142779. lajstromszámú szabadalom • Eljárás szpiramicin előállítására
142.779 7 butil-ketonnal újra kivonatoljuk. Dekantálás után a két kivonatot összekeverjük és 9 pH-ra lúgosított 6 liter vízzel mossuk. Az oldószerben tartalmazott antibiotikumot 5 C°-on vízzel kivonatoljuk, amikor is a pH értéket 5 %-os foszforsavval 3-ra csökkentjük; ezt a kivonatolást 8 liter és 3-szor 4 liter vízzel végezzük. • Az antibiotikum egész mennyiségét a vizes fázisban kapjuk. A vizes oldatot, melyet hígított szódával 6,5 pH-ra állítottunk be, 35 C°-ot meg nem haladó hőmérsékleten vákuumban koncentráljuk. Ilyképpen 1750 cm3 oldatot nyerünk, mely 14,6 millió egységet tartalmaz. A 9 pH-ra lúgosított vizes oldatból az antibiotikumot 1 liter és kétszer 0,5 liter benzollal folytatólagosan kivonatoljuk. A benzolos kivonatot 30 C°-ot meg nem haladó hőmérsékleten vákuumban 100 cm3 -re besűrítjük, 100 cm 3 n-butilalkoholt adunk hozzá és a pH értéket úgy állítjuk be 5-re, hogy butanolos 0,5 n-kénsavoldatot viszünk be. Az oldatot újból 100 cm3 -re koncentráljuk és az antibiotikum szulfátját 2 liter éterrel kicsapjuk. A fehér por alakjában kicsapott szulfátot centrifugáljuk, éterrel mossuk, és megszárítjuk. 9,6 g szulfátot nyerünk, melynek aktivitási értéke 1320 egység/mg, ami 80 %-os kitermelésnek felel meg. 6. példa 185 liter cefrés tenyészetet úgy szűrünk, mint az 5. példában. A szüredéket, mely 155 liter, és 12,4 millió egységet tartalmaz, 10 %-os szódaoldattal 9 pH-ra lúgosítjuk és folytatólagosan 40 liter és 20 liter n-butanollal kivonjuk. Az egyesített butanolos kivonatokat 30 C°-ot meg nem haladó hőmérsékleten vákuumban 10 literre besűrítjük. A butanolos oldatot folytatólagosan 8 liter és kétszer 3 liter vízzel kivonatoljuk, amikor is a pH értéket kénsavval 2-re csökkentjük. A vizea oldatot,' melyet híg szódaoldattal 6,5 pH-ra állítottunk be, 30 C°-ot meg nem haladó hőmérsékleten vákuumban 1500 cm3 -re koncentráljuk; a vizes oldat ekkor 8 millió egységet tartalmaz. A 9 pH értékre alkalizált vizes oldatot 3-szor 700 cm3 kloroformmal kivonatoljuk. A kloroformos kivonatokat .vákuumban besűrítjük és úgy kezeljük tovább, mint az 1. példában. Szulfát alakjában 7,4 g antibiotikumot nyerünk, melynek aktivitási értéke 746 egység/mg, ami 44 % hozamnak felel meg. 7. példa A nyers antibiotikum szulfátjának 30 g-ját 700 cm3 vízben oldjuk, amikor is szóda hozzáadásával a pH értéket 9-re állítottuk be. Háromszor 300 cm3 benzollal kivonatolunk. Az egyesített benzolos kivonatokat 9 pH értékű 200 cm3 vízzel mossuk és az oldatot alacsony hőmérsékleten szárazra pároljuk. 24,2 szpiramicin, bázist nyerünk, melynek aktivitási értéke 2150 egység/mg. Szabadalmi igénypontok 1. Eljárás szpiramicin előállítására, azzal jellemezve, hogy a streptomyces 3486 megjelölésű mikroorganizmusnak valamelyik törzsét, melyből szpiramicint lehet kitermelni, asszimilálható szénforrást és asszimilálható nitrogénforrást, valamint ásványi sókat tartalmazó közegben, mint táptalajban mindaddig aerob tenyésztésnek vetjük alá, amíg az említett organizmus segítségével ebben a táptalajban gyakorlatilag számottevő antibiotikus aktivitás nem fejlődött ki, és hogy a szpiramicint ebből a táptalajból nyerjük. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás kiviteli módja, azzal jellemezve, hogy a táptalaj asszimilálható szénforrást és asszimilálható nitrogénforrást, valamint ásványi sókat tartalmaz, és hogy azt az orv ganizmust, amely a szpiramicint kitermeli, a táptalajban mint szubmergált aerob tenyészetet tenyésztjük ki. 3. A 2. igénypont szerinti eljárás kiviteli módja, azzal jellemezve, hogy a táptalajt mintegy 24—28 C°-on tartjuk. 4. A 2. igénypont szerinti eljárás kiviteli módja, azzal jellemezve, hogy az organizmust 3—4 napon át tenyésztjük. 5. A 2. igénypont szerinti eljárás kiviteli módja, azzal jellemezve, hogy a fermentálási folyadékot mintegy 8—11 pH értéken vízzel nem keveredő oldószerrel kivonatoljuk. 6. Az 1—5 igénypontok bármelyike szerinti eljárás kiviteli módja, azzal jellemezve, hogy a szpiramicint savval cserebomlásba hozzuk, a savnak megfelelő só képzésére. A kiadásért felel a Nyomtatványellátó Vállalat igazgatója. 1411. Terv Nyomda, 1955. — Felelős vezető: Bolgár Imre
