121115. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a gonadotrop hormonok előállítására vemhes kancák szérumából

Megjelent 1939. évi augusztus hó 81-én. MAGYAR KIRÁLY! #33J| SZABADALMI BlRÓSÍft SZABADALMI LEÍRÁS 121115. SZÁMIV/ll/2. OSZTÁLY. S. 17188. ALAPSZÁM. Eljárás a gonadotrop hormonok előállítására vemhes kancák szérumából. Bociété Institut de Sérothérapie hémopoiétique S. A. cég, Romáin ville, Seine (Franciaország), mint Les Laboratoires Francais de Chimiothérapie cég" és Casimir Funfc ruellmalmaisoni (Seine & Oise) lakos jogutódja. A bejelentés napja 1937. évi december hó 18-ika. Németországi elsőbbsége 1936. évi december hó 19-ike. Néhány év óta ismeretes, hogy vemhes kancák széruma, meghatározott időszakban a gonadotrop hormonok előállításának kitűnő kiindulási anyaga. E fon-5 tos tulajdonsága folytán néhány előállítási módszer vált ismeretessé. (Goss és Colé, Endocrinologie, 15. kötet, 214. old. 1931; 440530. sz, brit és 2,027.446. ,sz. É. A. E. Á. szab. leírás.) 10 Az utóbbiban ismertetett eljárás szerinti a gonadotrop hormont a hipofízisből vonják ki vagy a kancaszérumból aoetonnal előállított fehérjecsapadékból meghatározott felületi feszültségű, igen híg (6»/o-os) 15 alkohololdatokkal választják le. E munkamód hormonveszteségekkel jár, mert az aoetoncsapadék a hormont makacsul visszatartja és az eljárás a 6»/o-oa alkoholos oldatok 40°-on való igen hosz-20 szadalmas bepárologtatásával jár. A találmány szerinti eljárás az eddig ismertekkel szemben lényegesen egyszerűbb. Foganatosításához csak alkohol, híg sósav és némi híg nátronlúg szükséges és 25 majdnem a kvantitatív termelési hányad mennyiségében szolgáltatja a kiváló tisztaságú végterméket. Megállapítottuk, hogy a szérumból, 5 pH mellett, kb. egy térfogatnyi alkoholmennyi-30 ség hozzáadásával a fehérjeanyagok legnagyobb része lecsapható, mimellett maguk a hormonok oldatban maradnak és ez oldatból előnyösen kb. 77°/o-ig terjedő koncentrációjú alkohollal való kicsapás, híg alkáliákban való többszöri feloldás és 35 újra-kicsapás segítségével, az alkalikus oldat neutralizálása után igen tiszta minőségben előállíthatók. Gyenge alkáliákon kívül a hormonok tiszta vízzel is kivonhatók, de ez az eljárás több időt igéi- Í0 nyel é!s kisebb termelési hányadot eredményez. Példa: ' Vemhes kancák szérumának 45 literéhez 2 liter normál sósavat és 47.6 liter 96 45 téirfogatszázalékos alkoholt adunk. A keletkezett fehérjecsapadékot eltávolítjuk és a szűrlethez kevés konyhasót és 1,5 térfogatmennyiségű friss alkoholt adunk. A kapott második csapadékot gondosan 50 gyűjtjük s ez a nyers hormonok egész mennyiségét koncentrált álakban tartalmazza. A további tisztítás módja a következő: A terméket 500 cm3

vízben szuszpen- 55 dáljuk, gyenge alkalitásig (pH g) híg nátronsavat adunk hozzá, az oldhatatlan réíszt lecentrifugáljiuk, az oldatot neutraüzáljúk, 1. téi-f. mennyiségű alkoholt adunk hozzá és újra centrifugáljuk. A centrifugált fo- 60 lyadékhoz végül 1,5 térf. mennyiségű alkoholt adunk. A kapott termék már tisztított hormonokból áll (2. fok), de a nyers-