Kelemen Imola (szerk.): A Csíki Székely Múzeum Évkönyve 6. (Csíkszereda, 2010)
Természettudományok - Pálfi Mária–Kovácsi Erika–Szilágyi László–Miklóssy Ildikó–Ábrahám Beáta–Lányi Szabolcs: Egy „világító” fehérje alkalmazási lehetőségei a környezeti biomonitoringban
PÁLFI MÁRIA ET AL. POSIBILITĂŢI DE APLICARE ALE UNEI PROTEINE LUMINOASE ÎN BIOMONITORIZAREA MEDIULUI Rezumat Proteina fluorescentă verde are o structură specială, care devine posibilă emiterea luminii fluorescente verde, prin excitarea cu lungimea de undă adecvată. Această proteină este utilizată pe scară largă, din cauza proprietăţilor sale avantajoase, în domeniul biotehnologiei şi biologiei celulare, ca moleculă marker fluorescentă. Obiectivul cercetării noastre este obţinerea unei proteine mutante, prin mutageneză direcţio- nată, care poate fi folosită pentru detectarea ionilor metalici. Pentru atingerea obiectivului propus EGFP trebuie să fie capabilă de a lega ioni metalici, iar acest eveniment induce în aceeaşi timp o schimbare detectabilă în emisia fluorescenţei. Ştiind că ionii metalici, aflaţi într-o apropiere adecvată de grupul cromofor al proteinei, provoacă reducerea intensităţii fluorescenţei (fluorescence quenching), noi vom forma un situs de legare pentru ionii metalici în apropierea grupului cromofor. Verificând efectul ionilor metalici asupra fluorescenţei proteinei, rezultatele noastre indică faptul că, din cauza mutaţiei efectuate, sensibilitatea acestei proteine pentru ionii metalici a crescut semnificativ. POSSIBLE APPLICATIONS OF A LIGHTING PROTEIN IN ENVIRONMENTAL BIOMONITORING Abstract The green fluorescent protein has a special structure, which makes it possible, to emit green fluorescent light due to exciting with light of the corresponding wavelength. This protein is widely used, because of his advantageous properties, in biotechnology, cell biology, like a fluorescent marker molecule. The aim of our work is to obtain an EGFP mutant protein, using directed mutagenesis techniques, which may applicable for detection of metal ions. For this reason EGFP must be capable of bindig metal ions, and this event must induce a detectable change in the fluorescence emission of the protein. It is known that metal ions in close proximity to cromophore group reduce the fluorescence emission of the protein, so we created a metal binding site near the chromophore group. We examined the effect of metal ions on the fluorescence of the protein. Our results indicate that due to the performed mutation, the sensitivity of this protein for the metal ions increased significantly. 522
