141507. lajstromszámú szabadalom • Eljárás penicillinnek tömény, vizes oldatokból történő kinyerésére
I 2 141.507 ket használunk, mint amilyenek az etil-, butil-, vagy amilacetát és adott esetben a kioldás után nyert észteroldatnak csökkentett nyomás alatt történő beszűkítése után a penicillin-keveréket valamilyen szerves oldószerrel — melyben a penicillin nem oldódik —- leválasztjuk. Erre a céira használhatunk például étert, benzolt, petrolétert, de használhatunk rnás oldószereket is, mint amilyenek a halogénezett paraffinok, vagy nitrolbenzol, stb. Ha kristályos G-penicillin mellett az amorf, úgynevezett sárga penicillint is elő akarjuk állítani, akkor a kristályos G-penicillin leválasztása és elkülönítése után nyert anyalúgot a fenti, a penicillin kicsapására alkalmas oldószerek valamelyikével hozzuk össze és a kivált amorf penicillint szűréssel, vagy centrifugálással elkülönítjük és csökkentett »nyomás alatt megszárítjuk. A bejelentés tárgyát képező eljárással előállított kristályos G-penicillin nyomokban vagy csekély mennyiségben tartalmazhatja azt a szervetlen sót, amellyel a vizes oldatból történt kicsapást végeztük. Ezeknek a sóknak az elkülönítésére a kristályos G-penicillin átkristályosítására alkalmas és ismert eljárások bármelyike használható, így pl. az a módszer, hogy kevés 90%-os- acetonban oldjuk a G-penicillint, szűréssel, vagy centrifugálással elkülönítjük a szennyezéseket és az így nyert oldathoz száraz acetont adunk, mire a G: penicillin kikristályosodik. A kristályosodásliak befejeződése után, — amit hűtéssel még tökéletesebbé tehetünk — a kristályos G-penicillint szűréssel elkülönítjük és csökkentett nyomás alatt megszárítjuk. Példák: 1. 30 mg kristályos' G-penicillint feloldottunk 1 cm3 vízben, az egyik esetben 0,4, másik esetben 0.5, a harmadik esetben pedig 0,6 g porított ammóniumszulfátot adtunk hozzá, a kivált penicillint centrifugálással elkülönítettük, az oldatot pedig biológiai meghatározással értékeltük ki a penicillin-tartalomra. Eredményként azt kaptuk, hogy az oldat csak elenyésző részét tartalmazza az eredetileg bennefoglalt penicillinnek. 2. 30 mg G-penicillint feloldottunk 1 cm" vízben és 0,8 g kristályos kalciumkloridot oldottunk fel az oldatban. 0,4 és 0,6 g klórkalcium oldásakor csapadék az oldatból még nem válik ki, míg a fenti 0,8 g feloldásánál már tekintélyes része kiválik a penicillinnek. Az 1 cm3 oldat a 0,8 g kalciumklorid hozzáadására kb. 1,6 cm3 -re növekedett, benne tehát cms -ként kereken 30,000 E penicillin volt. A 0,8 g kalciumkarbonát hatására annyi penicillin vált ki az oldatból, hogy abban 12—14,000 E maradt cm3 -ként. Nagyobb mennyiségű kalciumkarbonát oldása esetén az oldatban az eredetileg benne volt penicillinnek csak elenyésző része maradt. Hasonló módon hozható ki vizes oldataiból a penicillin ammóniumklorid segítségével is. 3. 4,800 cm;i , erjesztés útján nyert penicillin oldatot, mely kereken 100 E G-penicillint tartalmazott cms -ként, 2,5—3 pH mellett szokásos módon háromszor 300 cm;! butilacetáttal axtrahálunk és az egyesített butilacetátos oldatokat vizes nátronlúggal extrahálunk olymódon, hogy a vizes oldatot nátronlúgnak adagolással pH 7 értékre állítottuk be. A vizes oldatot ezután elkülönítettük, újra beállítottuk 2.5—3 pH-ra, foszforsavval a fenti módon extrahálási műveleteket megismételtük, melyek eredményeképpen 9 cm3 vizes penicillin-oldatot kaptunk, melynek pH-ja kereken 7 volt. Az oldathoz 5,4 g porított ammóniumszulfátot adtunk, azt rázogatással feloldottuk, mire ragacsos kiválás keletkezett. Az elegyet háromszor kioldottuk abszolút szekundér butilalkohollal, először 2, azután 1—1 cm3 -rel. Ezeket egyesítettük, az oldatot megszűrtük és 1 cm3 butilalkohollal utána mostuk. Az oldathoz ezután 2 cm3 benzolt tettünk, csökkentett nyomás alatt kb. felére pároltuk. Az oldatban kristályosodás indult meg. Ezután 3 cnr butilalkohollal hígítottuk, lehűtöttük és a kivált kristályokat szűréssel elkülönítettük. 193 mg kristályos G-penicillint kaptunk és az anyalúgból még további 50 mg-t nyertünk ki. Az így kapott kristályos penicillin 85—90%-osnak bizonyult kémiai és biológiai meghatározás útján. Amikor ezt a kristályos G-penicillint kevés 90%-os acetonban oldottuk, a szennyezésként jelenlévő ammóniumszulfátot centrifugálással elkülönítettük és az oldathoz 3-szoros térfogat száraz acetont adtunk, az oldatból tiszta kristályos G-penicillin kristályosodott ki. Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás G-penicillinnek és penicillin-keverékneic töményített vizes oldatokból törtjéjnő előállítására, azzal jellemezve, hogy a töményített vizes oldatból a G-penicillint, vagy nyers penicillin-keveréket kisózzuk, azt elkülönítve vagy a nélkül a G-penicillin kisózására alkalmas, vízzel nem keveredő oldószerben feloldjuk, majd az oldatban lévő víznyomokat önmagában ismert módon elkülönítjük és a G-penicillint kikristályosítjuk és adott esetben ennek anyalúgjából a többi penicillinnek keverékét valamilyen szerves oldószerrel — melyben a penicillinek nem oldódnak — kicsapjuk . 2. Az 1. alatti eljárás foganatosítása azzal jellemezve, hogy olyan töményített vizes penicillinoldatot használunk, melyek a penicillinnek erjesztéses oldatokból történt kivonásával és1 a kivonatoknak bármilyen, önmagukban ismert módon történt töményítésével nyertünk. 3. Az 1—2. alatti eljárás foganatosítása azzal jellemezve, hogy a G-penicillin vagy penicillin-keverék kisózására ammóniumszulfátot használunk. 4. Az 1—2. eljárás foganatosítása, azzal jellemezve, hogy a G-penicillin vagy penicillin-keverék kisózására ammóniumkloridot használunk. 5. Az 1—2. eljárás foganatosítása, azzal jellemezve, hogy a G-penicillin vagy penicillin-keverék kisózására kalciumkloridot használunk. 6. Az 1—5. alatti eljárás foganatosítása, azzal jellemezve, hogy annyi szervetlen isót oldunk a penicillin-oldatban, hogy az abban oldott penicillin gyakorlatilag mind kiváljék. 7. Az 1^5. alatti eljárás foganatosítása, azzal jellemezve, hogy a szennyezések eltávolítása céljából frakcionáltan végezzük a kisózást.', 8. Az 1—7. alatti eljárás foganatosítása azzal jellemezve, hogy a kisózás hatására kivált G-penicillint, vagy nyers penicillin-keveréket szűréssel, vagy dekantálással különítjük el az anyalúgtól.
