144198. lajstromszámú szabadalom • Eljárás pepszin előállítására

2 144.198 oldható egyéb alumíniumsók is, előnyösen 0,5-— 1%-os végkoncentrációban. Érdekesnek tartjuk megjegyezni, hogy bár a 2 567 378. sz. amerikai leírás a kationos pepszinogén leválasztást ismerteti vizesoldószeres közegben, megállapítottuk, hogy a leírásban megnevezett kationos fehérje-kicsapószerek a pepszinogént vizes oldatából nem csapják ki, a savas kicsapószerek pedig a kicsapódó pepszinogént többé-kevésbé denaturálják is. Az alábbiakban a találmány részleteinek szemléletesére példákat közlünk. A részletezett kiviteli intézkedések megváltoztatása nem érinti a találmány lényegét — a gyomornyálkahártyának szobahőmérsékleten vízzel való benső kivonatolását és a pepszinogénnek a vizes oldatból alumínium-iónnal történő leválasztását, így pl. a kivonatolás történhet híg elektrolit oldatokkal (NaCl) 5—8 pH között végzett kikeveréssel, préseléssel, vagy akár a kettő kombinálásával is. Az eljárás nyeredéke természetesen a szerv minőségének, őrlési finomságának, valamint a kivonatolás alaposságának függvénye. 1. Példa. 5 kg pilorusztól megszabadított sertés-gyomornyálkahártya finom pépjét 20 1 szobahőmérsékletű vízzel 5 órán át állandó lassú keverés közben kivonatolunk. Az elegy pH-értéke 6—7 között van. Kikeverés után a vizes oldatot a szervmaradékról leszivatjuk. A kikeverést adott esetben megismételhetjük. A vizes extraktot ezután 20 tf % benzinnel kirázva zsírtalanítjuk. A zsír oldószeres kezelés után kapott opálos, de lebegő részektől mentes vizes oldatból 5 tf% 5%-os vizes alumínium-szulfát oldattal leválasztjuk a pepszinogént alumínium-vegyülete alakjában. A centrifugálással összegyűjtött csapadékot ezután sósavas oldatban (pH 1—3) oldjuk, amikor is a pepszinogén pepszinné konvertálódik, majd az; oldatot a zsírnyomok eltávolítására 2 tf % benzinnel újra kirázzuk, elválasztjuk és a vizes részt Seitz szűrőn átszűrjük. Az így kapott kristálytiszta vizes szűrlet-'' bői a pepszint literenként 700 g ammoniumszulfáttal kisózzuk, ülepedés után a csapadékot elkülönítjük, majd vákuum exszikkátorban 35—40 C°-on megszárítjuk. Kitermelés 50—60 g Ph. Hg. V. szerint vizsgálva 1:2000-szeres erősségű, vízben jól oldódó pépszín. 2. Példa. Az előző példa szerint készült alumíniumpepszinogenátot 5 1 desztillált vízben szuszpendáljuk és 500 g hidrogén ciklusban lévő, erősen A kiadásért felel: a Közgazdasál 2657. Terv Nyomda, 1958. - F( savas kationcserélő gyantával néhány órán át keverjük. A pepszinogén pepszinné alakul át. A gyantáról és az oldhatatlan maradékról leszűrt vizes oldatot ezután porlasztott vagy fagyasztott állapotban megszárítjuk. 3. Példa. Az első példa szerint ammonium-szulfáttal kisózott pepszint megszárítás előtt desztillált víz— ben felodjuk és áramló desztillált vízzel szemben dializáljuk. A dializált oldatot liofilizálva 1:10 000-szeres erősségű pepszint kapunk. 4. Példa. Az első példa szerint ammoniumszulfáttal kisózott csapadékot a megszárítás előtt desztillált vízben feloldjuk, majd erősen savas kationcserélő gyantával az NH4 és alumínium-iónokat H-iónra cseréljük ki, majd ezután gyengén bázisos gyantával a SCh-iónokat OH-iónokra cseréljük úgy, hogy az oldat pH-ja 2 maradjon. A kapott oldat megszárításával minimális sótartalmú pepszint nyerünk. Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás pepszin előállítására gyomornyálkahártya vizes extrakciós levéből izolált pepszinogén konvertálása útján, azzal jellemezve, hogy a szobahőmérsékleten nyert vizes kivonatoldatból a pepszinogént alumínium-iónnal leválasztjuk és a kapott alumínium-pepszinogenátból a pepszint önmagában ismert módon előállítjuk. 2. Az 1. igénypont alatti eljárás kiviteli módja, melyre; jellemző, hogy a szerv kivonatolását '5—8 pH-érték között híg elektrolittal végezzük. 3. Az 1—2. igénypont szerinti eljárás kiviteli módja, melyre jellemző, hogy a kivonatoldatból a pepszinogént aluimíniumszulfáttal választjuk le. 4. Az 1—3. igénypont szerinti eljárás kiviteli módja, melyre jellemző, hogy a pepszinogén alumínium-vegyületét hidrogén ciklusban levő erősen savas kationcserélő műgyantával pepszinné alakítjuk s a kapott pepszinoldatból az enzimet porlasztott vagy fagyasztott állapotban végzett szárítással izoláljuk. 5. Az. 1—3. igénypontok bármelyike szerinti eljárási kiviteli módja, azzal jellemezve, hogy a kisózás útján nyert pepszin vizes oldatát anion és kationcser élő műgyantán iontalanítjuk és az iontalanított oldatból a pepszint porlasztott vagy fagyasztott állapotban végzett szárítással izoláljuk. ;i és Jogi Könyvkiadó igazgatója lelős vezető: Gajda László