Hidrológiai Közlöny, 2015 (95. évfolyam)

2015 / 5-6. különszám - LVI. Hidrobiológus Napok előadásai

14

HIDROLÓGIAI KÖZLÖNY 2015. 95. ÉVF. 5-6. SZ.

Az áprilisi (1304) és a szeptemberi (1309) mintákkal cianobaktérium specifikus primerek felhasználásával végzett DGGE vizsgálatok eredményei alapján a busa e- gyedek tápcsatorna szakaszai közötti különbségek egyik időpontban sem voltak jellemzőek (2. ábra). A vízmintának a busa béltartalom minták cianobaktérium közösségeitől való egyértelmű elkülönülését csak a szeptemberi minta esetében lehetett megfigyelni. A busa egyedek neme vagy testmérete és a tápcsatorna szakaszok baktériumközösségeinek szerkezete között egyik DGGE vizsgálat során sem találtunk összefüggést.

A DGGE módszer előnye, hogy a gélsávokban lévő különálló csíkokból kivágott és visszanyert DNS szakaszok bázissorrendjének elemzésével a mintákban jelenlévő domináns szervezetekről taxonómiai információ nyerhető. A busa egyedek tápcsatornájából ily módon 5 filogenetikai törzs (Cyanobacteria, Proteobacteria, Firmi- cutes, Bacteroidetes, Fusobacteria) 14 baktériumfajának, míg a vízmintákból a Proteobacteria és az Actinobacteria törzsek két eddig tenyésztésbe még nem vont, ún. „CanFilogenetikai törzs/osztálv

Legközelebbi rokon baktériumfai ÍBLASTt

Mintavételi idŐDont

Minta tínus

Cyanobacteria

Microcoleus sp. (JQ687332)

1304

U

Microcystis aeruginosa (KJ746519)

1304; 1309

E; U

Synechococcus sp. (FJ763782)

1304; 1309

E; U

Alphaproteo bacteria

Candidate Pelagibacter sp. (JN941972)

1304; 1305

V

Phenylobacterium falsam (NR 042277)

1306

E

Betaproteo bacteria

Herbaspirillum hinti ease (AB681762)

1304; 1305; 1306; 1309; 1310

E

Pelomonas aquatica (JQ659664)

1304; 1305; 1306

E

Burkholderia cepacia (JN800445)

1304

E

Gammaproteobacteria

Aeromonas sobria (JX501708)

1304; 1305; 1306

E; U

Aeromonas veronii (KC210784)

1304; 1305

E; U

Shewanella putrefaciens (KC607503)

1310

U

Firmicutes

Clostridium gasigenes (AF143692)

1304

U

Clostridium bartlettii (NR 027573)

1306

U

Actinobacteria

Candidate Planktophila limnetica (FJ428831)

1304; 1305; 1306; 1309; 1310

V

Bacteroidetes

Bacteroides sp. (JQ317227)

1310

U

__Fusobacteria_______

Cetobacterium somerae (AB353124)

1304

U

didatus” fajának képviselőit azonosítottuk 97-100 %-os szekvencia egyezéssel (2. táblázat).

1304C-V 1304C-9U 1304C-9E 1304C-4U 1304C-4E 1304C-2E 1304C-2U

10 20 30 40 50 60 70 80 90 100

Hasonlóság (%)

..1...:,m\ I

zz

1309C-V T

™-------w—

i.

1309C-12U K

...............................i. ...

1309C-6U r

13Q9C-3E y

£

1309C-3U ITT"

*.. . . í

1309C-12U I’

I

1309C-6E r"

2. ábra. Az áprilisi és a szeptemberi busa béltartalom és balatoni vízminták cianobaktérium közösségeinek DGGE sávmintázata alapján szerkesztett UPGMA dendrogram

2. táblázat A busa elő- (E) és utóbél (V) tartalom mintákból és a vízmintákból (V) származó DGGE csíkok taxonómiai meghatározásának eredménye a 16S rRNS gén vizsgálata alapján

A fakultatív anaerob anyagcserével jellemezhető Ae- romonas nemzetség két fajának (A. sobria, A. veronii) a képviselői a busa egyedek mindkét tápcsatorna szakaszában és szinte minden tavaszi mintavételi időpontban jellemzők voltak. Az Aeromonas nemzetség fajai széles körben elterjedtek édesvizekben (Langó és mtsai, 2002), jelenlétüket különböző meleg- és hidegvérű vízi állatokból (pl. halakból) is leírták, ahol esetenként súlyos megbetegedéseket is előidézhetnek (Sugita és mtsai, 1995). Az Aeromonas nemzetség képviselőinek a busa tápcsatornában való előfordulását a 2011-es tenyésztésen alapuló és tenyésztéstől független DGGE vizsgálatok során is i- gazoltuk (László és mtsai, 2014).

A Herbaspirillum huttiense (Dobritsa és mtsai, 2010) baktériumfajt a busa egyedek előbél szakaszában valamennyi mintavételi időpontban előforduló, domináns szervezetként határoztuk meg (2. táblázat). Ennek az elsősorban növény asszociált és nitrogén-fixációra képes aerob respiratórikus anyagcserét folytató szervezetnek a halakban való előfordulásáról ez idáig még nincsenek a- datok. A busa egyedek előbél mintáiból további két a Proteobacteria törzsbe tartozó baktériumfaj, a Pelomonas

aquatica (Gomila és mtsai, 2007) és a Burkholderia cepacia jelenlétét igazoltuk. A Pelomonas nemzetségbe tartozó baktériumok jelenlétét DGGE módszerrel járványos héj betegségben szenvedő amerikai homár (Homa- rus americanus) hemolimfájából is kimutatták már (Quinn és mtsai, 2013). A Burkholderia cepacia baktériumfaj domináns előfordulását korábban pl. a nílusi tilápia (Or- eochromis niloticus) utóbél szakaszából írták le (Molina- ri és mtsai, 2003).

A busa utóbél mintákból nem tudtunk azonosítani valamennyi mintavételi időpontra jellemző domináns baktérium taxont, de a 2011-es vizsgálati eredményekkel megegyezően (László és mtsai, 2014) egyes 2013-as mintavételi időpontokban is jellemző szervezetként határoztuk meg a fakultatív anaerob anyagcserére képes She- wanella és a mikroaerotoleráns Cetobacterium nemzetségek képviselőit. A busa egyedek utóbél szakaszából is kimutatott Firmicutes, Bacteroidetes és Fusobacterium törzsekbe tartozó és szigorúan anaerob anyagcserét folytató (pl. Clostridium és Bacteroides) baktériumfajoknak különböző édesvízi halak tápcsatornájában való általános előfordulásáról már korábban is beszámoltak (Fidopias-