A Magyar Hidrológiai Társaság XXIV. Országos Vándorgyűlése (Pécs, 2006. július 5-6.)

2. szekció: A VÍZIKÖZMŰVEK HELYZETE - Dr. Vasdinyei Rita, Bogyóné Asztalos M.,Törökné Kozma A., Fodor József Országos Közegészségügyi Intézet: Cianobaktériumok toxintermelésének vizsgálata molekuláris módszerekkel

Az RT-PCR paraméterei a következőek voltak: a cDNS szintézis 30 percig zajlott 48 °Con. A cDNS-RNS hibridek denaturálása és a reverz transzkriptáz denaturálása 2 percig tartott 94 °C-on, amelyet egy 55-ször ismétlődő ciklus követett. Ez a ciklus egy 30 másodpercig tartó 94 °C-os egyszálúsítási szakaszból, egy 30 másodperces 45 °C-os primer kötődési szakaszból és egy 1 percig tartó 72 °C°-os primer hosszabbodási szakaszból állt. Ezt egy 1 percig tartó 72 °C-os végső lánchosszabbítás követett. Eredmények A cianobaktériumok cilindrospermopsin-termelésének mérése során a vizsgált törzsek közül az Ausztráliából származó C. raciborskii AWT205 és az izraeli Aphanizomenon ovalisporum „Izrael” jelű referenciatörzsek esetén kaptunk pozitív eredményt. A reverz fázisú HPLC során a 11,6 perc elúciós időnél látható csúcs bizonyította számunkra e két törzs cylindrospermopsin termelését (1. ábra). 1. ábra. A C. raciborskii AWT205 törzs HPLC kromatogramja A hazai cianobaktérium törzseknél - ahogy az a 2. ábrán látható kromatogramon is megfigyhető - hiányzott a cylindrospermopsis-termelést igazoló csúcs. 2. ábra. A C. raciborskii ACT 9205 törzs HPLC kromatogramja A C. raciborskii-specifikus rpoC1 szakasz megsokszorozására alkalmazott PCR eredményeként az összes vizsgált C. raciborskii törzs esetében kaptunk PCR terméket, míg a vizsgált Aphanizomenon flos-aquae, Aphanizomenon ovalisporum és Plankthotrix törzseknél nem (3. ábra). 4