72607. lajstromszámú szabadalom • Eljárás fém fehérjekombinációk előállítására
nem mutatnak ninhidrin-reakciót, új fém-fehérjekombinációkhoz juthatunk, melyek az eddig ismert módon normális szervekből, illetve szövetekből előállított, nem ninhidrinmentes fehérjetestektől eltérően terápiai célokra kiválóan alkalmasak. Míg ugyanis a normális szervekből kapott és előzetes kezelésnek, alá nem vetett fehérjeanyagokból előállított fémfehérjevegyíiletek állatok vagy emberek kezelésénél a kivánt specifikus hatásokon kivül még nagy mértékben zavaróan ható kisérő tüneményeket váltanak ki, addig ez a hátrány a ninhidrinreakció eltűnéséig előzetesen kezelt fehérjeanyagoknál nem mutatkozik, amennyiben ezek minden melléktünemény nélkül kizárólag a kivánt specifikus gyógyhatást idézik elő. Normális állati vagy emberi szervekből kapott olyan feheirjeanyagokat, melyeket előzetesen a ninhidrinreakció kimaradásáig tisztítottak meg, eddig fémvegyületek készítésére egyáltalában nem használtak. Ezien fém- fehérjekombinációk előállításánál szintén úgy járunk el, hogy fémeket vagy fémvegyületeket normális emberi vagy állati szervekből kapott oly fehér jeanyagokra hagyunk hatni, melyeket ismert eljárásokkal, pl. vízben való tartós főzéssel a vízben oldható alkatrészekből, pl bomlástermékektől stb. annyira megszabadítottunk, hogy ninhidrinnal (triketohidroindenhidráttal) reakciót nemmutatnak. Az alkalmazott fémfelesleget itt is megfelelő módon el kell távolítani. Ezek a fém-fehérjekombinációk a fémet szintén burkolt, illetve nem ionizált kötésben tartalmazzák és fehérjebontó fermentekkel való érintkezésben specifikus bomlást szenvednek, mi mellett fémjük fölszabadul és a szokásos reagensekkel kimutatható. A szóban forgó kombinációk tehát szintén alkalmasak diagnosztikai célokra.' Az eljárást a következő példák kapcsán ismertetjük. i. példa. Vas-placentakombináció előállítása: Friss emberi placentát ismert módon történő vértelenítés után aprítunk, zsírmentesíliink és ezután addig főzzük desztillált vízzel, míg a főzéshez használt víz már nem mutat ninhidrini eakciót. Az ily ódon kifőzött placentafehérjevegyületet finom szitán való áttörés után kevés vízzel iszapoljuk, erőteljes kavarás közben 20 cm.3 30%-os vaskloridoldatot adunk hozzá és ezután néhány óra hosszat állni hagyjük. Ezt követőleg a placenta-vasfehérkombinációját vízzel addig mossuk, míg a mosáshoz használt víz teljesen vasmentesnek nem mutatkozik. A kapott vegyületet most 14 óra hosszat acetonban tartjuk, az aceton leszívatása után nagyfokú vákuumban 70° C. vízfürdőhőmérsékleten 3 óra hosszat szárítjuk, ezután dörzscsészében eldörzsöljük, sűrű fémszitán átszitáljuk, az anyagot 0.1 g.-os adagokban alkálikus jenaüvegből álló csövekbe töltjük, ezeket beolvasztjuk és 2 óra hosszat 105 G. fokon sterilizáljuk. A kapott anyag barnás szinü, finom por, mely a vasat burkolt, illetve nem ionizált kötésben tartalmazza; az anyag vízben és a szokásos szerves oldószerekben oldahatatlan. 2. példa. Vas-karcinomfehérjekombicáció előállítása: A kareinomdaganatokat ollóval és késsel- kipreparáljuk, ismert módon vérmentesítjük, zsírtalanítjuk, vízzel kifőzzük és finom szitán átnyomjuk. Az anyagot most kevés vízzel iszapoljuk és 20%-os vaskloridoldatból 5 cm.3 -t adunk hozzá, 5 óra hosszat állni hagyjuk és a fölös vaskloridot vízzel való mosással eltávolítjuk; ezután az anyagot rövid időre acentonba helyezzük és az aceton leszívatása után nagyfokú vákuumban, 70' C. vízfürdőhőmérsékleten megszárítjuk. A sterilizálás után kapott vas-íkarcinomfehérjekombináció barnás szinü finom por, mely vízben és a szokásos szerves oldószerekben oldhatatlan. 3. példa. Réz-placentafehérjekombináció előállítása:
