145993. lajstromszámú szabadalom • Eljárás nukleinsav-bázisok és származékaik ribozidjainak és dezoxi-ribozidjainak előállítására
o Megjelent: 1960. február 15. ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS 145.993. SZÄM 12. p. 6—10. OSZTÁLY — SO—601. ALAPSZÁM Eljárás nukleinsav-bázisok és származékaik ribozidjainak és dezoxi-ribozidjainak előállítására SPOFA, spojené farmaceutické závody, národni podnik, Praha, Csehszlovákia Feltalálók: Skoda Jan mérnök, dr. Hess Vilém orvos és Sorm Frantisek akadémikus, prahai lakosok A bejelentés napja: 1958. január 21. Csehszlovákiai elsőbbsége: 1957. február 28. diihidrogén-kálium-ortöfoszfát 816 g dinátrium^hidrogén-ortofoszfát 8595 g Ezt a fermentációs közeget az alábbi inokulum 1%-nyi mennyiségével -oiltjük be: Escherichia coli ugyanilyen összetételű táptalajon nevelt 24 órás kultúrája. 6 órai inkubáció után 6-azauracil steril oldatának , oly mennyiségét adjuk hozzá, hogy a 6-azauraeilniak az egész fermentációs lére számított koncentrációja 7,10~4 mól legyen. Ezután a fermentációt további 5—15 óra hosszat folytatjuk, 37 C° hőmérsékleten, keverés és szellőzés nélkül. Utána a fermentációs levet vízzel lehűtjük és a baktériumokat ceritrifugálás útján elkülönítjük, A fermentáció során képződött 6-azauraeilribozidot aktívszenet tartalmazó oszlopon adszorbeáltátjuk, majd 1% ammóniát tartalmazó 50%-os vizes etanollal eluáljuk az oszlopról. Az eluátumot bepároljuk, .majd a maradiakból a tiszta, terméket vízzel telített butanolfoól való átkristályosítással vagy cellulóz-oszlopon való kcomatografálással nyerjük ki. A 6-azauraeilra számítva 90%-ot meghaladó temmelési hányadot kapunk. A tiszta termék 160—161 C° hőmérsékleten olvad. Más hasonló jellegű bázisok ribozidjaiésdezoxiribozidjai ugyanilyen módon állíthatók elő. Szabadalmi igénypont: Eljárás nukleinsav-bázisok és származékaik ribozidj;ainak és dezoxiribozidjainak, különösen pedig 6-azauracil-rilbozidnak az előállítására, amelyre jellemző, hogy a nukleinsav-bázist vagy származékát valamely erre alkalmas mikroorganizmus, mint pl. Escherichia coli fermentációs kultúrája hatásának tesszük ki, majd a terméket a tiszta fermentációs léből valamely adszorbeáló anyagra történő adszorpció útján nyerjük ki. A kiadásért felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója A nukleinsav-bázisok és származékaik ribozidjai, mint pl. a 6-azauracál-ribozid és a 6-os helyzetben helyettesített 6-azauracil-származékok ribozidjai értékes kanicerosztatifcus és bakteriosztatikus tulajdonságokat mutatnák. 'Egyesek e vegyületek közül leukémia-ellenes hatással is rendelkeznek. A jelen találmány tárgyát az említett bázisok ribozidjainak és dezoxiribozidjainak 'biokémiai szintézise képezi. A találmány értelmében a nukleinsav-bázist, vagy ennek valamely származékát, elsősorban a 6-azauracilt valamely erre alkalmas mikroorganizmus, pl. Escherichia coli fermentációs kultúrájának tesszük ki, majd a imikroorganlizmus eltávolítása után a terméket aktívszénen vagy más adszorbeáló anyagon való adszorpció útján különítjük el a fermentációs léből. Az eljárás könnyen lefolytatható a fermentációs ipar szokásos készülékeiben;. Az eljárás igen egyszerű, lefolyása analitikai módszerekkel könnyen ellenőrizhető. A nukleinsav-toázisra számított termelési hányadok csaknem az elméleti értékeket érik el. A találmány szerinti eljárás kiviteli módját az alábbi példa szemlélteti. Példa: 300 liter fermentációs közeget állítunk elő a következő módon: 1080 g glükózt oldunk 5 liter vízben, majd a sterilizált »oldatot aszeptikus körülmények között hozzáadjuk a Vizes oldat főrészéhez, amely az alábbi anyagokat tartalmazza: ammóniumszulfát 792 g natriumklorid 174 g magnéziumszulfát (krist.) 72 g kalciiumklorid (krist.) 3 g vas (Il)-szulfát (kirist.) 4,5 g 5!)4184. Terv Nyomda, Budapest V., Balassi Bálint utca 21-23.
