145409. lajstromszámú szabadalom • Eljárás rutin kivonatolására japánakác részeiből

c' Megjelent: 1959. november 15. ORSZÁGOS TALÁLMANYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS 145.409. SZÁM 12. o. 5-10. OSZTÁLY — AA-339. ALAPSZÁM Eljárás rutin kivonatolására japánakác részeiből ALKALOIDA Vegyészeti Gyár, Tiszavasvári Feltalálók: Dr. Bognár Rezső egyetemi tanár, Szabó Vince tudományos munkatárs, és Farkas Istvánné egyetemi tanársegéd, mindhárman debreceni lakosok A bejelentés napja: 1957. július 23. Ismeretes, hogy a japánakác (Sophora Japonica L.) részei, különösen a virág bimbói, továbbá virágja, nagymennyiségű rutint tartalmaz. A rutin kivonatolására javasoltak nátriumhidroxid és bórsav tartalmú vizes oldatot. Ezekből az oldatokból a rutint savakkal, pl. kénsavval való rnegsavanyítással csapják ki, majd a nyers rutint átkristályosítják és tisztítják. A rutin mellett azonban egyéb flavonoidok és más szennyező anyagok, mint pl. csersav, klorofil is a kivonatba kerülnek, melyektől a rutint csak nehezen és körülményesen lehet megtisztítani. Ügy találtuk, hogy a fent említett rutinkivonat tisztítását nagymértékben megkönnyítjük, ha a lúgos bórsavat tartalmazó kivonatoló oldatot, mely a rutint komplex bórvegyület alakjában tartalmazza kationcserélő anyaggal, előnyösen hidrogénciklusban levő karboxil típusú kationcserélő műgyantával hozzuk össze. E kationcserélő műgyanta a komplex rutinbórvegyületet megbontja és a szennyező és színező anyagok jórészét megköti, de a rutint magát nem tartja vissza. Ez a tény meglepő, mert T. B. Gage és társai (Science 113b, 552, 1951.) közleménye értelmében a nyers rutin tisztítására karboxil típusú kationcserélő gyantát használnak, mellyel a rutint megkötik. Az ioncserélő gyantáról azután a rutint 20 rész izopropilalkohol és 80 rész víz elegyével eluálják. E közlemény szerint továbbá e kationcserélő gyanta a rutin sóit, pl. nátrium sóját is képes megkötni. A rutin előállítása során, melynél a japánakác részeit, különösen virágbimbóit, bórtartalmú lúgos vizes oldattal kivonatoljuk és a kapott kivonatban a bőrkomplexet megsavanyítással megbontjuk és az oldatból kivált rutint elkülönítjük, a találmány értelmében a kivonatban levő rutinbórkomplex megbontására hidrogén ciklusban levő kationcseréiő anyagot előnyösen karboxil típusú műgyantát használunk. A találmány értelmében továbbá a rutin kivonatolásához 8,5—11,0 előnyösen, 9—10,5 pH értékű puffer-hatású adalékot tartalmazó, bórtartalmú vizes oldatot használunk. A rutin tartalmú anyagot a rutinázenzim hatástalanítása céljából a kivonatolás előtt melegítjük, előnyösen gőzöljük. A találmány értelmében továbbá az ioncserélő műgyantával való •kezelés után kapott nyers rutinkristályokat azok tisztítása céljából alkoholban, előnyösen 1%-nál kisebb mennyiségű benzolt tartalmazó abszolút etilalkoholban oldjuk és cellulózzal, előnyösen olyan szulfit-cellulóz pehellyel tisztítjuk, melyet 10%-nál hígabb sósavban főztünk, majd semlegesre mostunk és szárítottunk. A cellulóz a klór of üt szelektíven abszorbeálja anélkül, hogy gyakorlatilag rutin veszteség adódna. A klorofil eltávolítására eddig szerves oldószereket alkalmaztak, melyeknek az alkalmazása körülményes és hosszadalmas műveleteket igényel. A találmány szerinti eljárás foganatosítására az alábbi példát adjuk: A kivonatolásra 5 tagból álló telepet használunk. Minden egyes kivonatoló készülék alul gőzbevezetéssel, lé- és drog-leengedő nyílással, felül pedig lébevezető nyílással van ellátva. Minden egyes kivonatoló készülékbe 1000 g durván darált 20,5% elemzett rutin tartalmú bimbót helyezünk és ezt mintegy 20 percig 100—110 C°-on gőzöljük, hogy a rutingáz enzimet hatástalanná tegyük és a drog sejtfalát fellazítsuk és így a kivonatolásra alkalmasabbá tegyük. Miután a bimbók hőmérséklete 30—40 C°-ra lehűlt, 5000 ml 9,9 pH-jú Michaelis-féle borát pufferoldatot öntünk hozzá. A Michaelis-féle borát pufferoldatot úgy készítjük, hogy 49,8 g bórsav és 400 ml mol NaOH elegyét 1 literre töltjük fel. 6 rész ilyen borát oldatot 4 rész 0,4 mólos NaOH oldattal elegyítjük, amikor is mintegy 9,9 pH-jú oldatot kapunk. Alkalmazható ugyanígy a 0,4 mólos Britton-Robinson féle univerzális puffer oldat is, 6 óra múlva az oldatot leengedjük és újabb borát puffer oldatot töltünk fel. Az 1. sz. kivonatoló készülékből leengedett kivonatból H ciklusban levő karboxyl típusú ioncserélő műgyantával kicsapjuk a rutint és csak a második felöntést vezetjük