Dr. Murai Éva szerk.: Parasitologia Hungarica 16. (Budapest, 1983)

9) A felesleges folyadék óvatos leitatása után, l-l csepp pufferolt glicerol, majd fedés fedő­lemezzel. Kontrollok Minden vizsgálati sorozat mellé ismert gyengén vagy közepes erősséggel pozitív, ill. negatív savó azonos hígításait is be kell állítani. A konjugátum kontrollt - mint már említettük - vizsgálatsorozatonként, de legalább charge­onként kell elvégezni. A konjugátum kontroll pozitivitása esetén a főkfsérlet nem értékelhető. Ebben az esetben vagy másik charge-ot kell alkalmazni, vagy a konjugátumot toxoplasma sus­pensióval kimeríteni. Az IFA leolvasása A reakció eredményének leolvasása történhet azonnal, de fénytől védett csomagolásban, 4°C­on, hetek múlva is kiváltható a fluorescencia. Az indukáló TJV vagy kék fény alkalmazása so­rán és után azonban a fluorescencia gyengülésével, nagy fényerő esetén átmeneti kioltásával kell számolni. A leolvasást tehát a vizsgálandó, ill. kontrollsavók reakcióhelyeinek viszony­lag gyors áttekintésével kell végezni. Az értékelést Fluoval mikroszkóppal, 40x objektiv és 6, 3x okulár beállításával, ráeső fény­ben végeztük. A fényforrás HBO 2 02 higanygőzlámpa, s indukáló fényként rövid hullámhosz­szú kék fényt alkalmaztunk B 224 g (3mm) induktor szűrővel, s G 247 zárószűrővel. A KKR és az IFA - IgGAM összehasonlító vizsgálata KKR IFA ­IgGAM Összesen KKR Neg. 1: 20 1: 200 ^ 1: 2 000 Összesen Negativ 161 14 39 1 215 1 10 ­­19 4 23 1 20 _ 2 11 14 27 1 40 ­2 19 21 1 80 _ ­4 11 15 1 160 ­­­3 3 1 320 ­­­3 3 1 640 ­­­3 3 1 280 ­­­5 5 Összesen: 161 16 75 63 315 A ráeső megvilágítás szükségtelenné teszi a sötétlátóteres rendszer - kardioid kondenzor, speciális vékony tárgylemezek stb. - beállítását. A kék fény alkalmazása pedig UV fény he­lyett, kevésbé igényes optikák használatát is lehetővé teszi, valamint Evans Blue festés ese­tén egyébként is előnyösebb kontrasztot ad. Ebben a rendszerben induktorként a 495 nm in­terferencia szűrőpár is jól használható. A reakció leolvasásakor pozitívan értékelendő a kép, ha a teljes trophozoit vagy annak mar­ginális zónája fényes almazöld fluorescenciát mutat. Negatív az eredmény, ha az almazöld fluorescenciát csak a trophozoit elülső pólusa mutatja ("cap formation", "polar staining" ­1. megbeszélés) vagy nem világít, illetve vörös fluorescenciát látunk (kontrasztfestés esetén).

Next

/
Thumbnails
Contents