Dr. Murai Éva szerk.: Parasitologia Hungarica 16. (Budapest, 1983)

pozitivitást észleltek egy mezőváros lakosai között. JANKÓ és mtsai (11), átfogó epidemiológiai tanulmányukban az átvészeltséget - számos más országéhoz hasonlóan - az életkor függvényében növekvőnek jelzik. FRENKEL próba és komplementkötési reakció (KKR) alkalmazásával végzett vizsgálataik szerint a 60 éves életkor eléréséig a lakosság 52, 9%-a esik át a fertőzésen. Az említett adatok tükrében érthető, hogy a - patológiai szempontból elsősorban jelentős akut-, illetve szubakut- toxoplasmosis felismerésében használt módszerek diagnosztikus értéke nem egyszerűen az ellenanyagok detektálhatóságának függvénye. A módszerek értékét és felhasználási területüket az szabja meg, hogy mennyiben lehet ezekkel az "aktív", ill. "latens" toxoplasmosist felismerni és elkülöníteni. Munkánk során az IFA technikát éppen emiatt a KKR-val hasonlítottuk össze, mely utóbbi a betegség akut és szubakut szakát jelző alapmódszer (2, 13, 15, 18). ANYAGOK ÉS MÓDSZEREK Vizsgált savók A vérsavók zömmel neurológiai, szemészeti, belgyógyászati, valamint endokrinológiai osztályok beteganyagából származtak, melyeket részint toxoplasmosis gyanúja, részint differenciáldiagnosztikai okok miatt küldtek laboratóriumunkba. A vérsavókat leválasztásuk után, felhasználásig -20°C-on tároltuk. Toxoplasma törzs Az antigén készítéséhez spf. kategóriájú, CFLP egérben, 3 naponkénti i.p. oltással passzált, virulens RH törzs került felhasználásra. Solubilis antigén a KKR-hez A fertőzött egerek peritonealis exsudatumából JIROVECZ, ZOLTAI N. által módosított módszere alapján készítettük (19). A KKR kivitele csőreakcióban, KOLMER szerint hidegkötéssel történt, 1:10 kiinduló higítással. Lemezantigén készítése az IFA-hoz a) A multispot lemezek elkészítése Zsírtalanított tárgylemezekre, a reakcióhelyeknek megfelelő számú, kis glicerincseppeket viszünk fel. Egy lemezen 8-10 reakcióhelyet képezünk ki két sorban, így egy lemezre két savó hígítási sorát vihetjük fel. A lemezeket ezután teflon sprayvel lefújjuk (Sprüh mit TeflonDuPont), s a teflon bevonat megkötése után a glicerint folyóvizes, majd deszt. vizes öblítéssel eltávolítjuk. A teflon mentes, kör alakú reakcióhelyek lehetővé teszik az eljárás anyagtakarékos, mikromódszerként történő kivitelét, meggátolják a reakcióelegyek keveredését, s a mikroszkópos értékeléskor jól azonosíthatóak. A teflon bevonaton hegyes eszközzel (pl. bontótű) a lemezek s a reakcióhelyek jelzése, számozása is könnyűszerrel megoldható, b) A toxoplasma suspensio elkészítése A toxoplasmával oltott egerek hasüregét (3.nap p.i.) steril fiziológiás sóoldattal kimossuk. Antigénként csak a vvt-t és baktériumokat nem tartalmazó, fehérvérsejtekben szegény, de trophozoitokat dúsan tartalmazó exsudatumot használjuk fel. A mosadékot 60-90 percig szobahőn állni hagyjuk, majd 1-2 percig max. 5ÓÖ rpm-el centrifugáljuk, a sejthalmazok és egyéb összecsapódott rögök eltávolítása végett. A felülúszóban maradt trophozoitokat kétszer mossuk pH 7,4 PBS-ben, 10-10 percig 1 500 rpm-el centrifugálva. Végül a mosott üledéket ugyanígy PBS-ben suspendáljuk, olyan mértékig hígítva, hogy l-l csepp mintegy 500 trophozoitot tartalmazzon. c) A lemezantigén elkészítése és tárolása A multispot lemezek reakcióhelyeire l-l csepp toxoplasma suspensiót viszünk fel, ezeket