehidro-prednizonacetáttá való oxidáció útján (vö. 11. példa) azonosítható. Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás (I) általános képletű lla-oxi-szteroidok CH9OR = 0 OH (I) előállítására — amelyek az 1- és/vagy 6-helyzetben telítetlenek is lehetnek és amelyek képletében az R hidrogénatomot vagy acetilcsoportot jelent — azzal jellemezve, hogy (II) általános képletű vegyületeket CH2

OR c = o .OH / O (II) — amelyek az 1 és/vagy 6-thelyzetben telítetlenek is lehetnek és amelyek képletében az R jelentése azonos a fentebbével — a Fusarium gombafai Discolor és/vagy Gifobosum és/vagy Elegans-Oxysporum fajtáiba (szekcióiba) tartozó gombákkal vagy az ilyen gombákból kinyerhető oxidáló enzimekkel kezelünk, az ily módon előállított 11»-oxi-szteroidokat a reakcióelegyből — előnyösein extrakcíó útján — elkülönítjük, majd esetleg is-, mert módon a megfelelő 21-acetáttá alakítjuk át. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás kiviteli módja, azzal jellemezve, hogy a llff-hidroxilcsoportnák a (II) képletű szteroidok molekulájába való bevite-