Kelemen Imola (szerk.): A Csíki Székely Múzeum Évkönyve 6. (Csíkszereda, 2010)
Természettudományok - Pálfi Mária–Kovácsi Erika–Szilágyi László–Miklóssy Ildikó–Ábrahám Beáta–Lányi Szabolcs: Egy „világító” fehérje alkalmazási lehetőségei a környezeti biomonitoringban
PÁLFI MÁRIA ET AL. A mutáns fehérje fluoreszcencia intenzitása 55% -al csökkent a 400 mikromólos Cu2+ koncentrációjú oldatban. 3. ábra. Az EGFP érzékenysége a rézionok iránt A mutáns fehérje érzékenységét a rézionok iránt a 3- ábra szemlélteti. A fluoreszcencia intenzitás csökkenése arányos volt a fémionok koncentrációjával, az 50-450 uM tartományban. Ez az érzékenységi tartomány alkalmassá teszi a mutáns fehérjét szennyvizek Cu ion koncrentráció- jának meghatározására. A kapott eredmények alapján elmondhatjuk, hogy a mutáció sikeres volt. Az általunk létrehozott mutáns fehérje képes volt a fémionok megkötésére. A fémek hozzákötődve a fémkötő helyhez elég közel kerültek a kromofor csoporthoz, ahhoz, hogy interakcióba léphessenek vele. Ezen interakció következtében a fehérje elvesztette a fluoreszcenciáját. Tehát a mutáció hatására megnövekedett a fehérje érzékenysége a fémionok iránt. Az általunk létrehozott mutáns fehérje a fémionok jelenlétére fluoreszcencia csökkenéssel válaszolt, ez a válasz reakció alkalmassá teheti fémionok kimutatására. Azonban a rézionok szelektív kimutatásához szükség van a fehérje szelektivitásának növelésére. Ennek érdekében újabb EGFP mutánsokat fogunk létrehozni. Az eddigi eredmények biztatóak, további célunk egy GFP alapú bioszenzor kifejlesztése, amely alkalmas rézionok kimutatására különböző élelmiszer, ivóvíz ill. szennyvíz mintákból. Irodalom CHALFIE, KAIN 2006 LAKOWICZ 2006 LIAO ET AL. 2006 OLENYCH ET AL. 2007 Chalfie, Martin; Kain, Steven R., Green fluorescent protein. Properties, applications, and protocols, Second edition, Elsevier Inc., New Jersey. Lakowicz, Joseph R., Principles of fluorescence spectroscopy, Third edition, Springer sciencer business, Media, New York. Liao, Vivian Hsiu-Chuan; Chien, Ming-Te; Tseng, Yuen-Yi; Ou, Kun-Li, Assessment of heavy metal bioavailability in contaminated sediments and soils using green fluorescent protein-based bacterial biosensors, IN Environmental Pollution, 142, 17-23. Olenych, Scott G.; Claxton, Nathan S.; Ottenberg, Gregory K.; Davidson, Michael W., The fluorescent protein color palette, IN Current Protocols in Cell Biology, chapter 21, John Wiley & Sons, Inc., New York, 21.5.1-21.5.33520