144909. lajstromszámú szabadalom • Eljárás antibiotikumok előállítására fermentálással

144.909 5 9. példa 50 literes fakádban a következő összetételű vizes tápoldatot készítettük elő: Glukóz 2 % kukoricalekvár 0,5 % szójaliszt 1,5 % NaCl 0,4 % CaC03

0,5, % ammóniumszulfát 0,25% A tápoldatot 98 C°-on 35 percig főztük és a tenyésztési hőmérsékletre való lehűtés után beoltottuk 10%, 36 órás vegetatív inokulummal. A tenyésztést 27 C°-on állandó kavarás (percenként 210 fordulatszám) és szellőztetés (percenként 0,3—0,7 térfogat levegő) közben folytattuk le. Streptomicin-termelés a 90. órában: 1250 egység/ml. 10. példa Az eritromicint termelő Streptomyces erythreus első vegetatív generációját a szokásos csíramentes módon a következő összetételű vizes tápoldaitban készítettük elő: kukorioalekvár (100%-os 0,5 % glukóz 1 % ammóniumszulfát 0,35% NaCl 0,5 % CaC03

0,5 % A saját termelőgeneráció részére a következő összetételű vizes tápoldatot készítettük elő: kukoricalekvár (100%-os) 0,5 % keményítő 1,5 % hidrol 1 % ammóniumszuKát , 0,35% NaCl 0,5 % CaC03

0,5 % Ez utóbbi tápoldatot nem sterilizáltuk, hanem csupán 10 percig forraltuk és 50 C°-ra való lehűtés után 60 ml-s adagokban elosztottuk 500 ml-s nem^steril főzőlornibikokba. Minden lombikba a sterilizáló rendszabályok mellőzésével, pipettával hozzáadtunk 6—6 ml 30 órás vegetatív inokulumot, melyet a fent ismertetett módon készítettünk elő. A beoltott lombikokat nyitvahagytuk és rázógépen fermentáltuk. 70 órás fermentálás után a termelés ml/ként átlag 260 egység eritromicin volt. Az egyedi lombibikok termelése ml/ként 200 és 310 egység között ingadozott. Az ugyanilyen módon összeállított, azonban steril rendszabályok betartása mellett készített ellenőrző-tenyészetek átlagos termelése ml/ként 300 egység volt, mimellett az egyes lombikok termelése ml/ként 270 és 320 egység között ingadozott. 11. példa 100 literes fakádban a következő összetételű 50 liter vizes tápoldatot készítettük elő: kukoricalekvár (100%-os) 0,15% glukóz 3 % szójaliszt 2 % CaC03

0,6 % ammóniumszulfát 0,3 % nátriumklorid 0,25% A tápoldatot folytonos kavarás közben fűtőkígyó segélyével 30 percig 98 C°-ra melegítettük fel, majd hűtőkígyőval a tenyésztési hőmérsékletre lehűtöttük. A tápoldatot 10%, Streptomyces erythreus 30 órás vegetatív inokulumával oltottuk be, melyet a következő összetételű tápoldatban készítettünk elő: z szárított élesztő 0,5 % glukóz 3 % CaC03 0,6 % ammóniumszulfát 0,3 % nátriumklorid 0,25% a többi desztillált víz. Az inokulumot 29 C°-on állandó kavarás (percenként 250 fordulatszám) és szellőztetés (percenként 0,5 térfogat levegő) mellett tenyésztettük. A tenyésztés 10 liter térfogatú laboratóriumi tartályban, a szokásos steril módon folytattuk le. A termelőfermentálást a fakádban, 29 C°-on kavarás (percenként 160 fordulat) és szellőztetés (percenként 0,4—0,7 térfogat levegő) közben folytattuk le. 70 óra után elértük a 30° egység/ ml eritromicin-termelést. A tápoldatot a szokásos módon a tiszta készítményre dolgoztuk fel. 12. példa 500 ml-es lombikban laboratóriumi feltételek mellett rázógépen (percenként 98 lengés, lengések hossza 99 mm) 29 C°-on a következő öszszetételű tápoldatot fermentáltunk: szacharóz 3% kukoiricaJlíekvár B 55 1,5% ammóniumszulfát 0,2% OaC03

0,5% NaBr 0,5% a többi desztillált víz. A tápoldatot 60 ml/ként lombikokba elosztottuk. A tápoldatot az egyes lombikokba való elosztás után nem csiramentesítettük, hanem csupán 10 percig forraltuk és azután beoltottuk 5%, a tetraciklint termelő Streptomyces sp. törzs 30 órás vegetatív indkulumával. A lombikokat az egész fermentálás során nyitvahagytuk. Az átlagos termelés 70 óra után elérte a 720 garnma/ml értéket. A steril körülmények között fermentált ellenőrző sorozatban a 750 gamma/ml átlagos termelést értük el. Az egyedi, nem steril módon fermentált lombikok termelése 680 és 820 gamma/ml, a sterilen fermentált lombikoké 670 és 815 gamma/ml között ingadozott. 13. példa. 50 liter következő összetételű tápoldatot készítettünk elő: szaharóz 3% szójaliszt 1,7% NaCl 0,2% amimoniumszullfát 0,25% CaC03

0,5% kuikoricalekvár 0,6% a többi desztillált víz. Az oldat pH-ját a felforraiás előtt 20%-os kénsavval 5,9-re állítottuk be. A tápoldatot ka-