Vargha László et al. (szerk.): Beszámoló a Gyógyszeripari Kutató Intézet 10 éves működéséről 1950-1959 (Budapest, 1969)
dr. Horváth István: Anyagcsere vizsgálatok és oxitetraciklin termelési kísérletek Streptomyces rimosusszal
за чувствительности ферментации к железу, опытно-производственное осуществление полученных результатов не продвигалось вперед. Для венгерской промышленности, оборудованной железными ферментерами, изготовление окситетрациклина при помощи штамма Streptomyces rimosus казалось задачей быстрее осуществимой. Это скоро подтвердилось опытами. Результаты лабораторных опытов начатых в августе 1954 года были осуществлены опытным цехом уже в следующем месяце; в декабре на заводе Хиноин проводилось экспериментальное производство, а в мае следующего года началось промышленное производство. Опыты проводились по способу и методам, общепринятым в области исследований антибиотиков. Путем опытов, проведенных с различными штаммами и питательными средами, удалось повысить опытные результаты продукции окситетрациклина с 600 до 2200 /хг/мл. Чрезвычайная стойкость примененного в производстве штамма обепечила постоянную продукцию, однако, продолжавшиеся в течение нескольких лет опыты все-таки не приводили к дальнейшему повышению продукции. Безуспешно испытывалось много тысяч вариантов, изолированных после ультрафиолетового облучения и обработки азотистым ипритом. В опытном цехе вышеуказанные производственные величины повышались до 4000 ;и.г/мл, причем было обнаружено, что густые питательные среды, которые в лабораторных условиях не повышают продукцию, в производственных условиях могут приводить к повышению продукции. В настоящей работе, носящей суммарный характер, описываются в первую очередь опыты, результаты которых считаются новыми. Оптимальная для культивирования штамма Streptomyces rimosus среда характеризуется высокой маслянистостью, причем наблюдалось, что токсическое действие железа зависит от степени насыщенности примененного в питательной среде масла. Это объясняется тем, что под влиянием каталитического действия ионов железа возникают перекиси масла, которые оказывают токсическое действие на ферментацию. Количество перекиси зависит, разумеется, кроме маслянистости среды, также от степени насыщенности масла, и поэтому рекомендуется применять в производстве пальмовое масло. Наблюдения показали, что токсическое действие образовавшихся перекисей масла предупреждается применением метиленовой сини. Эти наблюдения в значительной мере поспособствовали надежности производства. Для изучения особенностей продуцирующего штамма, на синтетической среде проводились опыты, которые — кроме распознавания влияющих на продукцию окситетрациклина факторов — проливали свет также на способ синтеза, и некоторые результаты имеют общий биологический интерес с точки зрения промежуточного обмена аминокислот. В то время как ионы фосфата в маслянистой естественной среде на продукцию не влияют, в синтетической среде (при наличии глюкозы в качестве источника энергии) продукция зависит от концентрации фосфата. Хотя ионы фосфата влияют на активность некоторых энзимов, участвующих в промежуточном обмене глюкозы (как у Streptomyces aureofaciens), результаты проведенных анализов обмена веществ показывают, что этими наблюдениями первичные влияния на синтез не объясняются. Опыты показали, что синтез молекулы окситетрациклина происходит через активный ацетат. Снижение продуктивности штамма Streptomyces rimosus сопровождается морфологическими изменениями, причем повышается активность обмена веществ. Однако, снижение продуктивности выражается в первую очередь снижением продукции на питательной среде, содержащей серин и глюкозу. Это объясняется содержанием в этом микроорганизме сериновой дезаминазы чрезвычайно активной и имеющей конституционный характер. На содержащей глицин и глюкозу питательной среде, при концентрациях фосфата, совпадающих с оптимумом продуции тетрациклина, наблюдается значительный синтез аланина. В свободных от клеток экстрактах такой синтез зависит, отчасти, от коэнзима А. На содержащей треонин и глюкозу среде образуется изолейцин, и такое превращение имеет место также в бесклеточном экстракте. Это же наблюдение представляет благоприятную возможность для энзимо-химичоескго изучения биосинтеза аминокислот с боковой углеродной цепью. 178
