144197. lajstromszámú szabadalom • Eljárás B12-vitamin tartalmú oldatok tisztítására

2 144.197 oldható vegyületeinek segítségével, a gyakorlatban azonban legcélszerűbben az ólom válik be, amit előnyösen ólomaoetát alakjában alkalmazhatunk. Az ólom azért is különösen alkalmas, mert gyorsan és jól ülepedő csapadék formájában választja le a kolloidokat és a többi fémsóhoz képest kisebb mennyiségre van szükség belőle. Az ólomsóval történő derítés után, hacsak nem alkalmazzuk ezt igen nagy feleslegbeni a már tiszta oldat, állás közben, néha magától ismét kissé megzavarodik. Ezt a jelenséget úgy tudjuk elkerülni, ha az ólomsó után alumíniumszulfátot is adagolunk.az elegyhez, mert így jól ülepedő csapadék mellett maradandóan tükrös oldatot kapunk. Az alumíniumszulfát magában is alkalmas a derítésre, de egyedül alkalmazva, a kívánt effektus elérésére lényegesen nagyobb mennyiségre van szükség, mint amennyi az ólommal együtt szükséges és emellett a képződött csapadék voluminózus és nehezen tömörülő. Lényeges eleme a találmánynak, hogy a derítést lúgos közegben folytatjuk le, ill. fejezzük be, miáltal a tisztulás hatóanyagban való kimutatható veszteség nélkül jön létre. A találmány szerinti derítés elvégzése után a Bi2-vitamin tartalmú oldat minden további nélkül alkalmas továbbtisztítására. Példa: 70 1 vizes iszapkivonatból a hatóanyagot 500 g fuller földre pH 2 mellett kiadszorbeáltatjuk és erről a hatóanyagot alkalicianid jelenlétében 7 1 66%-os ammóniával meglúgosított alkohollal leoldjuk. Az alkoholos eluátumot semlegesítés után vákuumban besűrítjük és a térfogatát 1 l-re egészítjük ki. Az így nyert vizes oldat barnás színű, zavaros, szűréssel és cen.tr if ugálással nem tisztítható, továbbfeldolgozását a kolloid szennyeződések lehetetlenné teszik. Hatóanyagtartalma közvetlen méréssel (coli lemezes módszer) 10* gamma/ml Bi2~vitaimin (= 10 mg/ liter), elektroforetikus elválasztással kombinált mérés eredménye 4,76 gamma/ml B12 = 4,76 mg/liter). Ehhez az oldathoz állandó keverés közben, vékony sugárban hozzáfolyatunk 300 ml 3,3%os ólomacetát oldatot, majd ezt követően 100 ml 5%-os alumíniumszulfát oldatot. Az elegy 5,6 pH-ig besavanyodott, ezért hozzáadunk 10 ml 10%-os NaCN-oldatot és a pH-t 30%-os NaOH-dal 8,5-re állítjuk, A keverést folytatva, az elegyet 40 C°-ig felmelegítjük. A csapadék összeáll és szépen ülepedik, fölötte tükrösen tiszta szuper na tans marad. Dekantálás, ill. centrifugálás után a tömörített csapadékot kimossuk, hogy a hatóanyagveszteséget elkerüljük. Ezért a csapadékot 200 ml vízben felszuszpendáljuk, hozzáadunk 60 ml 3,3%-os ólomacetát és 20 ml 5%-os Al-szulfát és 2 ml 10%-os NaCN oldatot, majd a pH-t Na-lúggal 8,5-re állítjuk be. Keverés és 40 C°-ra történő felmelegítés után az elegyet ülepedni hagyjuk, ill. centrifugáljuk A kiadásért felel a Közgazdasá és a szuszpernatanst a derített lével egyesítjük. Nyertünk 1630 ml vörösbarna tiszta oldatot, melynek hatóanyagtartalma közvetlen méréssel 5,85 gamma/ml (= összesen 9,535 mg/liter, azaz 95%-a a kiind. anyagnak), elektroforetikus elválasztás után 2,75 gamma/ml (összesen 4,48 mg/liter, azaz 94%-a a kiindulási anyagnak). A találmány szerint derített oldatból 4 g aktív szénnel kiadszorbeáljuk a hatóanyagot,, az adszorpció, szűrés és kimosás gyorsan és jól elvégezhető. A szenet 66%-os alkohollal1

melegen eluáljuk. 225 ml olyan alkoholos oldatot kapunk, melynek Bi2-vitamin tartalma közvetlen méréssel 42,5 gamma/ml (összesen 9,562 mg), elektraforétikus elválasztás után 16,25 gamma/ ml (ossz, 3,655 mg). 2. példa: 400 ml semleges pH-értékre beállított olyan Bi2-vitamin koncentrátumot, amelyet terramicin fermentáció levéből nyertünk a hatóanyagnak fullerföldre vagy ióncserélő műgyantára (Amberlite IRC 50) való adszorbeáltatásával, majd arról poláros oldószerrel való leoldásaval és bepárlásával, állandó keverés közben 60 ml 3,3%-os vizes ólomacetátoldattal, majd 50 ml 5%-os vizes alumíniumszulfátoldattal, végül 3 ml 10%-os nátriumcianidoldattal elegyítünk, Az elegy pH-ját nátronlúg hozzáadásával 8—8,2 közé állítjuk és vízfürdőn 50 C°-ra melegítjük. Dús, könnyen ülepedő, pelyhes csapadék válik le, melyet ülepítés után centrifugálással vagy szűréssel elkülönítünk. A csapadékot az 1. példa szerint eljárva kimossuk és a mosófolyadékot a derített oldattal egyesítjük. 590 ml vöröses színű, tükrösen tiszta oldatot nyerünk, az eredetileg fekete, átlátszatlan oldatból, amely gyakorlatilag a teljes kiindulási hatóanyagot tartalmazza és a szokott módokon emulzióképződés nélkül kristályos B12 vitaminná feldolgozható. Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás oldószeres bepárolás után visszamaradó vizes Biä-vitamin sűrítményeinek kolloid szennyeződésektől való mentesítésére, azzal jellemezve, hogy a kolloid szennyeződéseket az L, II. vagy III. osztályba tartozó kationok vízoldható vegyületeivel választjuk le. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás kiviteli módja, azzal jellemezve, hogy a művelet közben vagy végén az elegy pH-értékét alkalikusra (pH 7—10) toljuk el. 3. Az 1—2. igénypont szerinti eljárás kiviteli módja, azzal jellemezve, hogy a kolloid szenynyezéseket vízben oldható ólomvegyülettel, célszerűen ólomacetáttal választjuk le. 4. Az 1—2. igénypont szerinti eljárás kiviteli módja, azzal jellemezve, hogy a kolloidokat vízben oldható alumíniumvegyülettel, célszerűen alumíniumszulfáttal választjuk le. 5. A 3—4. igénypont szerinti eljárás kiviteli módja, azzal jellemezve, hogy az ólom- és alumínium-sóoldatokat egymás után alkalmazzuk. 1 és Jogi Könyvkiadó igazgatója, 2657. Terv Nyomda, 1958. — Felelős vezető: Gajda László