146379. lajstromszámú szabadalom • Bioszintetikus eljárás etiokobalamin-karbonsavak B12 vitaminná való átalakítására

ő Megjelent: 1960. március 15. ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS 146.379. SZÁM 12. p. 11—17. OSZTÁLY — RI-188. ALAPSZÁM SZOLGALATI TALÄLMÄNY Bioszintetikus eljárás etiokobalamin-karbonsavak B12 vitaminná Való átalakítására Richter Gedeon Vegyészeti Gyár Bt., Budapest Feltalálók: Dr. Cserey-Pechány Éva orvos, mikrobiológus, dr. Molnár Béla kutatóvegyész, Somkuti Erzsébet mikrobiológus, mindhárman budapesti lakosok A bejelentés napja: 1958. március 27. A B12 vitamin iporfirinszerű vázból és hozzá­kapcsolódó 5,6-dimetilbenzimidazoJ bázist tartal­mazó nukleotidból áH. A B]2 vitaminszerű ve­gyületek osztályozásánál inkomplet kobalaminnak, vagy etiokobalaminnak nevezitek a nukleotid nél­küli részit (első elnevezése szerint B-faktort), eh­hez különböző nukieotidokat kapcsolva nyerjük a kompiét kobalaminokat, melyek a nulkleotid-bázis mineműsége szerint igen sokfélék lehetnek (B12 vitamin, faktor A, pseudovitamin B12, stb.). Az etiokobalamin-rész amidált karboxil-csoportokat tartalmaz, ezek parciális hidrolizissel dezamidál­hatók, tehát mind a komplet, mind az inkornplet kobalaiminok esetében szabad karboxil-csoportokat tartalmazó módosulatok, kobalamin vagy etio­kobalamin-karbbnsavak jöhetnek létre. (1, 2). A karbonsav tartalmú faktorok közös jellem­zője, hogy a B12 vitamin kioldására használt oldó­szereikkel (pl. benzilaikoholäal, fenolkloroformmal), alkalikus vizes közegből nem oldhatók ki. Irodalmi adatok szerint szabad karboxil csoportjuk szinte­tikus úton amidálható, amikor a megfelelő komp­let vagy inkomplet kobaüiamin képződik. (2). Az etiokobalamin -f- nukleotid kötődés szintetikus úton létre nem hozható, etiokdbalaminból tehát kémiai úton komplet kobalamint előállítani ez ideig nem sikerült. A B12 vitamin értékmeghatározásánál alkalma­zott Davis-féle E. Coli mutans az etiokobalamint növekedéséhez fel tudja használni, ez Ford, Kon és Porter kísérletei szerint (3) annak átalakítása útján történik. Több szerzőnek sikerült később akár Coli mutans, akár vad Coli törzsekkel az etiokobalaminiból különböző benzimidazol- és ade­nin-bázisok jelenlétében a Bj2 vitamint, vagy a megfelelő nukleotidot tartalmazó más származékot előállítani. (4, 5, 6, 7.) Ilyen bioszintetikus eljárásokat ismertetnek a 945 648, 948 734 és 1 017 424 számú német szaba­dalmi leírások, melyek az etiokobalaminnak — a leírásokban vitamin B12 Faktor I.-nek — átala­kítására vonatkoznak E. Coli baktériumtörzsekkel 5-6-dimetilbenzimidazól, benzimidazol, naftimid­azol, ill. ezek megfelelő származéka, vagy félter­méke jelenlétében. Az átalakítást fermentáció köziben, vagy az izolált, tömörített baktériumok­kal végzik, utóbbi esetben ribóz és foszfátpuffer hozzáadásával. Az idézett szabadalmi leírások pél­dái szerint az elérhető maximális B12 szint fer­mentációnál 59 gamima/liter fermentlé,, kiülepített baktériumokkal pedig a kinyerhető B12 vitamin mennyisége 166 gamma/liter. (7) Az etiokobalaminnak kamplet kobaiaminná tör­ténő fermentációs átalakítására újabb batotérium­fajta használatának a lehetőségét mutatja a Pro­pionbakterium Shermianii fermentáció. Lengyel szerzők megállapítottak (8), hogy a fermentáció melléktenmékeként nagy mennyiségű etiokobala­min keletkezik, de a fermentációhoz 5—6 dimetil­beínzimidazolt adva, a baktériumok az etiokobal­amin helyett is B12 vitamint képeznek. Ez a je­lenség ugyan nem bizonyítja, de mindenesetre valószínősíti azt, hogy a Propionbakterium Sher­manii a fermentációhoz külön hozzáadott etio­kobalamint — bizonyos határon belül — nuk­leotid ráépítéssel komplet «kobaiaminná tudja ala­kítani. Ez újabb fejlődést jelent az idézett német szabadalmi leírásokban ismertetett eljárásokhoz képest, mert a Propionbaktériummal elérhető fer­mentációs szintek a Coli baktériuménál lényege­sen magasabbak és elérik az ipari alkalmazható­ság gazdaságosságát. Az etiokobalamin-karfbonsavak reszintézisére ez ideig a szintetikus úton való amidóláson (2) kí­vül más irodalmi utalás nincs. Biológiai módsze­reik alkalmazhatóságának inkább ellentmondanak az eddigi tapasztalatok. A Davis-féle E. Coli mutans az etiokobalatminra azért érzékeny, mert számára felhasználható köimplet kobaiaminná tudja alakítani. A karbonsav származékok ezzel szemben — legyen az akár komplet, akár etio-

Next

/
Thumbnails
Contents