143376. lajstromszámú szabadalom • Eljárás riboflavin mikrobiológiai úton való készítésére
2 143.376 Hőmérséklet: 22—24 C°. Az inkubáció időtartama az RP változástól függően 8—10 nap volt. A riboflavin izolálásánál a quantitativ meghatározásnál ismeretes elvek szerint jártunk el, úgy, hogy a riboflavint savanyú közegben terra silica oszlopon adsorbeáltuk, majd ethanol-piridin-ecetsav (3:1:1) eleggyel eluáltuk. Az eluátumot vacuumban 40°-on bepároltuk és a kapott maradékot híg ecetsavból átkristályosítottuk. Ily módon a kolorimetriás eljárással kimutatott mennyiségének 70—80%-át tudtuk kristályos állapotban elkülöníteni. Amint már előbb közöltük, a mikroorganizmusok anyagcseretermékeinek a táptalajba történő diffúziója akkor indul meg, amikor a tenyészet RP-ja emelkedik. Az általunk vizsgált tenyészeteknél ez a harmadik napon következett be. Az RP-görbe emelkedésével a riboflavin termelése is emelkedik mindaddig, amíg az RP változás meg nem szűnik. Ekkor a ribaflavin mennyisége szintén változatlan marad. Kísérleteink célja az volt, hogy a riboflavin termelését fokozzuk az RP-görbe emelkedő fázisának megnyújtásával. Ennek érdekében az inkubáció harmadik napján, amikor a tenyészet RP-ja emelkedni kezdett, steril körülmények között azonos mennyiségű fiatal tenyészetet adtunk a kísérletünkben használt tenyészethez és tovább mértünk naponként RP-t, valamint kétnaponként a riboflavin mennyiséget. Kontrollként egy hasonló, de fiatal tenyészettel nem elegyített tenyészetet használtunk. Mivel azonban a riboflavin termelést a táptalaj pótlása is fokozza, megfelelő táptalaj adagolással gondoskodtunk arról, hoev a vizsgált és konl> rolltenyészetekben a táptalajviszonyok azonosak legyenek. A különböző korú tenyészetek elegyítésekör az RP azonnal csökkent és az inkubáció folyamán többé nem érte el a kontroll tenyészetét. Ugyanakkor a termelési fázis elhúzódott, mivel az RP változás csak a 10. napon szűnt meg, míg a kontrolitenyészetben már a 8. nopan állandó maradt. Ugyanakkor a riboflavin termelés a megnyújtott termelési fázisnak megfelelően alakult, mert míg a kontroli-tenyészetben már a 8. napon elérte a maximumot (464 mikrogramm), a fiatal tenyészettel elegyített tenyészetben csak a 10. napon 652 mikrogramm/ml maximummal szűnt meg a riboflavin termelés Szabadalmi igénypontok: • 1. Eljárás riboflavinnak mikrobiológiai úton való készítésére, melyet az jellemez, hogy a termelés céljára használt mikroorganizmus tenyészetét olyan anyagokkal kezeljük, amely annak redoxpotenciálját tartósan csökkenti. 2. Az 1. alatti igénypont foganatosítási alakja azzal jellemezve, hogy a redoxpotenciált csökkentő anyagként testazonos redoxrendszert alkalmazunk. Ó. Az 1. és 2. igénypontok foganatosítása azzal jellemezve, hogy redoxpotenciált csökkentő anyagként a riboflavint termelő törzs fiatalabb tenyészetét használjuk. 4. Az 1., 2. és 3. igénypontok foganatosítása azzal jellemezve, hogy a redoxpotenciál csökkentésére szolgáló fiatal tenyészetet a már termelésben lévő idősebb tenyészethez adjuk hozzá. A kiadásárt felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója. 2296. Terv Nyomda. 1956. — Felelős vezető: Bolgár Imre.