121145. lajstromszámú szabadalom • Eljárás prolaktin előállítására

131145. folyadék jelenlétében végezni- melyben a hormon oldhatatlan, például kismolekulás alkohol vagy keton jelenlétében. Ila például 70°o-os etilalkohol jelenlétében extra-5 hálunk, a hidrogéntóiikoncentráció beállításával egyidejűleg a kivonat alikoholkoncentrációját is annyira fokozzuk, hogy körülbelül 90%-os alkoholos oldatot kapjunk. Aiz izoelektromos ponton kicsapott hor-40 mont ezután megtisztítjuk úgy, hogy gyengén savanyú vagy gyengén álkáliás vizes oldatban feloldjuk és az oldat pH-ját 5— 6-ra, előnyösen pH 5.0-ra beállítva, ismét kicsapjuk. Ezt az újbóli kicsapást adott •15 esetben egyszer vagy többször megismétteljük. Példák: 1. 5 kg marhamájat 15-szörös mennyiségű 70°o-os etilalkoholban, amely adott 20 esetben alkáfia, például nátronlúg vagy ammóniák hozzáadásával pH 9.5 -10-re van beállítva, páliasztunk (digeráhmk; . Körülbelül 24 óra után a tömeget leszívatjuk és az alkoholos kivonatot 0 C°ra lehűt-25 jük. Addig adunk hozzá abszolút alkoholt, míg a kivonat alkoholtartalma 9!t ..-ra növekedett és az oldatot egyidejűleg sav hozzáadásával körülbelül pH = 5.5 hidrogéniónkoncentrációra állítjuk be. Eközben :30 a kiindulási anyagban jelenvolt hormon közel teljes mennyisége szilárd alakban kiválik. További 24 órai állás után a kivált hormon felett levő folyadék főtömegét leszivornyázzuk, a többit pedig leszívatjuk. :35 A még alkoholtól nedves hormont további tisztítás céljából hígított nátronlúggal oldatba visszük; azután higított savnak, például sósavnak, a hormonoldathoz való hozzáadásával azt körülbelül pH- = 5hid-40 rogéniónértékre állítjuk be. miközben a hormon újból kicsapódik. Ezt az újbóli kics^pással végzett tisztítóeljárást, adott esetben egyszer vagy többször megismételjük. -45 Az ilymódon előállított prolaktin a szokásos fehérjereakciókat adja és fizikai, valamint kémiai tulajdonságai a hipofízisből kapott prolaktinéival teljesen megegyeznek. 50 2. 1 kg marhamájat 15 liter 60<>o-os etilalkohollal digerálunk. Azután higított sósav hozzáadásával a tömeg hidrogéniónkoncentrációját körülbelül pH 2.5-re beállítjuk, A keveréket hidegen 24 óráig ráz-55 zuk. Ezután a kivont folyadékot leszívatjuk. Az elkülönített folyadékot tömény alkohol hozzáadásával körülbelül 90<>/o-os alkoholkoncentrációjura, továbbá hidrogéniónkoncentrációját hígított nátronlúg hozzáadásával pH 5.5-re állítjuk be. Eköz- 6C ben kicsapódik a kísérőanyagoktól rneszszemenően megszabadított prolaktin, melyet némi állás után az alkoholos folyadéktól centrifugálással elkülönítünk. A további tisztítást úgy végezhetjük. mint azt 6£ az 1. példánál ismerteltük. Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás prolaktin előállítására, melyet az jellemez, hogy májat vizes íolyadé- 70 kokkal savanyú vagy alkáliás közegben, valamely vízben oldható szerves oldószer jelenlétében, extrahálunk és a prolaktint a kapott kivonatokból a prolaktin izoelektromos pontjának megfelelő 75 5.0 és 6.5 közöiti pH-tartományban kicsapjuk. 2. Az 1. igénypontban védett eljárás íoganatosítási módja, melyet az jellemez, hogy a máj extrakcióját 1.5 és 3.0 vagy 80 8 és 11 közötti pH-tartományban foganatosítjuk. 3. Az 1. vagy 2. igénypontban védett eljárás íoganatosítási módja, melyet az jellemez, hogy a máj extrakcióját a pro- 85 laktin kiesapásához elégtelen mennyiségű vízoldható szerves oldószer jelenlétében foganatosítjuk. 4. Az 1—3. igénypontok bármelyikében védett eljárás íoganatosítási módja, rne- 90 lyet az jellemez, hogy a prolaktin extrahálását kb. 60—70<Vo-os vizes alkohol jelenlétében foganatosítjuk. 5. Az 1—4. igénypontok bármelyikéljen védett eljárás íoganatosítási módja, me- 95 Ivet az jellemez,, hogy a prolaktin lehetőleg kvantitatív leválasztása céljából, annak az izoelektromos ponton foganatosított kicsapását, oly vízben oldlialó szerves folyadék jelenlétében vé- 101 gezzük, melyben a prolaktin oldhatatlan. 6. Az 1—5. igénypontok bármelyikében védett eljárás íoganatosítási módja, melye!; az jellemez, hogy a prolaktin le- 10; hetőleg kvantitatív leválasztása céljából az azt tartalmazó alkoholos kivonatokat tömény alkohol hozzáadásával kb. 90°/o-os alkoholhoncentrációra állítjuk be. ii( 7. Az 1—6. igénypontok bármelyikében védett eljárás Íoganatosítási módja, melyet az jellemez, hogy a prolaktin ki-