144626. lajstromszámú szabadalom • Eljárás antigen hatású anyag elleni különleges védőszer előállítására
144.626 3 héttel később. Borjazás után a tej minden injektált fajta elleni antitestre erős reakciót mutatott. VIII. példa. 3 ml vízben 90 mg-os adag standard variola vírust injektáltak a tehén egy tőgynegyedébe. Öt nappal később a tőgynegyedben reakcióval vírus növekedést mutattak ki. IX. példa. A vírus adagolás további illusztrálására 1 ml standard Herpes simplex-et injektáltak egy tehén tőgynegyedébe és az vírus elleni védőanyag képződést eredményezett. X. példa. 2 ml tojásfehérjét injektáltak egy tejelő tehén tőgynegyedébe. Az adagolás idején nem volt reakció és a preecipitin-próba negatív volt. 12 nappal később a tej erős precipitin-reakciót mutatott. A következő napon további 2 ml tojásfehérje injektálása ugyanazon tőgynegyedbe heves allergiás reakciót hozott létre. XI. példa. A kecskékben a védőanyag képződést úgy hozták létre, hogy naponta 1 ml Salmonella pullorum szuszpenziót injektáltak egy vemhes kecske csecsbimbó-vezetékébe. A naponkénti adagolást elles előtt több mint négy hónapon át végezték. Az antitest vagy védőanyag a pasteurizált tejben, kondenzált tejben, szárított tejben és a tejből izolált gamma globulinban tartósítható. A pasteurizálási hőmérsékletet gondosan ellenőrizni Kell. Normál pasteurizálás (vagyis 60 C" 3U percig) nincsen káros hatással a védőanyagra. Vigyázni kell, hogy a hőmérséklet hosszú időre ne emelkedjék. Például, ha a pasteurizálást 68 C°-nál végzik, a védőanyag a tejben felére csökken. A pasteurizált tej hűtését gyorsan kell végezni, hogy a védőanyag megmaradjon. A pasteurizálás az ismert „gyors" és ,.tartós" módszerekkel végezhető. A védőanyagot tartalmazó tej gondos hőmérséklet ellenőrzéssel kondenzálható. Az antitestet, vagy védőanyagot tartalmazó száraz tej nem kondenzált termékből előnyösebben készíthető. Azonban a kondenzált tej is használható, ha előzetesen a védőanyag elbomlásának elkerülésére alacsony hőmérsékleteknél gondosan kondenzálták. A szárítás porlasztó vagy hengeres szárító eljárásokkal megfelelően ellenőrzött feltételek mellett elvégezhető, hogy a védőanyag megmaradjon. A magas hőmérséklet önmagában nem romboló hatású a védőanyagra, kivéve, ha több percig tart. Így a tej olyan szárítóban porlasztható, amelyben a hőmérséklet 148,8—204,4 C°-ot ér el, azonban a tej ezen a hőmérsékleten csak egy pillanatig van. A Proliferating vírus két lépcsős műveletben juttatható a tőgybe. Az első beoltást normál módon végzik. A második beoltást azután az elsőből nyert tejben végzik, a kísérő szövet-antigéneket hígítással eltávolítva. Ezt a vizsgálati eljárást a következőkben ismertetjük: XII. példa. Egy tehén csecsbimbó-vezetékeibe egér agy szuszpenzióban Herpes simplex vírust injektáltak. A tehén tejelő volt, és azután is szabályosan tejelt. A következő: napon a tej pozitív Whitesidepróbát mutatott. 'A beoltás követő második napon a tejet egy szárazon álló tehén tőgyébe injektáltatták, csecsbimbó-csatornán át. Eredményképpen a vírus átjutott az egéragy antigen nélkül. A védőanyag alkalmazása Az antitest, vagy védőanyag, amely e találmány terméke, számos úton hasznosítható. Felfedezték, hogy a védőanyag vagy antitest abszorbeálódott a rendszerben, a stimulált tőgyből származó tej fogyasztása vagy fehérje oldás által történő bejuttatása útján. Az elkülönített és elválasztott védőanyag szájon át, végbélen át, parenterálisan és lokálisan juttatható a szervezetbe. A védőanyag emberek és más állatok immunizálásában és kezelésében hasznosítható: A találmány szerinti védőanyag alkalmazását a következő példák mutatják: XIII. példa. ' A kísérleti alany négy felnőtt ember volt. A védőanyagot rendszerint az I. példa szerint állították elő és a nyert tej Salmonella pullorum baktérium elleni antitestet tartalmazott. Mindegyik alany a tej fogyasztása előtt agglutinációs próbára negatív volt. A kísérleti alanyok kb. i/ 2 —1 litert fogyasztottak, a védőanyagot tartalmazó tejből. Mindegyik abszorbeálta az antitestet, emésztő traktusából a véráramába, mint azt az aglutinációs próbával megállapították. Az egyik kísérleti alanynál, amelyik naponta egy liter tejet fogyasztott, 10-szeres mértékű agglutinációs minősítés fejlődött ki a vérben. XIV. példa. A Salmonella pullorum elleni védőanyagot szárnyasoknál is alkalmazták. A kísérleti alany hat fejlett csirke volt, mindegyik a Salmonella antitest vizsgálatra negatív. A védőanyagot tartalmazó tej betáplálása után mindegyik csirkénél erős pozitív reakció fejlődött ki. XV. példa. A találmány szerinti védőanyag további alkalmazását csirkéken vizsgálták ki és a védő ágens által nyújtott pozitív védelmet tapasztaltatták. 20 napos csirkéket egy 10-es kísérleti és egy 10-es kontroll csoportra osztották. A kísérleti csirkéket az e találmány szerint előállított Salomnella pullorum elleni magas minősítésű (1:1000) tejjel táplálták. A Salmonella pullorum csirke-betegséget okoz. A kontroll csirkéket ilyen sajátos antitestet nem tartalmazó tejjel táplálták. A kísérlet első napján mindkét csoportot intracardiálisan élő Salmonella pullorum kultúrával oltották be. A kontrollok halálozása nagy volt, -az ötödik csirke a 24. órában döglött meg, míg a kísérleti csoportban az ötödik csupán 120 óra múlva döglött meg. A kontrollcsoport csirkéinek átlagos egészségi állapota igen rossz volt a kísérleti csoport csirkéihez képest. Ez a védőanyag igen szigorú vizsgálata, mivel a szervezeteket közvetlenül a kísérleti alanyok szívébe injektálták, ami az átvitelnek olyan módja, amivel rendesen nem találkozunk. A csirke, mint fajta, igen különbözik a tehéntől. Mégis a tehénben képződött védőanyag a tejjel könnyen átvihető a csirkék vérkeringésébe az emésztő traktuson át történő abszorbció által.