139002. lajstromszámú szabadalom • Eljárás emlősállatok pankreászának feldolgozására
2 139002. szerint kezeljük a pankreászhormon belőle való kinyerésére. Az enzimkivonatolás előtt a friss vagy pl. fagyasztással megóvott mirigyeket a Szokásos módon elő-5 kezeljük, azaz megszabadítjuk minden rájuktapadó zsiradéktól és szövettől, majd apróra feldaraboljuk vagy finoman eloszlatott pép-alakba hozzuk, pl. húsdarálógépben való kezelés útján. 10 A mirigy-enzimek kivonatolása céljából bármely alkalmas hatóanyag has'ználható, amely a hormonnak nem hatásos kivonatoló anyaga és arra a kivonatolás feltételei mellett nincs roncsoló hatással. A kivona-15 tolás feltételei között döntő fontosságú a hőmérséklet, az extrahálás időtartama és az extrahálás alatt fennálló pH-érték. A hormon hozadéka mindezen három tényezőtől függ, míg a tripszin-hozag lényegé-20 ben csupán a ipH-értéktől és így — természetesen bizonyos határok között — független a hőmérséklettől és az extrakció időtartamától1 . Ily módon a hőmérséklet és a kivonatolás 25 időtartamának fokozása a hormon ezután következő kinyerésénél csökkent hozamhoz vezet. Ennélfogva a mirigyenzimeik kivonatolását aránylag alacsony hőmérsékleteknél 30 kell foganatosítani és igen rövid idő alatt. A pH-értéknek minden esetben 7 alattinak kell lennie, azaz a kivonatolás savanyú közegben foganatosítandó. Használhatunk alacsony, ú. m. 1 vagy még ennél is ala-35 csonyabb pH-értékeket. Előnyös azonban a kivonatolást nem túlságosan savanyú közegben végezni. A pH-értékek megfelelő tartománya 1-től 4-ig terjed. Azt találtuk, hogy a megs'avanyított 40 víz kiváló kivonatoló szer és, amennyire eddig kitűnt, a legalkalmasabb kivonatolás alatti pH = kb. 2 érték. Ha kivonatolószerként megsavanyított vizet használunk, a kivonatolás igen sikere-45 s'en végezhető 2 körüli pH-értékkel és kb. 0 C°-on kb. félóra alatt, azonban használható eredményeket érünk el hosszabb, pl. 1—2 órai sőt még ennél is hosszabb kivo natolási időtartamokkal is. A 24 órás! kivo-50 natolási időtartam azonban már túl hosszú. Az alanti példa a találmány egyik foganatosítási módját ismerteti. 1 kg pankreászt felaprítunk és' kb. 0 C°-on félóra hosszat 2 liter olyan vízzel1 kivona-55 toljuk, amelyhez 10 cm3 tömény kénsavat adtunk. Az enzimkivonatot pl. centrifugá-Felelős kiadó: dr. Sályi lássál vagy szűréssel elkülönítjük; a maradékból a pankreás'zhormont megsavanyított alkohollal a szokásos módon kivonatolva nyerjük ki. A tripszin-hozam 10 millió 60 Fould-Gross egység, a hormon hozama 2000 egység. Ezek a termelési hozamok átlagosaknak tekinthetők. Rendkívüli minőségű mirigyanyaggal és a legalkalmasabb készülékkel 65 úgy a hormon, mint az enzimek lényegesen magasabb hozamai érhetők el. Végül megemlítjük, hogy ha egés'zen friss mirigyeket használunk, olyan enzim-kivonatokhoz juthatunk, amelyeknek enzimjei, pl. 70 ja tripszin, inaktívak. Az ilyen kivonatok azonban könnyen aiktiválhatók. Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás emlősállatok, különösen szarvas', marha és sertés pankreáázának feldolgo- 75 zásária, melyet az jellemez, hogy a felaprózott mirigyekből előbb a tripszint és egyéb, exogén kiválasztott enzimeket kivonatoljuk és ezt követőleg az így keletkezett maradékot használjuk fel a pank- 80 reász hormonjának kinyerésére. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítása módja, melyet az jellemez, hogy az enzim-kivonatolást 1-től 4-ig terjedő, előnyösen 2 pH-értéknél foganatosítjuk. 85 3. Az 1. vagy 2. igénypontok szerinti eljárás foganatosítani módja, melyet az jellemez, hogy az enzim-kivonatoíást megsavanyított víznek mint kivonatolószernek segélyével végezzük. go 4. Az 1., 2. vagy 3. igénypontok szerinti eljárás foganatosítási módja, melyet az jellemez, hogy az enzimkivonatolás időtartama 24 óránál rövidebb, pl. 1—2 óra, előnyösen félóra. 95 5. Az előző igénypontok bármelyike szerinti eljárás foganatosítási módja, amelyet az jellemez, hogy az enzimkivonatolást szobahőmérsékletnél alacsonyabb hőmérsékleten, pl. 0 C° körül foganato- 100 sítjuk. 6 Az előző igénypontok bármelyike szerinti eljárás foganatosítási módja, melyet az jellemez, hogy a felaprózott pankreászt kb. 0 C°-on félóra hosszat olyan ln5 vízzel kivonatoljuk, amelynek literéhez kb. 5 cm3 tömény kénsavat adtunk, az így kapott enzimkivonatot pl. centrifugálással vagy szűréssel elkülönítjük, a pankreászhormont pedig a maradékból, no pl. megsavanyított alkohollal kinyerjük. István szabadalmi bíró. Szikra Irodalmi és Lapkiadó vállalat. Nyomdai Rt., Budapest, V., Honvéd-utca 10, Fölelős nyomdavezető: Radnóti Károly.