138471. lajstromszámú szabadalom • Eljárás biotin előállítására
6 138471. válnak ki, ezt eceteszterrel felhígítjuk, hogy a kiválások ismét feloldódjanak. A szerves oldószert elválasztjuk és vákuumban bepároljuk. A szűrőn lévő nyerstermé-5 ket és a szerves oldószer maradékát egyesítjük és a következő lépésben tovább dolgozzuk fel. A brómvegyület a nyersterméknek acetonban vagy metanolban való feloldása útján tisztítható. Az oldathoz' étert 10 és petrolételt adunk, amikor sötétszínű melléktermékek válnak ki. A leszűrt oldatot a meginduló kristályosodásig töményítjük. Állás után étert adunk hozzá és a 3,4-(N-benzil - 2'- keto - imidazol!do)-2-(<o-brómbu-15 til)-tiofán (XII) kivált tűit leszűrjük. Az olvadáspont 168—169 C°. 4,5 g nyers brómterméknek (XII) 200 cm3 metanolos oldatához 15 cm3 vízben oldott 5 g káliumciánidot adunk. Az elegyet 20 20 órán át forrásbán tartjuk, majd vákuumban töményítjük és vízzel és éterrel kezeljük. A levált nitrilt leszűrjük és a telített oldatot eceteszterrel kirázzuk. ; A szerves oldószert elválasztjuk és vákuumban be-25 pároljuk, a maradékot a kivált termékkel egyesítjük és a következő lépésben ezzel együtt használjuk fel. A 3,4-(N-benzil-2'-keto-imidazolido-2- w -ci! á<nbutil)-tiofán (XIII) motanol, éter és petroléter keveré-30 kéből átkristályosítható és tűket alkot, melyek olvadáspontja 169,5—171 C°. Az előző lépésben kapott nyers nitrilt (XIII) 300 cm3 metanol és 150 cm 3 vizes 3n káliumhidroxid-oldat elegyében felold-35 jitk és 24 órán. át gőzfürdőn hevítjük. Á keveréket vákuumban bepároljuk és a maradékot vízzel és éterrel kezeljük. A csapadékot leszűrjük és a lúgos oldatot kevés eceteszterrel hidegen kivo-40 natoljuk. A csapadékból és1 az eceteszteres kivonatból át nem alakult nitrilmeny. nyiséget nyerhetünk vissza. A lúgos-vizes oldatot megsavanyítjuk és a N-benzil-d-,1--biotin-csapadékot lenuccsoljuk. Az anyaíb lúgokat eceteszterrel kivonatoljuk és ilymódon további, kismennyiségű reakcióterméket kanunk. A 3,4-(N-benzil-2'-keto-imidazolido)-2-( -karboxibuitil)-tiofán, N-benzild, 1-biotin (XIV) metanolból — melvhez 50 szükség esetén étert adhatunk — vékony lemezek alakiában könnven kristályosodik, olvadáspont: 175—176 C°. . A metilesztert a metanolban oldott szabad savnak éteres diazometán-oldattal való 55 reakció iával állíthatjuk elő. Ezt az észtert metanol, éter és petroléter elegyében átoldhatjuk; finom tűket alkot, melyek 169,5—170,5 C°-on olvadnak. A porított monobenzil-biotin 1,45 g-ját (4,27 m mol) kb. 100 cm3 folyékony ammó- eo mában szuszpendáljuk. E keverékhez mindaddig a nátrium kis darabkáit adjuk, amíg a kék szín meg nem marad (kb. 13—17 m mol = 0,3—0,4 g nátrium). Az ammóniát lepároljuk és a maradékhoz jég, éter és $5 híg sósav elegyét adjuk. A savanyú oldatot megszűrjük és a szűrőn lévő maradékot nagymennyiségű forró vízzel és forró eceteszterrel vagy kloroformmal feloldjuk. Ezeket az oldatokat az első szűrlethez ke- 70 verjük és a két réteget elválaszjuk. Az eceteszteres vagy kloroformos réteg tartalmazza az át nem alakult kiindulási anyagot. A vizes rétegben van a képződött d, 1-biotin teljes mennyisége, valamint 75 szervetlen sók is. Az oldatot vákuumban bepároljuk és a 228—230 C° olvadáspontú, finom tűk alakjában kicsapódó biotint leszűrjük. 20-szoros mennyiségű forró, 80%-os ecetsavban való feloldás és azonos 80 mennyiségű víz hozzáadásával végrehajtott kicsapás után ez a vegyület analitikaiiag tiszta és 232—234 C°-on olvad. Az új biotin-szintézis foganatosításakor a közbülső termékek természete szakértő 85 számára magától értetődő módon megváltoztatható, így pl. a ciklikus 1,3-dibenzilris-4Tkarboxi-5-formil - imidazolidon-(2)-acetát (VI) helyett a megfelelő alacsony alifás acilszármazék-homológok, mint pl. a pro- <io pionát vagy a butivát is használhatók. Ezeket az acilszármazékokat az acetáthoz hasonló módon állíthatjuk elő, nevezetesen az 1,3-dibenzil-imidazolidon-(2)-cis-4,5-dikarbonsav anhidridjének (V) cinkkel való 05 redukálása utján a megfelelő alacsony alifás sav vagy savanhidrid jelenlétében. Ezenfelül a butil-oldalláncnak a 3.4-(l' ,3'-dibenzil - 2'-keto - imidazolido)-2-keto - tiofánba (tiolakton VII) való bevezetéséhez IOQ az w-metoxi-butilmagnéziumbromid helyett éppúgy használhatjuk egyéb alacsony w -alkoxi-butilhalogenidek fémorgános vegyületeit is. Ezenfelül az elnevezések és képletek 105 mind a leírásban, mind pedig az igénypontban a leírt vegyületek valamennyi tautomér alakját felölelik. A leírt monobenzilvegyületek — melyek képletei célszerűségi okokból a benzilcsooortot mindig azonos no helyzetben tüntetik fel — e csoportot a valóságban vagy az 1'- vagy pedig a 3'-helyzetben hordozzák. Szabadalmi igénypont: Eljárás d, 1-biotin előállítására, azzal jellé- 115
